- •Физические и физико-химические методы анализа
- •4. Температура плавления (офс 42-0034-07)
- •1. Капиллярный метод
- •2. Открытый капиллярный метод
- •3. Метод мгновенного плавления
- •4. Метод каплепадения
- •5. Температура затвердевания (офс 42-0035-07)
- •Поправочный коэффициент для приведения к нормальному значению
- •6. Температурные пределы перегонки и точка кипения (офс 42-0036-07)
- •Определение температурных пределов перегонки
- •Определение точки кипения
- •7. Плотность (офс 42-0037-07)
- •Метод 1
- •Метод 2
- •Метод 3
- •Метод 4
- •8. Вязкость (офс 42-0038-07)
- •Измерение вязкости на капиллярных вискозиметрах
- •Измерение вязкости на ротационных вискозиметрах
- •Измерение вязкости на вискозиметре с падающим шариком
- •Р ис. 8.4. Вискозиметр с падающим шариком
- •10. Комплексонометрическое титрование
- •Методики определения катионов
- •10. Рефрактометрия (офс 42-0040-07)
- •11. Метод сжигания в колбе с кислородом (офс 42-0089-08)
- •11. Поляриметрия (офс 42-0041-07)
- •11. Поляриметрия (офс 42-0041-07)
- •12.2. Спектрометрия в инфракрасной области
- •Идентификация с использованием стандартных образцов
- •Идентификация с использованием эталонных спектров
- •Минимумы пропускания и допустимые пределы для пленки полистирола
- •Примеси в газах
- •Химические методы анализа
- •18. Определение азота в органических соединениях методом къельдаля (офс 42-0052-07)
- •1. Метод Къельдаля
- •2. Микрометод Къельдаля
- •3. Метод Къельдаля (обратное титрование)
- •19. Определение воды (офс 42-0086-08)
- •1. Метод к. Фишера (полумикрометод)
- •2. Микроопределение воды (кулонометрический метод)
- •3. Определение воды методом дистилляции
- •1.2. Тонкослойная хроматография (офс 42-0094-09)
- •Основные приборы и материалы:
- •Хроматографические пластинки
- •Хроматографические камеры
- •Подвижные фазы (пф)
- •Нанесение проб
- •Способы элюирования
- •Восходящая хроматография
- •Горизонтальная хроматография
- •Способы обнаружения
- •Высокоэффективная тонкослойная хроматография (вэтсх)
- •1.3. Газовая хроматография (офс 42-0095-09)
- •Подвижная фаза
- •Ввод пробы
- •Колонки
- •Детекторы
- •Неподвижные фазы
- •Методика
- •1.4. Высокоэффективная жидкостная хроматография (офс 42-0096-09)
- •Насосная система
- •Смесители
- •Инжекторы
- •Хроматографическая колонка
- •Неподвижная фаза (сорбент)
- •Детекторы
- •Подвижная фаза
- •Система сбора и обработки данных
- •Перечень условий хроматографирования, подлежащих указанию
- •Ионообменная и ионная вэжх
- •Эксклюзионная вэжх
- •Ультраэффективная жидкостная хроматография
- •Общие фармакопейные статьи
- •Физические и физико-химические методы анализа
- •1. ХроматогрАфия (офс 42-0092-09)
- •Хроматограмма и хроматографичеcкие параметры
- •Интерпретация хроматографических данных
- •Расчет содержания определяемого компонента
- •20. Нитритометрия (офс 42-0054-07)
- •Биологические методы контроля
- •25. Аномальная токсичность (офс 42-0060-07) Основной тест
- •Тест для вакцин и сывороток
- •26. Пирогенность (офс 42-0061-07)
- •Материалы и оборудование
- •Проведение испытания
- •Учет результатов
- •27. Бактериальные эндотоксины (офс 42-0062-07)
- •Подтверждение заявленной чувствительности лал-реактива
- •28. Испытание на гистамин (офс 42-0063-07)
- •Подготовка изолированного органа
- •Приготовление разведений стандартного образца и испытуемого лекарственного средства1
- •1. Разведения стандартного образца
- •2. Разведение испытуемого препарата (ип)
- •Регистрирующая система
- •Проведение опыта
- •1. Адаптация изолированного отрезка подвздошной кишки морской свинки к субмаксимальной дозе гистамина
- •2. Испытание ип на гистамин
- •Приготовление разведений стандартного образца испытуемого препарата (ип)
- •Проведение опыта
- •29. Испытание на депрессорные вещества (офс 42-0064-07)
- •Подготовка животного к опыту
- •1. Условия проведения испытания
- •2. Определение антимикробного действия
- •2.1. Устранение антимикробного действия
- •3. Испытание на стерильность
- •3.1. Отбор образцов для анализа
- •3.3. Метод мембранной фильтрации
- •3.3.1. Пробоподготовка водных растворов
- •3.3.2. Пробоподготовка жидкостей, не смешивающихся с водой
- •3.3.3. Пробоподготовка лекарственных средств, растворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.5. Валидация метода мембранной фильтрации при контроле лекарственных средств, обладающих антимикробным действием
- •3.6. Метод прямого посева
- •3.6.1. Пробоподготовка нефильтрующихся жидкостей
- •3.6.2. Пробоподготовка лекарственных средств, нерастворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.6.3. Пробоподготовка твердых лекарственных форм
- •3.7. Условия инкубации посевов
- •3.8. Интерпретация результатов испытания
- •4. Питательные среды
- •4.1. Состав и приготовление питательных сред
- •4.2. Стерильность питательных сред
- •4.3. Определение ростовых свойств питательных сред
- •4.4. Хранение питательных сред
- •1. Определение антимикробного действия лекарственного средства
- •1.2. Работа с тест-микроорганизмами
- •1.3. Проведение испытания
- •1.4. Учет и интерпретация результатов
- •1.5. Способы устранения антимикробного действия лекарственных средств
- •2. Особенности отбора и подготовки образцов для анализа
- •2.1. Твердые лекарственные формы
- •2.2. Мягкие лекарственные формы
- •2.3. Жидкие лекарственные формы
- •2.4. Аэрозоли
- •2.5. Трансдермальные пластыри
- •2.6. Лекарственные растительные средства
- •3. Методы количественного определения аэробных бактерий и грибов
- •3.2. Количественное определение микроорганизмов
- •3.2.2. Метод мембранной фильтрации
- •3.2.3. Метод наиболее вероятных чисел (нвч)
- •4. Определение отдельных видов бактерий
- •4.1. Энтеробактерии и подобные им грамотрицательные микроорганизмы
- •4.2. Выявление Escherichia coli
- •4.3. Выявление бактерий рода Salmonella
- •4.4. Выявление Pseudomonas aeruginosa
- •4.5. Выявление Staphylococcus aureus
- •5. Биохимические тесты для идентификации микроорганизмов
- •5.1. Тест на наличие цитохромоксидазы
- •5.2. Тест на наличие индола
- •5.3. Тест на наличие коагулазы (реакция плазмокоагуляции)
- •6. Питательные среды. Определение ростовых и селективных свойств
- •6.1. Рекомендуемые растворы и питательные среды
- •6.2. Ростовые и селективные свойства питательных сред
- •Характеристика культуральных свойств тест-микроба
- •Тест-микроорганизмы и условия для биологического определения активности антибиотиков
- •Состав буферных растворов
- •Приложение 1
- •Приложение 2
- •3. Спектрометрия в ближней инфракрасной области (офс 42-0099-09)
- •Факторы, влияющие на результаты измерений
- •Идентификация
- •Количественный анализ
Способы обнаружения
Обнаружение (детектирование) хроматографических зон после проведения качественной и полуколичественной ТСХ осуществляют следующими способами:
– наблюдением под УФ-светом;
– опрыскиванием растворами обнаруживающих реагентов;
– выдерживанием в парах обнаруживающего реагента;
– погружением в растворы обнаруживающих реагентов в специальных камерах.
Высокоэффективная тонкослойная хроматография (вэтсх)
Эффективность разделения увеличивается как вследствие увеличения площади раздела подвижной и неподвижной фазы за счет уменьшения диаметра частиц сорбента, так и благодаря большей однородности размеров этих частиц. Применяют ВЭТСХ-пластинки, выполненные как в нормально-фазовом (полярная НФ), так и в обращенно-фазовом (неполярная НФ) вариантах.
По сравнению с классической ТСХ использование высокоэффективных пластинок позволяет:
– увеличить число анализируемых проб за счет уменьшения диаметра стартовых пятен (до 1–2 мм) или длины полос (до 5–10 мм);
– уменьшить промежутки между стартовыми пятнами (до 5 мм);
– уменьшить время хроматографирования за счет уменьшения пробега фронта подвижной фазы (ПФ);
– уменьшить расход (объем) ПФ;
– снизить пределы обнаружения пятен и количественного определения определяемых веществ в 10–100 раз.
Применение ВЭТСХ обеспечивает получение более компактных пятен разделяемых соединений, что улучшает метрологические характеристики количественного определения с помощью сканирующей хроматоденситометрии.
1.3. Газовая хроматография (офс 42-0095-09)
Газовая хроматография – это метод колоночной хроматографии, в котором подвижной фазой служит газ, движущийся через колонку, заполненную неподвижной фазой.
Применяют как газоадсорбционную, так и газожидкостную (преимущественно) хроматографию.
Анализ проводят на специальных приборах – газовых хроматографах.
Основные узлы газового хроматографа: источник подвижной фазы, устройство ввода пробы, колонка с термостатом, детектор, система сбора и обработки данных. Требуемые температурные режимы устройства ввода пробы, колонки и детектора устанавливаются в соответствующих термостатах.
Подвижная фаза
В качестве подвижной фазы используются азот, гелий или водород. Эти газы-носители могут подаваться в систему либо из баллонов, либо из газогенераторов, позволяющих получать газ высокой чистоты. Газ проходит через блок регулировки и стабилизации потока газа, обеспечивающий возможность измерения его скорости и давления на входе в хроматограф.
Ввод пробы
Наиболее распространен способ ввода жидкой пробы (раствора) в испаритель шприцем через самоуплотняющуюся мембрану. Однако хроматограф может быть укомплектован дозатором (в том числе, автоматическим) для ввода газообразных, жидких или твердых веществ.
Инжектирование методом выдувания и накопления (purge and trap) используется для извлечения легколетучих компонентов и накопления их в специальной адсорбционной ловушке (колонке) с последующей быстрой тепловой десорбцией и вводом в хроматографическую колонку.
Устройство парофазного концентрирования (head-space) позволяет повысить чувствительность определения летучих соединений.