- •Физические и физико-химические методы анализа
- •4. Температура плавления (офс 42-0034-07)
- •1. Капиллярный метод
- •2. Открытый капиллярный метод
- •3. Метод мгновенного плавления
- •4. Метод каплепадения
- •5. Температура затвердевания (офс 42-0035-07)
- •Поправочный коэффициент для приведения к нормальному значению
- •6. Температурные пределы перегонки и точка кипения (офс 42-0036-07)
- •Определение температурных пределов перегонки
- •Определение точки кипения
- •7. Плотность (офс 42-0037-07)
- •Метод 1
- •Метод 2
- •Метод 3
- •Метод 4
- •8. Вязкость (офс 42-0038-07)
- •Измерение вязкости на капиллярных вискозиметрах
- •Измерение вязкости на ротационных вискозиметрах
- •Измерение вязкости на вискозиметре с падающим шариком
- •Р ис. 8.4. Вискозиметр с падающим шариком
- •10. Комплексонометрическое титрование
- •Методики определения катионов
- •10. Рефрактометрия (офс 42-0040-07)
- •11. Метод сжигания в колбе с кислородом (офс 42-0089-08)
- •11. Поляриметрия (офс 42-0041-07)
- •11. Поляриметрия (офс 42-0041-07)
- •12.2. Спектрометрия в инфракрасной области
- •Идентификация с использованием стандартных образцов
- •Идентификация с использованием эталонных спектров
- •Минимумы пропускания и допустимые пределы для пленки полистирола
- •Примеси в газах
- •Химические методы анализа
- •18. Определение азота в органических соединениях методом къельдаля (офс 42-0052-07)
- •1. Метод Къельдаля
- •2. Микрометод Къельдаля
- •3. Метод Къельдаля (обратное титрование)
- •19. Определение воды (офс 42-0086-08)
- •1. Метод к. Фишера (полумикрометод)
- •2. Микроопределение воды (кулонометрический метод)
- •3. Определение воды методом дистилляции
- •1.2. Тонкослойная хроматография (офс 42-0094-09)
- •Основные приборы и материалы:
- •Хроматографические пластинки
- •Хроматографические камеры
- •Подвижные фазы (пф)
- •Нанесение проб
- •Способы элюирования
- •Восходящая хроматография
- •Горизонтальная хроматография
- •Способы обнаружения
- •Высокоэффективная тонкослойная хроматография (вэтсх)
- •1.3. Газовая хроматография (офс 42-0095-09)
- •Подвижная фаза
- •Ввод пробы
- •Колонки
- •Детекторы
- •Неподвижные фазы
- •Методика
- •1.4. Высокоэффективная жидкостная хроматография (офс 42-0096-09)
- •Насосная система
- •Смесители
- •Инжекторы
- •Хроматографическая колонка
- •Неподвижная фаза (сорбент)
- •Детекторы
- •Подвижная фаза
- •Система сбора и обработки данных
- •Перечень условий хроматографирования, подлежащих указанию
- •Ионообменная и ионная вэжх
- •Эксклюзионная вэжх
- •Ультраэффективная жидкостная хроматография
- •Общие фармакопейные статьи
- •Физические и физико-химические методы анализа
- •1. ХроматогрАфия (офс 42-0092-09)
- •Хроматограмма и хроматографичеcкие параметры
- •Интерпретация хроматографических данных
- •Расчет содержания определяемого компонента
- •20. Нитритометрия (офс 42-0054-07)
- •Биологические методы контроля
- •25. Аномальная токсичность (офс 42-0060-07) Основной тест
- •Тест для вакцин и сывороток
- •26. Пирогенность (офс 42-0061-07)
- •Материалы и оборудование
- •Проведение испытания
- •Учет результатов
- •27. Бактериальные эндотоксины (офс 42-0062-07)
- •Подтверждение заявленной чувствительности лал-реактива
- •28. Испытание на гистамин (офс 42-0063-07)
- •Подготовка изолированного органа
- •Приготовление разведений стандартного образца и испытуемого лекарственного средства1
- •1. Разведения стандартного образца
- •2. Разведение испытуемого препарата (ип)
- •Регистрирующая система
- •Проведение опыта
- •1. Адаптация изолированного отрезка подвздошной кишки морской свинки к субмаксимальной дозе гистамина
- •2. Испытание ип на гистамин
- •Приготовление разведений стандартного образца испытуемого препарата (ип)
- •Проведение опыта
- •29. Испытание на депрессорные вещества (офс 42-0064-07)
- •Подготовка животного к опыту
- •1. Условия проведения испытания
- •2. Определение антимикробного действия
- •2.1. Устранение антимикробного действия
- •3. Испытание на стерильность
- •3.1. Отбор образцов для анализа
- •3.3. Метод мембранной фильтрации
- •3.3.1. Пробоподготовка водных растворов
- •3.3.2. Пробоподготовка жидкостей, не смешивающихся с водой
- •3.3.3. Пробоподготовка лекарственных средств, растворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.5. Валидация метода мембранной фильтрации при контроле лекарственных средств, обладающих антимикробным действием
- •3.6. Метод прямого посева
- •3.6.1. Пробоподготовка нефильтрующихся жидкостей
- •3.6.2. Пробоподготовка лекарственных средств, нерастворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.6.3. Пробоподготовка твердых лекарственных форм
- •3.7. Условия инкубации посевов
- •3.8. Интерпретация результатов испытания
- •4. Питательные среды
- •4.1. Состав и приготовление питательных сред
- •4.2. Стерильность питательных сред
- •4.3. Определение ростовых свойств питательных сред
- •4.4. Хранение питательных сред
- •1. Определение антимикробного действия лекарственного средства
- •1.2. Работа с тест-микроорганизмами
- •1.3. Проведение испытания
- •1.4. Учет и интерпретация результатов
- •1.5. Способы устранения антимикробного действия лекарственных средств
- •2. Особенности отбора и подготовки образцов для анализа
- •2.1. Твердые лекарственные формы
- •2.2. Мягкие лекарственные формы
- •2.3. Жидкие лекарственные формы
- •2.4. Аэрозоли
- •2.5. Трансдермальные пластыри
- •2.6. Лекарственные растительные средства
- •3. Методы количественного определения аэробных бактерий и грибов
- •3.2. Количественное определение микроорганизмов
- •3.2.2. Метод мембранной фильтрации
- •3.2.3. Метод наиболее вероятных чисел (нвч)
- •4. Определение отдельных видов бактерий
- •4.1. Энтеробактерии и подобные им грамотрицательные микроорганизмы
- •4.2. Выявление Escherichia coli
- •4.3. Выявление бактерий рода Salmonella
- •4.4. Выявление Pseudomonas aeruginosa
- •4.5. Выявление Staphylococcus aureus
- •5. Биохимические тесты для идентификации микроорганизмов
- •5.1. Тест на наличие цитохромоксидазы
- •5.2. Тест на наличие индола
- •5.3. Тест на наличие коагулазы (реакция плазмокоагуляции)
- •6. Питательные среды. Определение ростовых и селективных свойств
- •6.1. Рекомендуемые растворы и питательные среды
- •6.2. Ростовые и селективные свойства питательных сред
- •Характеристика культуральных свойств тест-микроба
- •Тест-микроорганизмы и условия для биологического определения активности антибиотиков
- •Состав буферных растворов
- •Приложение 1
- •Приложение 2
- •3. Спектрометрия в ближней инфракрасной области (офс 42-0099-09)
- •Факторы, влияющие на результаты измерений
- •Идентификация
- •Количественный анализ
4.2. Стерильность питательных сред
После стерилизации не менее 5 % пробирок от каждой партии питательной среды помещают в термостат и инкубируют в течение как минимум 14 сут. параллельно с посевом на стерильность.
4.3. Определение ростовых свойств питательных сред
Ростовые свойства питательных сред определяют для каждой серии питательной среды, выпущенной промышленностью и имеющей номер серии, и для каждой партии среды, приготовленной в лаборатории.
В 2 пробирки со средой вносят культуру тест-штамма, каждого отдельно, в количестве 10-100 КОЕ (табл. 31.4). Инкубируют в соответствии с условиями, описанными в табл. 31.4. Если в течение времени инкубации в инокулированных средах визуально отмечают рост микроорганизмов, среду считают пригодной для использования.
Таблица 31.4
Тест-микроорганизмы для определения ростовых свойств питательных сред и определения антимикробного действия
Питательные среды |
Тест-микроорганизмы |
Условия инкубации |
||
Вид |
Штамм |
Температура |
Время инкубации |
|
Жидкая тиог- ликолевая среда |
Аэробные бактерии: Bacillus subtilis АТСС 6633 Staphylococcus ATCC 6538-Р aureus Pseudomonas АTCC 9027 aeruginosa |
32,5 ± 2,5 ºС |
3 сут |
|
Анаэробные бактерии: Clostridium ГИСК 272 sporogenes |
32,5 ± 2,5 ºС |
3 сут |
||
Жидкая соево-казеино- вая среда
Жидкая среда Сабуро |
Грибы: Candida albicans NCTC 885-653
Aspergillus niger АТСС 9642 |
22,5 ± 2,5 ºС |
5 сут |
|
АТСС – Американская коллекция типовых культур, США.
ГИСК – Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ГИСК им. Л.А.Тарасевича, Россия.
NCTC – Национальная коллекция типовых культур.
4.4. Хранение питательных сред
Питательные среды, приготовленные в лаборатории, хранят при температуре от 2 до 25 ºС в защищенном от света месте в течение не более 1 мес. Если при хранении тиогликолевой среды, содержащей резазурин, верхний слой среды (более 1/3 объема) окрасится в розовый цвет, то среду можно регенерировать нагреванием на кипящей водяной бане в течение 10-15 мин до исчезновения розовой окраски, с последующим быстрым охлаждением. Если окраска не исчезает после нагревания, то среду считают не пригодной к употреблению. Регенерацию среды можно проводить только один раз.
Питательные среды промышленного производства, готовые к употреблению, хранят в плотно укупоренных сосудах при условии сохранения их стерильности и ростовых свойств в течение срока годности.
Сухие питательные среды промышленного производства хранят в соответствии с инструкцией по использованию и уничтожают по истечении срока годности, указанного производителем.
32. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА (ОФС 42-0067-07)
Нестерильные лекарственные средства (субстанции, различные формы препаратов – таблетки, капсулы, гранулы, растворы, суспензии, сиропы, мази, суппозитории и др., а также вспомогательные вещества) могут быть контаминированы микроорганизмами. В них допускается наличие лимитированного количества микроорганизмов, при отсутствии определенных видов бактерий, представляющих опасность для здоровья человека.
Приведенные ниже методы определения микробиологической чистоты распространяются на нестерильные лекарственные средства (субстанции и препараты), вспомогательные вещества и полупродукты, а также используются при определении эффективности антимикробных консервантов и мониторинге производственных помещений фармацевтических предприятий и лабораторий контрольных служб.
В табл. 32.1 и 32.2 приведены требования к лекарственным средствам (лекарственным препаратам и субстанциям), а также вспомогательным веществам, используемым в производстве лекарственных препаратов.
Таблица 32.
Категория |
Препараты |
Рекомендуемые требования |
1 |
2 |
3 |
1 |
Препараты, к которым предъявля- ется требование «стерильность» |
Препараты должны быть стерильными |
2 |
● Для применения местно, на- ружно, интравагинально ● Для введения в полости уха, носа ● Респираторно ● Трансдермальные пластыри
За исключением тех лекарствен- ных препаратов, которые должны быть стерильными |
● Общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) не более 102 в 1 г или в 1 мл, или на 1 пластырь (включая клейкую сторону и основу) ● Отсутствие энтеробактерий и других грамотрицательных бак- терий на 1 пластырь (включая клейкую сторону и основу) ● Не более 101 энтеробактерий и других грамотрицательных бак- терий в 1 г или в 1 мл остальных препаратов ● Отсутствие Pseudomonas aerugi- nosa в 1 г или в 1 мл, или на 1 пластырь (включая клейкую сторону и основу) ● Отсутствие Staphylococcus au- reus в 1 г или в 1 мл, или на 1 пластырь (включая клейкую сторону и основу) |
1 |
2 |
3 |
3 |
А. Для приема внутрь или введения ректально
Б. Для приема внутрь – из сырья природного происхождения (живот- ного, растительного или минераль- ного), уровень микробной загрязненности которого невоз- можно снизить в процессе предва- рительной обработки и относительно которого федераль- ный орган контроля качества ле- карственных средств допускает уровень микробной загрязненности более 103 жизнеспособных микро- организмов в 1 г или в 1 мл.
Исключением являются лекарст- венные растительные средства, включенные в Категорию 4 |
● Общее число аэробных бактерий не более 103 в 1 г или в 1 мл ● Общее число грибов не более 102 в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Escherichia coli в 1 г или в 1 мл
● Общее число аэробных бактерий не более 104 в 1 г или в 1 мл ● Общее число грибов не более 102 в 1 г или в 1 мл ● Энтеробактерий и других грам- отрицательных бактерий не более 102 в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Escherichia coli в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл ● Отсутствие Staphylococcus au- reus в 1 г или в1 мл |
4 |
Лекарственные растительные сред- ства, состоящие из одного вида сырья (фасованная продукция) или нескольких (сборы), а также расти- тельное сырье «ангро»
А. Лекарственные растительные средства или лекарственное сырье «ангро», применяемые в виде на- стоев и отваров, приготовленные с использованием кипящей воды
Б. Лекарственные растительные средства или растительное сырье «ангро», приготовленные без ис- пользования кипящей воды |
● Общее число аэробных бактерий не более 107 в 1 г ● Общее число грибов не более 105 в 1г ● Escherichia coli не более 102 в 1 г
● Общее число аэробных бактерий не более 105 в 1 г ● Общее число грибов не более 104 в 1 г
● Энтеробактерий и других грам- отрицательных бактерий не более 103 в 1 г ● Отсутствие Escherichia coli в 1 г ● Отсутствие Salmonella в 10 г |
Таблица 32.2
Микробиологическая чистота субстанций и вспомогательных веществ для производства лекарственных препаратов
Катего- рия |
Субстанции, вспомогательные вещества |
Рекомендуемые нормы |
1 |
2 |
3 |
1.2 |
Субстанции для производства: А. Стерильных лекарственных пре- паратов, которые не подвер- гаются стерилизации
Б. Стерильных лекарственных пре- паратов, которые подвергаются стерилизации
В. Нестерильных лекарственных препаратов, относящихся к Кате- гории 2 |
Субстанции должны быть сте- рильными
● Общее число аэробных бактерий и грибов (суммарно) не более 102 в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие энтеробактерий в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Pseudomonas aerugi- nosa в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Staphylococcus au- reus в 1 г или в 1 мл |
2.2 |
Субстанции синтетического происхождения для производства нестерильных лекарственных пре- паратов |
● Общее число аэробных бактерий не более 103 в 1 г или в 1 мл ● Общее число грибов не более 102 в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Escherichia coli в 1 г или в 1 мл |
3.2 |
Субстанции природного происхож- дения (растительного, животного или минерального) для производ- ства нестерильных лекарственных препаратов |
● Общее число аэробных бактерий не более 104 в 1 г или в 1 мл ● Общее число грибов не более 102 в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Escherichia coli в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл ● Отсутствие Pseudomonas aerugi- nosa в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Staphylococcus au- reus в 1 г или в 1 мл ● Энтеробактерий не более 102 в 1 г или в 1 мл |
4.2 |
Вспомогательные вещества (мука пшеничная, крахмал, тальк и т.д.) |
● Общее число аэробных бактерий не более 103 в 1 г или в 1 мл ● Общее число грибов не более 102 в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Escherichia coli в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Salmonella в 10 г или в 10 мл ● Отсутствие Pseudomonas aerugi- nosa в 1 г или в 1 мл ● Отсутствие Staphylococcus au- reus в 1 г или в 1 мл ● Других энтеробактерий- не более 102 в 1 г или в 1 мл |
Примечания к табл. 32.1 и 32.2
1. В нормативных документах могут быть указаны в виде исключения и другие нормы в зависимости от состава препарата и особенностей технологического процесса производства.
2. В нормативных документах на препараты для детей должны быть введены более жесткие нормы, а именно: количество аэробных бактерий в 1 г или в 1 мл – в пределах от 100 до 500, количество грибов – от 10 до 50, отсутствие бактерий семейства Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus.
3. При обнаружении во время проведения испытания других патогенных бактерий, кроме указанных выше, считают, что качество лекарственных средств, субстанций и вспомогательных веществ не соответствует требованиям по показателю «микробиологическая чистота».
Испытание на микробиологическую чистоту включает способы подготовки образцов различных лекарственных форм перед испытанием, отбор образцов для анализа, методы количественного определения жизнеспособных бактерий и грибов, выявление и идентификацию отдельных видов бактерий, наличие которых недопустимо или ограничено в нестерильных лекарственных средствах, а также питательные среды, растворы и реактивы.
Испытание проводят в асептических условиях, чтобы предотвратить контаминацию исследуемых образцов.