15.9 Твердофазный синтез пептидов

Полимерный носитель – полистирол, обработанный хлорметиловым эфиром:

Стадии синтеза Н-Leu-Gly-Ala-ОН (лейцилглютамилаланин):

1-й этап — получение Вос-защищенного аланина

2-й этап — «привязывание» Вос-аланина к хлорметилированному полистиролу:

3-й этап — промывание водой и удаление защитной групп

4-й этап — промывание водой и добавление Вос-глицина

5-й этап — промывание водой и снятие защитной группы

6-й этап — промывание водой и добавление Вос-лейцина

7-й этап — удаление Вос-группы, снятие пептида с носителя

15.10 Метод сенгера

Метод определения N-концевой аминокислоты в полипептидной цепи с помощью 2,4-динитрофторбензола

Идентификация 2,4-Динитрофенильного производного N-концевой аминокислоты основана на резко отличающихся свойствах от аминокислот: оно легко отделяется и определяется путем измерения констант или сравнения с эталонным соединением.

15.11 Дансильный метод (метод Хартли и Грея)

Метод определения N-концевой аминокислоты в полипептидной цепи путем получения дансильного производного N-концевой аминокислоты, его выделения и идентификации путем определения констант или сравнением с эталоном.

Дансилхлорид

15.12 Метод эдмана

Метод заключается в определении последовательности a-аминокислот методом деградации полипептидной цепи с помощью фенилизотио-цианата. Метод позволяет по очереди отщеплять N-концевые аминокислотные остатки в виде фенилтиогидантоинов и их идентифицировать.