Лабораторна робота №22 Якісна реакція на ацетоацетатну кислоту. Реакція Герхарда

Мета роботи: Вивчити взаємодію ацетоацетатної кислоти з ферум (III) хлоридом та за отриманими результатами зробити клініко-діагностичний висновок (стор.119).

Принцип реакції: Внаслідок взаємодії ацетоацетатної кислоти з ферум (III) хлоридом за рахунок комплексного зв'язку ферума з енольною формою ацетоацетатної кислоти утворюється забарвлена в червоний колір сполука:

CH₃–C–CH₂–COOH CH₃–C=CH–COOH

||

O OH

Кетоформа Енольна форма

ацетоацетатної кислоти ацетоацетатної кислоти

Характерним для ацетоацетатної кислоти є те, що під час нагрівання або через тривалий термін забарвлення зникає внаслідок довільного декарбоксилювання ацетоацетатної кислоти:

CH₃–C–CH₂–COOН ® CH₃–CН–CH₃ + СО₂

|| |

O OH

ацетоацетатна кислота пропанол-2

Матеріали та реактиви: сеча нормальна, сеча патологічна (у 100 мл сечі розчиняють, збовтуючи, 0,5 мл ацето­оцтового ефіру), піпетки градуйовані на 2 мл, штативи для пробірок та піпеток, фільтрувальний папір, розчин з масовою часткою ферум (III) хлориду 10 %.

Хід визначення

У пробірку наливають 2 мл нормальної сечі, в іншу – 2 мл патологічної сечі. Потім в обидві пробірки по краплях додають розчин ферум (III) хлориду поки не припиниться осадження фосфатів. Осад відфільтровують і до фільтрату вносять ще кілька краплин розчину ферум (III) хлориду. У пробірці з патологічною сечею розчин набуває червоного забарвлення.

У нормі сеча не містить ацетон й ацетоацетатну кислоту.

Лабораторна робота №23 Якісне виявлення ацетону у біологічних рідинах

Мета роботи: Вивчити взаємодію ацетону з йодом та за отриманими результатами зробити клініко-діагностичний висновок (стор. 119).

Принцип реакції: Внаслідок додавання розчину йоду та лугу до сечі, яка містить ацетон, рідина стає каламутною, випадає осад йодоформу, який має характерний запах. Реакція протікає у дві стадії. Спочатку утворюється трийодоацетон, який легко гідролізується лугом до йодоформу та оцтової кислоти:

СН₃–СО–СН₃ + 3І₂ + 3NaOH → СН₃–СО–СІ₃ + 3NaI + 3H₂O

ацетон трийодоацетон

СН₃–СО–СІ₃ + NaOH → CHI₃ + CH₃COONa

йодоформ

Матеріали, реактиви, обладнання: патологічна сеча (до 100 мл сечі додають 2 мл ацетону), розчин з масовою часткою натрій гідроксиду 10 %, розчин з масовою часткою йоду в калій йодиді 10 %, піпетки градуйовані на 1 мл, 2 мл, штатив з пробірками, штатив для піпеток.

Хід визначення

До 2 мл сечі додають 1 мл розчину натрій гідроксиду, а потім розчин йоду в калій йодиді до появи жовтуватого забарвлення. За наявності ацетону суміш каламутніє й набуває запаху йодоформу.

У нормі сеча не містить ацетон.

Примітка: реакція не є специфічною для ацетону, оскільки під час взаємодії йоду з ацетальдегідом і етанолом також утворюється йодоформ.