Лабораторна робота №24 Якісна реакція на β-оксимасляну кислоту

Мета роботи: Вивчити взаємодію β-оксимасляної кислоти з натрій нітропрусидом та за отриманими результатами зробити клініко-діагностичний висновок (стор. 119).

Принцип реакції: Після окиснення перекисом водню β-оксимасляна кислота може взаємодіяти з натрій нітропрусидом з утворенням забарвленої у червоний колір комплексної сполуки.

Матеріали, реактиви, обладнання: досліджувана сеча, концентрована оцтова кислота, розчин з масовою часткою перекису Гідрогену (H₂O₂) 3 %, розчин з масовою часткою натрій нітропрусиду 10 %, розчин з масовою часткою амоній гідроксиду (NH₄OH) 25 %, склянка хімічна термостійка, крапельниці, піпетки градуйовані на 1 мл, 10 мл, штатив з пробірками, штатив для піпеток, електрична плитка.

Хід визначення

Сечу заздалегідь звільнюють від ацетону та ацетоаце­татної кислоти. Для цього в склянку з 10 мл сечі додають 10 мл води та кілька крапель оцтової кислоти. Розчин випарюють до половини попереднього об'єму, додають 1 мл розчину перекису гідрогену, нагрівають 1 хвилину та охолоджують. Внаслідок цього окислюється β-оксимасляна кислота. Потім у склянку вливають десять краплин розчину натрій нітропрусиду, добре струшують, нашаровують 2 мл досліджуваного розчину. Через деякий час, якщо сеча містить β-оксимасляну кислоту, утворюється кільце пур­пурного кольору.

У нормі сеча не містить β-оксимасляну кислоту.

Клініко-діагностичне значення визначення кетонових тіл у біологічних рідинах

Під терміном "кетонові тіла" розуміють ацетон, ацето­ацетатну та β-оксимасляну кислоти, які утворюються в печінці. У нормі кетонові тіла в крові містяться в межах 0,85 – 1,7 ммоль/л. У сечі кетонові тіла у нормі не виявляються. Збільшення вмісту кетонових тіл у сироватці крові вище норми (кетонемія) і виявлення їх у сечі (кетонурія) дають підставу припускати наявність патології обміну ліпідів, а саме, пов'язаної з порушеннями процесів травлення або наявністю шлунково-кишкової інфекції.

Це може бути викликане в першу чергу недостатнім надходженням панкреатичної ліпази в кишечник, або порушенням виділення жовчі в кишечник. Посилюється процес утворення кетонових тіл при нестачі в організмі вуглеводів, коли головним джерелом енергії є тканинні резерви жиру. Такі умови виникають при голодуванні, блювотах, безвуглеводній дієті, тяжкому цукровому діабеті.

Запальні процеси (ентерити, ентероколіти) блокують процес нормального всмоктування продуктів розщеплення жирів, що призводить до виявлення кетонових тіл у сечі.

Контрольні питання до розділу 7

1. Класифікація та номенклатура ліпідів.

2. Біологічна роль ліпідів, навести приклади.

3. Перетравлення й всмоктування ліпідів у шлунково-кишковому тракті.

4. Охарактеризуйте терміни: “кетонові тіла”, “кетонурія”, “кетонемія”.

5. Охарактеризуйте патології ліпідного обміну.

6. Наведіть недоліки якісних реакцій на кетонові тіла?

Біохімічні показники для дорослих у нормі

Усі показники позначають концентрацію речовин (активність ферментів) у сироватці або плазмі крові

Альбумін	35-50 г/л
Амоніак	10-47 мкмоль/л
Амілаза	< 300 мО/л
Аспартаттрансаміназа (АСТ)	10-50 мО/л;0,1-0,45 ммоль/(г·л)
Аспартатамінотрансфераза (АсАТ)	0,1-0,45 мкмоль/(год.·мл)
Аланінамінотрансфераза (АлАТ)	0,1-0,68 ммоль/(год.·л)
Кисла фосфатаза: загальна простатична	4-11 мО/л < 4 мО/л
Лужна фосфатаза: чоловіки жінки	54-137 мО/л; 0,9-2,29 мккат/л 44-126 мО/л; 0,74-2,1 мккат/л
Білірубін: загальний	3-20 мкмоль/л
Холестерин загальний	< 5,2 ммоль/л
Ліпопротеїни: високої густини (ЛВГ) низької густини (ЛНГ)	> 1,2 ммоль/л < 3,5 ммоль/л
Креатинін: чоловіки жінки	44-115 мкмоль/л 44-97 мкмоль/л
Глюкоза: натще	2,8-6,0 ммоль/л
Гемоглобін: чоловіки жінки	130-180 г/л 120-160 г/л
Йони Н+: артеріальна кров	35–46 нмоль/л (рН=7,36-7,44)
Інсулін: натще при гіпоглікемії	3–15 мО/л < 3 мО/л
Білок загальний	60-80 г/л
Тригліцериди натще	0,4-1,8 ммоль/л
Сечовина	3,3-6,7 ммоль/л
Сечова кислота: чоловіки жінки	0,24-0,50ммоль/л; 4-8,5мг/100мл 0,16-0,44ммоль/л; 3-7,5мг/100мл
Кальцій	2,2-2,6 ммоль/л
Купрум (мідь)	12-19 мкмоль/л
Магній	0,7-1,0 ммоль/л
Калій	3,6-5,0 ммоль/л
Натрій	135-145 ммоль/л
Цинк	12-20 мкмоль/л