4.1 Особенности и методы отбора проб воздуха

В объемных помещениях отбирают одну пробу на каждые 20 м² по типу «конверта» на высоте 1,6-1,8 метра от пола, в больничных палатах на уровне коек, в операционных, перевязочных-на уровне операционного и перевязочного стола и т.д. Пробы забирают днем, в период наибольшей активности, после влажной уборки.

Методы отбора проб воздуха

Седиментационный метод Р. Коха-простой, доступный в любых условиях и помещениях, используется для ориентировочной оценки степени обсемененности воздуха. Метод предполагает осаждение микробов на поверхность плотной среды (МПА) под действием силы тяжести. Для определения ОМЧ в воздухе, открытые чашки Петри с питательным агаром устанавливают методом «конверта», одну чашку в центре и четыре в углах помещения на 10 мин. Для выявления S. aureus чашки с ЖСА устанавливают на 40 мин. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37⁰С 24 ч и сутки при комнатной температуре. Затем подсчитывают количество колоний. Перерасчет КОЕ на 1 м³ (1000) воздуха производят по формуле В. Л. Омелянского-на 100 см³поверхности агара за 5 мин оседают бактерии из 10 л воздуха. Метод неточный, результаты занижены примерно в 3 раза. Более достоверные данные получают при использовании аспирационного метода.

Аспирационной метод-метод заключается в активном принудительном осаждении микроорганизмов на поверхность плотной питательной среды или в улавливающую жидкость при помощи аппарата Кротова или пробоотборника аэрозольного бактериологического (ПОВ-1). Приборы позволяют пропускать нужный объем воздуха за короткое время. Для определения ОМЧ прокачивают 100 литров воздуха, а для определения S. aureus 250 л со скоростью 25 литров в минуту.

Для определения ОМЧ используют 2 % МПА, а для золотистых стафилококков применяют элективный желточно-солевой агар. Санитарно-микробиологические показатели воздуха нормируются в зависимости от функционального назначения и класса чистоты помещений. Допустимые уровни микробной обсемененности воздуха ЛПО представлены в таблице № 11.

4.2 Определение омч воздуха послеродовой палаты аспирационным методом

ОМЧ-общее микробное число воздуха-количество мезофильных сапрофитов (КОЕ) в 1 м³ воздуха, выросших на поверхности питательного агара.

1. Провести посев воздуха по 100 л в пяти точках помещения по типу «конверта» с помощью аппарата Кротова на 2 % МПА;

2. Чашки поместить в термостат при t 37ºС на 24 ч, и еще на 24 часа оставить при комнатной температуре;

3. Провести подсчет количества колоний на всех пяти чашках и найти среднюю величину;

3. Рассчитать ОМЧ по формуле: ОМЧ=а·1000/V, где а-количество выросших колоний, V-объем засеянного воздуха.

4.3 Определение омч воздуха бактериологического бокса седиментационным методом

1. Две чашки Петри с МПА поместить на рабочий стол бокса, открыть на 15 минут;

2. Поместить чашки в термостат при t 37ºС на 24 ч;

3. Подсчитать количество выросших колоний;

4. Учет результатов: допускается не более трех колоний на двух чашках

4.4 Определение количества s. Aureus в воздухе помещений класса чистоты а (операционные, родильные залы) аспирационным методом

1. Провести посев 250 л воздуха на желточно-солевой агар с помощью пробоотборника аэрозольного (ПОВ-1) или с помощью аппарата Кротова.

ТАБЛИЦА № 11

Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздушной среды помещений ЛПО и аптек в зависимости от их функционального назначения и класса чистоты (СанПиН 2.1.3.2630-10)

Название помещения	Класс чистоты	Санитарно-микробиологические показатели
		Общее количество микроорганизмов в 1м³ воздуха (КОЕ/м³)		Золотистый стафилококк
		до начала работы	во время работы
Операционные, послеоперационные палаты, реанимационные залы, палаты интенсивной терапии, родильные залы, палаты для новорожденных Аптеки: помещения для приготовления лекарственных форм в асептических условиях.	А	не более 200	не более 500	не должно быть
Послеродовые палаты, палаты для ожоговых больных, для иммуно- компрометированных. Палаты для травмированных и недоношенных детей. Малые операционные, стерилизационные. Чистые и стерильные зоны ЦСО. Аптеки:ассистентская, фасовочная, стерилизационная, дистилляционная.	Б	не более 500	не более 750	не должно быть
Палаты, боксы отделений ЛПО, в том числе инфекционные, кабинеты функциональной диагностики, врачей. Залы лечебной физкультуры, рентгенкабинеты и др.	В	не нормируется
(Грязная зона) помещения для разборки белья, инструментов, моечные, ванные, раздевалки, кладовые, санитарные комнаты и др.	Г	не нормируется

2. Чашку поместить в термостат при t 37ºС на 24 ч;

3. При наличии подозрительных колоний (золотистые с зоной лецитиназной активности), провести их подсчет, микроскопию в мазках, окрашенных по Граму и посев на плазму для определения плазмокоагулазы.

4. Произвести перерасчет количества колоний S. aureus на 1 м³ по формуле СПМ= А Х 1000/250