1.2 Требования к санитарно-показательным микроорганизмам (спм)

1. Должны постоянно содержаться в выделениях человека и поступать в окружающую среду в больших количествах;

2. Не должны иметь другого природного резервуара кроме человека и животных;

3. Должны сохранять свою жизнеспособность во внешней среде в течение сроков, близких к выживанию патогенных м/о, на присутствие которых они указывают;

4. Не должны размножаться во внешней среде;

5. Должны иметь устойчивый генотип и не изменяться быстро под влиянием факторов внешней среды;

6. Должны быть типичными и легко определяемыми современными методами.

Ни один микроорганизм идеально не удовлетворяет всем требованиям. Но, поскольку основная масса микроорганизмов выделяется во внешнюю среду с фекалиями и орально-капельными механизмами, то обнаружение представителей микрофлоры кишечника и полости рта и носа говорит о соответствующем загрязнении объекта. Наиболее оптимальными индикаторами фекального загрязнения объекта (1 группа СПМ) являются бактерии семейства Enterobacteriaceae, родов Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella, Serratia. Эта группа микроорганизмов признается бактериологами всего мира как показатель фекального загрязнения воды, почвы, пищевых продуктов и поверхностей.

В отечественной специальной литературе эта группа обозначается как БГКП – бактерии группы кишечной палочки, международное название этой группы ОКФБ или ОКБ – общие колиформные бактерии.

ОКБ – это грамотрицательные палочки, не образующие спор, размножающиеся в присутствии желчных кислот, не имеющие оксидазы и ферментирующие глюкозу и лактозу до кислоты и газа при температуре 37±1^оС в течение 24-48 часов.

Из группы ОКБ выделяют термотолерантные колиформные бактерии (ТТКФБ или ТКБ), которые обладают всеми признаками ОКБ и, кроме того, способны ферментировать лактозу до кислоты и газа при температуре 44± 0,5^оС в течение 24 ч.

Наиболее полно отражает фекальное загрязнение опасное в отношении распространения кишечных инфекций сама кишечная палочка (E.coli). это «рабочая лошадка» санитарной микробиологии содержится в фекалиях в концентрации 10⁶ - 10⁸ в 1 г.

E.coli - это грамотрицательная, не образующая спор палочка, ферментирующая лактозу при t 44± 0,5^оС, не имеющая оксидазы, образующая индол.

ТКБ и E.coli являются показателем свежего фекального загрязнения объекта.

В практической санитарной микробиологии полная идентификация E.coli отнимает много времени и средств, поэтому часто ограничиваются определением ОКБ и ТКБ.

Дополнительным показателем фекального загрязнения объекта и показателем эффективности дезинфекции воды являются энтерококки.

Энтерококки-грамположительные кокки, образующие короткие цепочки, постоянно находятся в кишечнике человека и выделяются в большом количестве (10⁵ – 10⁷ в 1 г фекалий). Это E. faecalis, E. faecium, E. salivarius, E.durans. Отличаются высокой устойчивостью к хлору, желчи, повышенной концентрации соли (Na Cl), температуре до 60^о, широкому диапозону рН, поэтому являются показателем качества обеззараживания (дезинфекции, пастеризации) объекта.

Сульфитредуцирующие клостридии– спорообразующие грамположительные палочки, редуцирующие сульфит натрия при температуре 44± 1,0^оС в течение 18 часов на железо-сульфитном агаре.

Клостридии (C. perfringens, C. sporogenes) обычно присутствуют в фекалиях в меньших концентрациях, чем E.coli – 10³ в 1 г, но образуют споры, поэтому способны значительно дольше сохраняться во внешней среде и более устойчивы к обеззараживанию. Являются показателем давнего фекального загрязнения объекта и недостаточной эффективности обеззараживания таких объектов как вода, почва, пищевые продукты, лечебные грязи.

Термофилы – разнообразная группа микроорганизмов (грамположительные кокки, бациллы, актиномицеты, спириллы), способных размножаться при температуре 55-60^оС.

Показатель загрязнения почвы, воды водоемов компостами и навозом.

Коли-фаги – бактериальные вирусы, способные лизировать E.coli при температуре 37±1^оС и формировать зоны лизиса бактериального газона (бляшки) через 18±2 часа на питательном агаре. Из-за сходства с кишечными вирусами человека предложены как индикаторы фекального вирусного загрязнения воды, почвы, пищевых продуктов. Они более устойчивы к обеззараживанию (хлору), чем ОКБ и поэтому отсутствие ОКБ еще не говорит об отсутствии в воде кишечных вирусов. В фекалиях содержатся в небольших количествах, но быстро размножаются в сточных водах и являются показателем загрязнения фекально-хозяйственными стоками.

2 группа (В) СПМ – индикаторы орально-капельного загрязнения объектов внешней среды.

Золотистый стафилококк – грамположительные кокки, образующие золотисто-желтые колонии на желточно-солевом агаре, обладающие лецитиназой и плазмокоагулазой. Носителями S. aureus являются около 50% людей. Стафилококк устойчив во внешней среде. Определение S. аureus рекомендуется при оценке воздуха лечебно-профилактических учреждений, аптек, жилых помещений, воды плавательных бассейнов, детских молочных смесей.

β-гемолитические стрептококки – могут служить показателем эпидемического неблагополучия воздушной среды, т.к. выделяются от 50 – 70% людей и малоустойчивы во внешней среде.

Грибы рода Candida и споры плесневых грибов рекомендуется рассматривать как санитарно-показательные микроорганизмы, выделяющиеся из организма человека и животных с фекалиями, из дыхательных путей, с кожи. Устойчивы во внешней среде. Используются как показатели санитарного состояния воздуха аптек и ЛПО.

К 3 группе СПМ относятся индикаторы процессов самоочищения почвы, воды водоёмов. Это микроорганизмы представители автохтонной микрофлоры почвы и воды водоемов:

1. Аммонификаторы

2. Нитрифицирующие бактерии.

3. Актинобактрии

4. Целлюлозоразрушающие бактерии.

Аммонификаторы – группа микроорганизмов, разлагающих белки и мочевину до аммиака и его солей. К ним относятся гнилостные аэробные и анаэробные микроорганизмы: Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Serratia marcescens, м/о рода Proteus, грибы родов Mucor, Aspergillus, Clostridium sporogenes, Clostridium putrificum, уробактерии. Являются показателями массивного органического загрязнения и процессов гниения.

Нитрифицирующие бактерии родов Nitrosomonas и Nitrobacter, обладающие способностью окислять аммиак до нитритов и нитратов. Грамотрицательные бактерии, открытые С.Н. Виноградским в 1899г. Являются показателями органических загрязнений и активных процессов самоочищения объектов.

Актинобактерии – группа грамположительных, ветвящихся микроорганизмов, активных участников превращений органических соединений, содержащих углерод.

Целлюлозоразрушающие микроорганизмы – почвенные бактерии и грибы, утилизирующие целлюлозу как источник углерода.

По эпидемическим показаниям в объекте также могут определяться патогенные бактерии.

Сальмонеллы – грамотрицательные палочки семейства энтеробактерий, возбудители острых кишечных инфекций. Широко распространены среди животных, птиц, грызунов, встречаются носители среди людей. Могут размножаться в воде водоемов, почве, пищевых продуктах. Прямые показатели эпидемической опасности объекта.

Bacillus anthracis - возбудитель сибирской язвы, споры B. anthracis десятилетиями сохраняются в почве.

Вирусы : энтеровирусы, ротавирусы человека, выделяющиеся с фекалиями, могут длительное время сохранятся в воде водоемов и почве, также свидетельствуют о прямой эпидемической опасности объекта.

Содержание СПМ выражают в титрах, индексах и НВЧ.

Титр – минимальное количество субстрата (в мл, см³, граммах), в котором ещё обнаруживаются СПМ.

Например: коли-титр воды – 300 мл;

перфрингенс титр почвы – 0,1 грамма.

Индекс – количество СПМ, содержащееся в единице объема какого-либо субстрата.

Например: коли-индекс воды – 3 ОКБ в 1 литре;

индекс энтерококков – 50 в 100 мл.

НВЧ – наиболее вероятное число – количество СПМ в единице объема субстрата (1л, 1 см³, 1г) – показатель, который может колебаться в пределах доверительных границ с вероятностью 95%.