Раздел 6. Питательные среды, применяемые в санитарной микробиологии

Для исследования объектов окружающей среды-воды, почвы, воздуха

больничных помещений, используют как основные среды, так и специальные, элективные дифференциально-диагностические и консервирующие.

Часто применяют среды для выделения кишечной группы бактерий, кокков, грибов и анаэробов.

Состав и назначение питательных сред, упомянутых в пособии:

1. Среды для определения омч и кмафам:

МПБ-мясо-пептонный бульон (мясная вода 1 л, сухой пептон 1 %, NaCl 0,5%).

ПВ-пептонная вода (дистилированная вода 1 л, пептон 1 %, NaCl 0,5%).

МПА-мясо-пептонный агар (мясная вода 1 л, сухой пептон 1 %, NaCl 0,5% и агар-агар 0,5-2 %).

2. Среды для выделения кишечной группы бактерий:

Среда Эндо-МПА 100 г, 1 % лактозы, 2-3 % спиртового раствора основного фуксина, 10 мл 10 % водного раствора Na2SO3 , PH=7,4. Среду готовят ex tempore, в день использования. Среда имеет бледно-розовый цвет.

Среда Кесслера-1л водопроводной воды, 10 г пептона, 50 мл бычьей желчи, 2,5 г глюкозы (лактозы) и 2 мл 1 % раствора генцианового фиолетового, PH=7,4-7,6. Среда жидкая, фиолетового цвета, с поплавками.

Лактозо-пептонная среда-1 л дистиллированной воды, 10 г пептона, 5 г лактозы, 5 г NaCl, 2 мл бромтимолового синего (1,6 % раствор), PH=7,4-7,6. Среда жидкая, с поплавками. В концентрированной среде количество ингредиентов увеличивают в 10 раз. Для получения полужидкой ЛПС-добавляют 0,5-0,7% агар-агара (5-7 г).

Среда Ресселя-100 мл 1-1,5 % мясо-пептонного агара, лактозы 1 г, глюкозы 0,05 г, индикатор ВР (водный голубой), PH=7,2-7,4. Свежеприготовленная среда розовато-серого цвета, при кислотообразовании синеет.

Используются также комбинированные полиуглеводные диференциально-диагностические среды Клиглера, Олькеницкого, содержащие лактозу, глюкозу, сахарозу, мочевину, соли Мора, тиосульфат натрия и различные индикаторы (феноловый красный или бромтимоловый синий). Среды позволяют определить расщепление углеводов, мочевины; образование сероводорода, по изменению цвета индикатора и дифференцировать энтеробактерии до рода.

Для выделения сальмонелл применяют:

Желчный бульон-900 мл МПБ, 100 мл желчи.

Магниевая среда-вода дистиллированная 890 мл, пептон 4,2 г, дрожжевой экстракт-20 мл, NaCl-7 г, KH3PO4 -1,5 г , MgCl-36г, бриллиантовый зеленый 0,1%-5,0 мл.

Среда Мюллера- 4,5 г мела, МПБ -90 мл, раствор Люголя-2 мл, 10 мл 50 % водного раствора гипосульфита натрия. Образующийся в среде тетратионат натрия подавляет рост кишечной палочки и не препятствует размножению сальмонелл.

Селенитовый бульон-готовится на основе мясо-пептонного бульона (100 мл) с добавлением солей: NaHSeO3-0,4 %, Na2HPO4-0,7 %, NaH2PO4-

0,3 %, лактозы- 0,4 г, PH=7,0 (лучшая среда обогащения для сальмонелл).

ВСА (висмут-сульфитный агар)-питательный агар 3 %-100 мл, глюкоза-1 г, цитрат висмута-0,45 г, сульфит натрия-1,5 г, фосфат натрия-1,0 г, соль Мора 8 %-1,0 мл, 1 % раствор бриллиантового зеленого -0,4 мл.

3. Среды для выделения Pseudomonas aeruginosa

Среда Бонде-вода дистиллированная-1000 мл, цитрат натрия-28 г, Na3PO4-15 г, К3PO4-10 г, MgSO3-3 г , кристаллический фиолетовый 0,01 % раствор-50 мл.

Среда «Блеск»-100 мл питательного агара, L-аргинин-0,3 г, 10 мл обезжиренного молока, ТТХ (трифенилтетразолий хлорид) 10 % раствор-8 мл.