- •Руководство для самостоятельной работы студентов по санитарной микробиологии воды, почвы, лечебно-профилактических организаций
- •Раздел 1. Введение в санитарную микробиологию.............................................7
- •Раздел 2. Санитарная микробиология воды......................................................13
- •Раздел 3. Санитарная микробиология почвы....................................................35
- •Раздел 4. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха.................45
- •Раздел 5. Санитарно-микробиологическое исследование лпо.....................49
- •Раздел 6.Питательные среды, применяемые в санитарной микробиологии ….................................................................................................................................61
- •Раздел 1. Введение в санитарную микробиологию
- •1.1 Критерии санитарной микробиологии
- •1.2 Требования к санитарно-показательным микроорганизмам (спм)
- •1.3 Методы санитарной микробиологии
- •Раздел 2. Санитарная микробиология воды
- •2.1 Санитарно-микробиологическое исследование питьевой воды централизованного водоснабжения
- •Нормативы по микробиологическим и паразитологическим показателям для воды питьевой водопроводной (СанПиН 2.1.4.1074-01).
- •2.1.1 Отбор проб воды
- •2.1.2 Определение общего числа микроорганизмов
- •(Омч или кмАиФам)
- •Исследование общего микробного числа в питьевой воде
- •2.1.3 Определение окб и ткб методом мембранной фильтрации
- •(Основной метод)
- •Определение окб и ткб методом мембранной фильтрации
- •2.1.4 Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий титрационным методом
- •Определение окб и ткб титрационным методом
- •2.1.5 Определение спор сульфитредуцирующих клостридий
- •2.1.6 Определение колифагов
- •Определение колифагов в питьевой воде прямым методом
- •2.1.7 Проведение количественного анализа
- •2.1.8 Анализ результатов санитарно-микробиологического исследования питьевой водопроводной воды
- •2.2 Вода питьевая расфасованная в ёмкости
- •2.2.1 Метод определения Pseudomonas aeruginosa
- •2.3 Вода нецентрализованного водоснабжения
- •Требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения (микробиологические показатели)
- •2.4 Санитарная микробиология поверхностных водных объектов
- •2.4.1 Правила забора проб воды из поверхностных водоемов (гост р 51592-2000)
- •Требования к составу и свойствам воды водных объектов
- •2.4.2 Подготовка проб воды к анализу
- •2.4.3 Определение омч
- •2.4.4. Определение окб и ткб
- •2.4.5. Определение колифагов
- •2.4.6 Определение бактерий рода Salmonella
- •Определение бактерий рода Salmonella
- •Раздел 3. Санитарная микробиология почвы
- •Критерии оценки степени эпидемической опасности почвы
- •Отбор и подготовка проб почвы
- •Определение общего количества бактерий в почве
- •Определение числа (индекса) термофилов в почве
- •Определение титра нитрифицирующих бактерий
- •3.5 Определение титра аммонификаторов
- •3.6 Определение коли-титра почвы (индекса бгкп)
- •3.6.1 Титрационный (бродильный) метод.
- •Титрационный метод определения бгкп в почве
- •3.6.2 Метод мембранной фильтрации
- •3.6.3 Прямой посев на плотные дифференциально-диагностические среды
- •3.7 Определение количества энтерококков в почве
- •3.8 Определение титра c. Perfringens
- •3.9 Определение сальмонелл в почве
- •Анализ результатов исследования почвы
- •Раздел 4. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха
- •4.1 Особенности и методы отбора проб воздуха
- •4.2 Определение омч воздуха послеродовой палаты аспирационным методом
- •4.3 Определение омч воздуха бактериологического бокса седиментационным методом
- •4.4 Определение количества s. Aureus в воздухе помещений класса чистоты а (операционные, родильные залы) аспирационным методом
- •4.5 Анализ результатов санитарно-микробиологического исследования воздуха помещений
- •Раздел 5. Санитарно-микробиологические исследования в лечебно-профилактических организациях
- •5.1 Контроль стерилизации
- •5.1.1 Объекты контроля стерильности и объем исследований
- •5.1.2 Подготовка бокса, инструментов, питательных сред и персонала к работе
- •5.1.3 Исследование на стерильность хирургических инструментов
- •5.1.4 Особенности исследования на стерильность лигатурного шовного и перевязочного материала
- •5.1.5 Бактериологический контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов
- •Бактериологический контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов
- •5.2 Контроль качества дезинфекции изделий медицинского назначения
- •5.3 Контроль обработки рук медицинского персонала
- •Контроль эффективности хирургической обработки рук
- •Раздел 6. Питательные среды, применяемые в санитарной микробиологии
- •1. Среды для определения омч и кмафам:
- •2. Среды для выделения кишечной группы бактерий:
- •3. Среды для выделения Pseudomonas aeruginosa
- •4. Среды для выделения анаэробов
- •5. Среды для выделения грибов
- •6. Среды для выделения кокков
- •Нормативные документы общего характера
- •Нормативные документы по качеству воды
- •Нормативные документы по воздуху
- •Нормативные документы по почве
- •Нормативные документы по санитарному режиму в лечебно-профилактических организациях
- •Тестовые задания
- •Эталоны ответов на тестовые задания:
- •Ситуационные задачи Задача № 1
- •Задача № 2
- •Задача № 3
- •Задача № 9
- •Задача № 10
- •Задача № 11
- •Задача № 12
- •Задача № 13
- •Задача № 23
- •Задача № 24
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи Ответ на задачу № 1
- •Ответ на задачу № 2
- •Ответ на задачу № 3
- •Ответ на задачу № 4
- •Ответ на задачу № 5
- •Ответ на задачу № 6
- •Ответ на задачу № 7
- •Ответ на задачу № 8
- •Ответ на задачу № 9
- •Ответ на задачу № 10
- •Ответ на задачу № 11
- •Ответ на задачу № 12
- •Ответ на задачу № 13
- •Ответ на задачу № 14
- •Ответ на задачу № 15
- •Ответ на задачу № 16
- •Ответ на задачу № 17
- •Ответ на задачу № 18
- •Ответ на задачу № 19
- •Ответ на задачу № 20
- •Ответ на задачу № 21
- •Ответ на задачу № 22
- •Ответ на задачу № 23
- •Ответ на задачу № 24
- •Список рекомендуемой литературы
Ответ на задачу № 2
Для доказательства принадлежности выделенных бактерий к ОКБ или ТКБ необходимо дополнительно сделать мазок из колонии и окрасить его по Граму. В мазке должны быть средних размеров грамотрицательные палочки, расположенные хаотично. Оставшуюся часть колоний пересеять в 2 пробирки с ЛПС и культивировать одну при +44,50С, другую при +370 С 24 часа. При обнаружении ферментации лактозы с образованием кислоты и газа при +44,50С учесть как ТКБ. При отсутствии признаков расщепления лактозы до кислоты и газа при +44,50С, но наличие кислоты и газа после культивирования на ЛПС при 370 С учесть бактерии как ОКБ.
Вода питьевая не соответствует требованиям СанПиН 2.1.4.1074-01 по содержанию санитарно-показательных микроорганизмов, так как ОКБ и ТКБ должны отсутствовать в 100 см3.
Ответ на задачу № 3
К общим колиформным бактериям можно отнести темно-красные колонии (расщепляют лактозу в среде Эндо), грамотрицательные, не имеющие оксидазу. Оксидазоположительные палочки не учитываются. Следовательно, в 300 мл воды обнаружено 2 ОКБ, что свидетельствует о фекальном загрязнении воды и не соответствует нормам СанПиН 2.1.4.1074-01.
Ответ на задачу № 4
При определении колиформных бактерий в питьевой водопроводной воде титрационым методом делают посевы трех объемов по 100 мл, трех объемов по 10 мл и трех объемов по 1 мл в лактозо-пептонную среду. Если признаков роста и брожения не выявлено через 24 часа культивирования при температуре 37ºС, посевы оставляют еще на 24 часа при той же температуре и если признаков роста по-прежнему нет, то выдается заключение: ОКБ/ТКБ не обнаружены в 300 мл воды.
Ответ на задачу № 5
Для подтверждения отношения полученных колоний к колиформным бактериям необходимо провести микроскопию мазков по Граму и поставить оксидазный тест. При определении грамотрицательных палочек розовые колонии пересеять на ЛПС и культивировать при температуре 37ºС для определения отношения их к ОКБ. Темно-красные отсеять на ЛПС и культивировать при 44,5ºС для определения отношения их к ТКБ, если они образуют кислоту и газ.
Ответ на задачу № 6
Оценка качества воды из колодцев проводится в соответствии с СанПиН 2.1.4 1175-02 «Гигиенические требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Санитарная охрана источников». При этом из микробиологических показателей нормируются:
общее микробное число – не более 100 КОЕ/мл
общие колиформные бактерии – отсутствие в 100 мл
термотолерантные бактерии – отсутствие в 100 мл
коли-фаги – отсутствие в 10 мл
Полученные результаты исследования свидетельствуют о том, что вода из колодца села П. не соответствует требованиям нормативного документа по общему микробному числу, общим колиформным бактериям и коли-фагам.
Ответ на задачу № 7
Оценку качества дезинфекции воды проводят по содержанию спор сульфитредуцирующих клостридий (отсутствие в 20 см3), так как споры длительно сохраняются во внешней среде и устойчивы к обычным концентрациям активного хлора.
Проведение анализа: пробу воды объемом 20 см3 прогревают на водяной бане при температуре 750 С в течение 15 мин для уничтожения вегетативных форм бактерий. В 4 стерильные пробирки вносят по 5 см3 подготовленной пробы и заливают горячим железо-сульфитным агаром по 10 см3. Посевы инкубируют при 440 С в течение 16-18 часов. Учету подлежат изолированные колонии в виде черных шаров.
