Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методичка_часть1_2010.doc
Скачиваний:
8
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
10 Мб
Скачать
☆

Задания к лабораторной работе 2 Вариант 1

Исследована кинетика действия глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы азотфиксирующих бактерий Azotobacter beijerinckii.

глюкозо-6-фосфат + НАДФ+  глюконат-6-фосфат + НАДФН + Н+

Получены приведенные ниже данные о зависимости начальной скорости реакции от концентрации глюкозо-6-фосфата

Концентрация

Глюкозо-6-фосфат, мМ

Начальная скорость восстановления НАДФ+, нмоль/мин

0,375

6,65

0,5

9,25

0,625

10,95

0,75

13,09

0,875

15,45

1

17,84

1,25

20,69

1,5

23,80

2

29,24

2,5

35,08

Найдите константу Михаэлиса и максимальную скорость реакции методами Лайнуивера-Бэрка, Эди-Хофсти и Хейнса. Сравните полученные результаты.

Вариант 2

Исследовали люциферазную систему ракообразного Cypridina при температуре 15оС . Начальные скорости реакции определяли, регистрируя количество света, испускаемого в единицу времени (мин) с помощью фотоэлемента. Результаты приведены в таблице:

Количество добавляемого раствора люциферина на 20 мл реакционной смеси, мл

Нач скорость мВ/мин

0,04

15

0,06

19

0,08

23

0,1

26

0,2

44

0,4

56

0,9

76

Концентрация люциферина в добавляемом растворе 8·10-5 М. Найти константу Михаэлиса и максимальную скорость реакции методами Лайнуивера-Бэрка, Эди-Хофсти и Хейнса. Сравнить полученные результаты.

Вариант 3

Известно, что D-сериндегидратаза из Neuruspora crassaиспользует в качестве кофермента пиридоксальфосфат. Фермент катализирует реакцию: СН2(ОН)СН(NH2)COOH CH3COCOOH+NH3

При исследовании насыщения фермента пиридоксальфосфатом были получены следующие данные:

Скорость образования пировиноградной к-ты, мкмоль/20 мин

0,15

0,2

0,275

0,315

0,34

0,35

0,36

Концентрация пиридоксальфосфата, 10-5 М

0,2

0,4

0,85

1,25

1,7

2,0

8,0

Найти константу Михаэлиса и максимальную скорость реакции методами Лайнуивера-Бэрка, Эди-Хофсти и Хейнса. Сравнить полученные результаты.

Вариант 4

Начальная скорость выделения O2 при действии фермента на субстрат была измерена для ряда концентраций субстрата:

[S], моль/л

0,050

0,017

0,010

0,005

0,002

V, мм3/мин

16,6

12,4

10,1

6,6

3,3

Найти константу Михаэлиса и максимальную скорость реакции методами Лайнуивера-Бэрка, Эди-Хофсти и Хейнса. Сравните полученные результаты.

Вариант 5

Процесс декарбоксилирования глиоксилата митохондриями исследовали по скорости выделения СО2 для различных концентраций глиоксилата. Найти константу Михаэлиса и максимальную скорость исследуемого процесса методами Лайнуивера-Бэрка, Эди-Хофсти и Хейнса. Сравните полученные результаты.

Концентрация глиоксилата, мМ

Скорость выделения СО2 (усл.ед.)

1

2,5

0,75

2,44

0,6

2,08

0,5

1,89

0,4

1,67

0,33

1,39

0,25

1,02