Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методичка_часть1_2010.doc
Скачиваний:
8
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
10 Мб
Скачать
☆

Вариант 1

-кетоглутарат является конкурентным ингибитором реакции окисления N-метил-L-глутамата, катализируемого N-метилглутамат-дегидрогеназой. Определить константу диссоциации комплекса фермент-ингибитор, исходя из данных таблицы.

Влияние -кетоглутарата на кинетику окисления N-метил-L-глутамата, катализируемого N-метил-глутамат-дегидрогеназой. Условия опыта: рН 7,4, 30С, фосфатный буфер; 310-5М 2,6-дихлориндофенола, [Е]0=610-2 мг/мл

[-кетоглутарат]103, М

[S]0104, М

V0106, Ммин-1

0

1,00

0,625

0,500

0,417

0,264

1,669

1,43

1,33

1,205

1,053

0,6

1,00

0,625

0,500

0,417

0,264

1,505

1,262

1,111

1,08

0,85

3,0

1,00

0,625

0,500

0,417

0,264

1,053

0,82

0,678

0,59

0,45

Вариант 2

Бензоат 1,2,5-триметилпиперидол-4(-изомер) является ингибитором гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Определить тип ингибирования и найти константудиссоциации комплекса фермент-ингибитор, исходя из данных таблицы.

Влияние -изомера бензоата 1,2,5-триметилперидола-4 на кинетику гидролиза бутирилхолина, катализируемого холинэстеразой. Условия опыта: рН 7,4; 25С; фосфатный буфер (0,001М)

[I]105, M

[S]0104, M

V, усл. ед.

0

10,00

2,50

0,91

0,50

5,55

4,45

2,94

2,09

1,0

10,00

2,50

0,91

0,50

4,00

3,18

2,16

1,49

2,0

10,00

2,50

0,91

0,50

2,86

2,28

1,52

1,06

3,0

10,00

2,50

0,91

0,50

2,38

1,85

1,24

0,87

Вариант 3

Исследовали влияние н-бутанола на кинетику гидролиза гиппурового эфира L-аргинина, катализируемого карбоксипептидазой В. Условия опыта: рН 8,0; 23С; трис-ацетатный буфер (0,025 М); [Е]0=6,2510-5 мг/мл. На основании зависимости скорости ферментативной реакции от начальной концентрации субстрата предложить кинетическую схему реакции (приняв двухстадийный механизм действия фермента) и определить константу ингибирования н-бутанолом.

[н-бутанол], М

[S]0104, М

V106, Mмин-1

0

10,0

5,00

3,33

2,50

2,00

1,67

13,33

11,76

10,1

9,09

8,13

7,41

0,05

10,0

5,00

3,33

2,50

2,00

1,67

8,7

7,35

6,45

5,71

5,21

4,72

0,15

10,0

5,00

3,33

2,50

2,00

1,67

5,35

4,60

4,08

3,60

3,21

2,98

Вариант 4

Кофермент А (СоА) является ингибитором реакции, катализируемой фосфат-ацетилтрансферазой:

Ацетил-СоА + фосфат  Ацетилфосфат + СоА

В таблице приведены данные по влиянию СоА на начальную скорость реакции при вариации концентрации субстрата. Определить тип ингибирования коферментом по отношению к нуклеотидному (ацетил-СоА) субстрату и вычислить кинетические параметры исследуемого процесса.

Условия опыта: рН 8,32; 25С; ионная сила 0,3 М; [Е]0=510-8 М

[СоА]105, М

[Ас-СоА]105, М

V105, Ммин-1

0

10,00

2,50

0,91

0,50

5,55

4,45

2,94

2,09

0,5

10,00

2,50

0,91

0,50

4,77

3,78

2,56

1,79

1,0

10,00

2,50

0,91

0,50

4,00

3,18

2,16

1,49