Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Mikra_bilety.docx
Скачиваний:
1
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
495 Кб
Скачать
☆

Билет 23

1) Принципы систематики прокариот. Определитель по Берджи. Таксономия: семейство, род, вид, биовар, серовар, фаговар.

Для характеристики организмов используют разнообразные признаки: морфологические, цитологические, культуральные, физиологические, биохимические, иммунологические и др.

Основной таксономической категорией является вид. По современным представлениям, вид — это группа близких между собой организмов, имеющих общий корень происхождения и на данном этапе эволюции характеризующихся определенными морфологическими, биохимическими и физиологическими признаками, обособленных отбором от других видов и приспособленных к определенной среде обитания.

Виды объединяют в таксоны более высокого порядка — роды, роды — в семейства, далее следуют порядки, классы, отделы, царства. Для высших таксономических категорий пока нет удовлетворительного определения.

В микробиологии употребляются такие термины, как "штамм" и "клон". Под штаммом понимают бактериальные культуры одного вида, выделенные, например, из разных мест обитания. Различия между штаммами не выходят за пределы вида. Клон — еще более узкое понятие, это культура, выделенная из одной клетки.

Существуют 2 типа систематики биологических объектов:

  • филогенетическая, или естественная, в основе которой лежит установление родственных (генетических, эволюционных) связей между организмами;

  • практическая, или искусственная, цель которой — выявление степени сходства между организмами для быстрой их идентификации и установления принадлежности к определенным таксонам.

Если существующая систематика высших организмов отражает в определенной мере эволюционные связи между ними, т. е. признаки, используемые для выявления степени сходства, отражают и степень родства между этими организмами, то попытка создания на этой же основе систематики прокариот не была успешной.

Определитель Берджи систематизирует все известные бактерии по нашедшим в практической бактериологии наибольшее распространение принципам идентификации бактерий, основанным на различиях в строении клеточной стенки и отношении к окраске по Граму. Определитель выделяет четыре основных категории бактерий:

  • Gracillicutes виды с тонкой клеточной стенкой, окрашивающиеся грамотрицательно;

  • Firmicutes— бактерии с толстой клеточной стенкой, окрашивающиеся грамположительно;

  • Tenericutes — бактерии, лишённые клеточной стенки (микоплазмы, уреаплазмы и прочие представители класса Mollicutes);

  • Mendosicutes — архебактерии (метан- и сульфатредуцирующие, галофильные, термофильные и архебактерии, лишённые клеточной стенки).

Многие виды бактерий подразделяют по одному признаку на биологические варианты — биовары. Биовары, различающие­ся по биохимическим свойствам, называют хемоварами, по анти­генным свойствам — сероварами, по чувствительности к фагу — фаговарами.

2) Диагностика иммунных сывороток. Типы агглютинирующих сывороток. Моноклональные антитела, принципы получения.

Иммунные сыворотки – препараты, содержащие специфичные антитела (поликлональные (неоднородные)).

Диагностические иммунные сыворотки содержат известные антитела. Применяются в серологических реакциях для идентификации выделенного возбудителя или его токсина, выявления неизвестных Аг непосредственно в исследуемом материале.

Получают путем гипериммунизации животных различными Аг (взвесь микробов/выделенные из них антигены/анатоксины).

Подразделяют (в зависимости от серологических реакций, в которых они принимают участие):

  • агглютинирующие:

    • Неадсорбированные (видовые, нативные) обладают высоким титром (1:25000), но недостаточно специфичны. Содержат несколько типов Ат (специфических), соответствующих набору Аг того вида м/о, против которого проводилась гипериммунизация. Могут содержать групповые (неспецифические) Ат, которые вступают в реакцию агглютинации с родственными бактериями. Бывает положительна с меньшим титром сыворотки, чем специфичная реакция. Применяют в реакции агглютинации на стекле и при развернутой в пробирке. Результат ориентировочный.

(Примеры: брюшнотифозная, дизентерийная).

    • Адсорбированные монорецепторные сыворотки. Строго специфичны, титры низкие (1:20-1:320), применяются в реакции агглютинации на стекле. Результат окончательный. Получают из нативных видовых сывороток для избежания групповой агглютинации. Получают методом адсорбции антител по Кастеллани (добавляют к нативной сыворотке густую взвесь родственных бактерий, содержащих групповые антигены. Инкубируют в термостате. Антитела против них извлекают из сыворотки центрифугой – образуется комплектс Аг-Ат, который осаждается). Иногда инкубируют последовательно с разными видами родственных микроорганизмов. Тогда в жидкости остаются только моноспецифичные антитела. Такая сыворотка называется монорецепторной (моновалентной) адсорбированной агглютинирующей сывороткой. Бывают и поливалентные адсорбированные агглютинирующие сыворотки. (Примеры: сальмонеллезные, холерные, менингококовые).

      • Из иммунных сывороток готовят диагностические Ig – концентрированные биопрепараты, содержащие специфические антитела. Это технологически более совершенные биопрепараты по сравнению с сыворотками, имеют высокий титр антител и дают более точные результаты. Диагностические Ig, меченные флюорохромами, ферментами, радиоактивными изотопами, используются при экспресс-диагностике в реакциях МИФ, ИФА, РИА для выявления возбудителей и их Аг, а также Ат (антиглобулиновые сыворотки). (Примеры адсорбированных: эшерихиозные, чумные)

  • преципитирующие (сибиреязвенные, противочумная);

  • гемолитические (против эритроцитов барана);

  • антитоксические (противодифтерийная, противостолбнячная, противоботулиническая);

Диагностические сыворотки и иммуноглобулины выпускаются в ампулах лиофильно высушенные (стабильнее жидких, хранятся дольше), редко – в жидком виде.

Лиофилизация – высушивание биопрепаратов из замороженного состояния с помощью специального вакуумного оборудования.

Моноклональные антитела – выскороспецифичные антитела, продуцируемые одним клоном антителообразующих клеток. Однородны по своему составу, способны связываться только с одним эпитопом антигенов.

Получают с помощью гибридомной технологии – скрещивают В-лимфоциты селезенки мышей (короткоживущие, антитело-образующие) с миеломной клеткой мыши (непрерывно делятся). Получают гибридомы (гибридные клетки), обладающие свойствами обеих родительских клеток. Гибридомы культивируют в специальной среде, в которой не могут размножаться исходные негибридомные клетки. Получают клоны, содержащие однородные гибридомные клетки, продуцирующие идентичные моноспецифичные антитела = моноклональные антитела. К вирусу/микробу/другим антигенам получают спектр (=панель) моноклональных антител – группу антител, специфичных к разным эпитопам одного Аг.

Вместо адсорбированных сывороток чаще используют моноклональные антитела к групповым, видовым, типовым антигенам. Меченые моноклональные антитела (Ig) применяют в тест-системах (ИФА, МИФ, РИА) для диагностики инфекций (вирусных и бактериальных) и в других исследованиях (вместо меченых Ig из иммунных сывороток животных).

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]