- •Билет 1
- •1) Антибиотики. Определение. Классификация по спектру и типу антимикробного действия. Примеры антибиотиков.
- •Билет 2
- •1) Антитела. Основные классы иммуноглобулинов и их свойства. Строение молекул IgG, IgM, IgA.
- •1) Fab; 2) Fc; 3) тяжелая цепь; 4) легкая цепь; 5) антиген-связывающийся участок; 6) шарнирный участок
- •2) Микрофлора тела человека и ее роль в нормальных физиологических процессах и патологиях. Гнотобиология.
- •Билет 3
- •1) Микробиология как наука.
- •2) Реакция связывания комплемента (рск).
- •Билет 4
- •1) Основные методы исследования морфологии микроорганизмов. Простые и сложные методы окраски. Протравы и дифференцирующие вещества. Окраска по Граму.
- •2) Патогенные и вирулентные микроорганизмы. Факторы патогенности.
- •Билет 5
- •2) Токсические вещества, синтезируемые бактериями. Секретируемые и несекретируемые токсины. Классификация, основные свойства и т.Д.
- •Билет 6
- •1) Плазмиды.
- •2) Инфекционный процесс. Стадии и периоды инфекционной болезни, условия возникновения.
- •Билет 7
- •1) Простые и сложные методы окраски, протравы и дифференцирующие вещества. Метод Грама.
- •2) Инфекционные аллергены. Типы. IV тип. Кожно-аллергическая проба.
- •Билет 8
- •1) Энергетический метаболизм микроорганизмов. Дыхание, брожение. Типы брожения. Дыхательная цепь.
- •2) Серологические реакции. Реакция непрямой гемагглютинации (рнга).
- •Билет 9
- •1) Микробиология как наука. Связь с другими науками.
- •2) Вакцина. Классификация, характеристика, требования к вакцинам. Инактивированные и рекомбинантные вакцины.
- •Билет 10
- •1) Микоплазмы. Таксономия, биологические свойства, методы изучения. Роль микоплазм.
- •2) Роль иммунного лизиса (гемолиза, бактериолиза).
- •Билет 11
- •1) Структура бактериальной клетки. Нуклеоид. Биологические функции, методы выявления.
- •2) Дисбактериоз. Профилактика и коррекция. Биопрепараты.
- •Билет 12
- •1) Свойства вирусов. Вирион. Морфологические формы вирусов. Размеры, ультраструктуры, типы симметрии.
- •2) Естественная резистентность организма. Гуморальные факторы врожденного иммунитета, механизм их действия.
- •Билет 13
- •1) Питание микроорганизмов. Способы поступления питательных веществ в бактериальную клетку. Классификация по типам питания. Зависимость от источника углерода и энергии. Факторы роста.
- •2) Методы лабораторной диагностики вирусной инфекции: микроскопический, вирусологический, серологический, молекулярно-генетический. Их характеристика.
- •Билет 14
- •1) Свойства вирусов. Вирион. Химический состав вируса. Универсальная классификация.
- •2) Методы микробиологической диагностики заболеваний (микроскопический, серологический, бактериальный, аллергический, биологический и молекулярно-генетический), их характеристика.
- •Билет 15
- •1) Плазмиды. Классификация, свойства, использование в генной инженерии.
- •2) Методы выделения и культивирования вирусов. Типы клеточных культур, применяемых в вирусологии.
- •Билет 16
- •1) Патогенные риккетсии. Таксономия. Свойства, состав и метаболизм. Культивирование. Роль патогенных риккетсий.
- •2) Комплемент. Свойства, компоненты, пути активации. Участие в серологических реакциях.
- •Билет 17
- •1) Простые и сложные методы окраски. Протравы, дифференцирующие вещества. Окраска по Цилю-Нильсену.
- •Билет 18
- •1) Этапы развития микробиологиии. Роль Луи Пастера.
- •2) Иммуноферментный анализ (ифа).
- •Билет 19
- •1) Этапы развития микробиологии. Роль Коха.
- •2) Реакция преципитации. Метод двойной дифференцировки по Оухтерлони. Иммуноэлектрофорез.
- •Билет 20
- •1) Спирохеты. Таксономия. Свойства, морфология. Методы изучения.
- •2) Учение Мечникова об иммунитете. Фагоцитоз, его роль. Виды фагоцитоза, клеточные стадии. Завершенный и незавершенный фагоцитоз.
- •Билет 21
- •1) Дыхание микроорганизмов. Дыхательная цепь. Методы культивирования анаэробов.
- •2) Реакция агглютинации.
- •Билет 22
- •1) Инфекционный иммунитет. Формы проявления иммунитета. Антитоксический и антимикробный иммунитет. Стерильный и нестерильный иммунитет. Местный иммунитет.
- •Билет 23
- •1) Принципы систематики прокариот. Определитель по Берджи. Таксономия: семейство, род, вид, биовар, серовар, фаговар.
- •2) Диагностика иммунных сывороток. Типы агглютинирующих сывороток. Моноклональные антитела, принципы получения.
- •Билет 24
- •1) Инфекционный иммунитет. Работы Мечникова, Эрлиха. Виды иммунитета по происхождению, формам, проявлениям, характеристика.
- •2) Методы выявления чистых культур аэробов и анаэробов. Метод Дригальского.
- •2 Этап.
- •Билет 25
- •1) Свойства вирусов. Вирион. Химический состав. Функция и локализация нуклеиновых кислот, белков, гликопротеидов и липидов.
- •2) Комплемент, его свойства, пути активации, биологическая функция. Пропердин.
- •Билет 26
- •2) Серологические реакции. Реакция нейтрализации токсина антитоксином.
- •Билет 27
- •1) Бактериофаги. Природа и свойства фагов. Умеренные фаги (профаги). Лизогения. Фаговая конверсия.
- •2) Реакция преципитации, кольцепреципитации. Преципитация в геле по Оухтерлони. Иммуноэлектрофорез.
- •Билет 28
- •1) Антибиотики. Типы устойчивости бактерий, механизмы формирования устойчивости. Множественная лекарственная устойчивость и пути ее преодоления.
- •2) Врожденная резистентность, ее механизмы. Клеточные и гуморальные факторы. Защитные свойства кожи, слизистых. Лизоцим. Комплемент. Пропердин.
- •Билет 29
- •1) Анатомическая структура бактериальной клетки. Цитоплазма, цитоплазматическая мембрана, рибосомы, мезосомы, строение.
- •2) Генетические рекомбинанты. Конъюгация, ее этапы и значение.
- •Билет 30
- •2) Репродукция вирусов, ее этапы и особенности. Рнк-содержащие вирусы.
- •Билет 31
- •1) Генотип и фенотип. Транспозоны. Бактериальные хромосомы и плазмиды.
- •2) Реакция агглютинации и преципитации, их сходства и различия.
- •Билет 32
- •1) Врожденный и приобретенный противовирусный иммунитет. Факторы иммунитета. Биологические свойства интерферонов.
- •2) Микроскопическое изучение микроорганизмов. Метод фазово-контрастной и темнопольной микроскопии.
- •Билет 33
- •1) Рекомбинация у бактерий. Трансформация. Стадии трансформации.
- •2) Реакция нейтрализации вирусов.
- •In vitro.
- •2) Реакция непрямой гемагглютинации (рнга). Реакция обратной непрямой гемагглютинации (ронга). Реакция нейтрализации антител (рнат).
- •In vivo.
- •Билет 34
- •1) Ферменты бактерий, их характеристика.
- •Билет 35
- •1) Структура бактериальной клетки. Цитоплазма. Рибосомы, строение и функции. Цитоплазматические включения, способы их выявления.
- •2) Врожденный и приобретенный противовирусный иммунитет. Интерфероны. Механизмы противовирусного действия.
- •Билет 36
- •1) Плазмиды, их характеристика.
- •2) Дисбактериоз.
- •Билет 37
- •1) Микрофлора организма человека, индигенная и транзиторная.
- •2) Генетическая рекомбинация у бактерий. Трансдукция, типы и значение.
- •Билет 38
- •1) Структура бактериальной клетки. Строение цитоплазматической мембраны и мезосом, их роль.
- •2) Применение культур клеток в диагностике вирусной инфекции. Цитопатическое действие вирусов (цпд), формы проявления.
- •Билет 39
- •1) Этапы развития микробиологии. Роль Луи Пастера.
- •2) Типы культур клеток, методы их культивирования. Питательные среды и солевые растворы.
- •Билет 40
- •1) Хламидии. Таксономия, биологические свойства.
- •2) Лечебно-профилактические и антитоксические сыворотки.
- •Билет 41
- •1) Капсула бактерий, ее условия образования и химическая природа. Значение и методы выявления капсулы.
- •2) Характеристика реакции антиген-антитело.
- •Билет 42
- •1) Бактериофаги, их природа и свойства. Взаимодействие с клеткой.
- •2) Формы инфекций. Классификация инфекций в зависимости от путей передачи.
- •Билет 43
- •1) Патогенность, вирулентность. Факторы.
- •2) Лечебно-профилактические сыворотки. Иммуноглобулины.
- •Билет 44
- •1) Антибиотики. Механизм действия бета-лактамов, аминогликозидов, макролидов, тетрациклинов, хинолонов, полиенов. Методы определения чувствительности.
- •2) Антигены.
- •Билет 45
- •1) Структура бактериальной клетки. Жгутики, типы их расположения, значение. Способы выявления жгутиков. Ворсинки (пили, фимбрии).
- •2) Молекулярная гибридизация. Полимеразная цепная реакция (пцр).
- •Билет 46
- •1) Споры бактерий, их строение, условия образования и причины устойчивости. Методы выявления спор.
- •2) Лечебно-профилактические сыворотки. Иммуноглобулины.
- •Билет 47
- •1) Микроскопические грибы. Морфология плесневелых и дрожжевых грибов рода Candida. Методы изучения грибов и их роль.
- •2) Антигены бактериальной клетки. Локализация, химическая природа, антигенная мимикрия. Протективные антигены.
- •Билет 48
- •1) Внутрибольничная инфекция, ее типы. Госпитальные штаммы. Особенности лабораторной диагностики внутрибольничных инфекций.
- •2) Характеристика современных вакцин. Требования к вакцинам. Живые вакцины.
- •Билет 49
- •1) Генная инженерия.
- •2) Дисбактериоз.
- •Билет 50
- •1) Стерилизация и дезинфекция, основные методы и характеристика. Аппаратура.
- •2) Микрофлора толстого кишечника, количественный и качественный состав. Характеристика. Способ изучения. Значение нормальной микрофлоры для организма человека.
Билет 26
1) Клеточная стенка бактерий. Строение Гр+ и Гр- бактерий. Функции клеточной стенки. L-формы.
Клеточная стенка - поверхностная структура бактериальных клеток, располагается над цитоплазматической мембраной (ЦПМ).
Функции:
Защищает клетку от механических, физических воздействий окружающей среды;
защищает от осмотического лизиса;
определяет форму и антигенную специфичность клетки.
Отсутсвует у микоплазм.
Клеточнаястенка Гр+ бактерий состоит в основном из пептидогликана, расположенного в 40 слоев; составляет до 90% массы клеточной стенки. Пептидогликан "прошит" ковалентно связанными с ним тейхоевой (продольно) и липотейхоевой (поперечно) кислотами.
Клеточная стенка Гр- микроорганизмов - 1-2 слоя пептидогликана, расположенных кнаружи от ЦПМ, с ним посредством липополисахарида связана наружная мембрана, сходная по строению с ЦПМ, но внутренний слой образован фосфолипидами, а наружный - липополисахарид (ЛПС).
L-формы микроорганизмов - это микроорганизмы, полностью или частично утратившие клеточную стенку, но сохранившие способность в размножению. Устойчивые L-формы - полностью утратившие клеточную стенку и не способные ее восстановить. Неустойчивые L-формы - частично утратившие и способные восстановить. Являются осмотически неустойчивыми и исследуются при помощи фазово-контрастной микроскопии.
Клеточная стенка выявляется методом Пешкова:
препарат фиксируют жидкостью Карнуа 15 мин;
промывают водой;
протравливают раствором танина 6-8 мин;
промывают водой;
окрашивают водным раствором фуксина 30-60 сек;
не промывают, высушивают, микроскопируют.
Результат: в поле зрения видны клетки с розовой цитоплазмой, окруженные красной клеточной стенкой.
2) Серологические реакции. Реакция нейтрализации токсина антитоксином.
Серологические реакции - методы и приёмы исследования сывороток крови. Все серологические реакции основаны на иммунологии, взаимодействии антигена и антитела. К ним относят: агглютинацию , реакцию связывания комплемента , преципитацию, гемагглютинацию, реакцию нейтрализации и др.
Реакция нейтрализации токсина антитоксином заключатся во взаимодействии между экзотоксином (антигеном) и специфической антитоксической сывороткой (антителом-антитоксином), в результате чего образуется комплекс "антиген+антитело", и экзотоксин теряет свои токсические свойства. Ее ставят in vivo и in vitro.
In vivo может быть поставлена на лабораторных животных и в организме человека.
Для проведения на животных исследуемый материал, в котором предполагают присутствие экзотоксина (определяемый антиген) смешивают со специфической антитоксической сывороткой (известные антитела), выдерживают в термостате и вводят животному. Если произошла реакция нейтрализации (совпали антигены и антитела) - животное остается живо. Такие биологические пробы проводят при диагностике столбянка, ботулизма, анаэробной газовой инфекции и др.
На принципе реакции нейтрализации основаны диагностические кожные пробы Шика и Дика, выявляющие наличие у детей иммунитета к дифтерии (проба Шика) и скарлатине (проба Дика). Детям вводят в область предплечья стандартные малые дозы соответствующих токсинов и наблюдают за реакцией. Если антитела есть - реакции не будет. В настоящее время применяют редко.
In vitro 4 способа: флоккуляция, нейтрализация в геле по Оухтерлони и ускоренные методы - РОНГА и РНАТ.
Реакция флоккуляции наблюдается при соединении в эквивалентных соотношениях экзотоксина со специфической антитоксической сывороткой в присутствии электролита, при этом выпадают мелкие хлопья флоккулята. По механизму аналогична реакции преципитации.
Методика. Предварительно по стандартной антитоксической сыворотке с известным количеством антител в 1 мл, измеряемом в международных единицах - МЕ, усатанвливают количество Lf (limes flocculations) токсина. 1 Lf токсина - количество токсина (в 1 мл), которое дает инициальную флоккуляцию с 1 МЕ антитоксической сыворотки.
В 5 пробирок наливают по 2 мл токсина и возрастающие количества испытуемой антитоксической сыворотки (от 0.2 до 0.6 мл), разведенной 1:10. После инкубации при 45С 30 минут отмечают пробирку, в которой быстрее всего произошла флоккуляция -> эквивалентно количество токсина и сыворотки.
Титром антитоксической сыворотки считается количество МЕ в 1 мл сыворотки. В неразвекденной сыворотке 1 мл = 1000 МЕ. У нас разведение 1:10, 0.4 мл = 40МЕ, 0.6 = 60МЕ и т.д.
Реакция нейтрализации в геле по Оухтерлони - метод двойной иммунодиффузии.
Методика. На поверхность плотной элективной среды помещают стерильную полоску фильтровальной бумаги, пропитанную антитоксической сывороткой, содержащей 500 МЕ/мл. По обеим сторонам от бумажной полоски засевают испытуемые штаммы бляшками диаметром 0.8-1см, там же проводят посев контрольный: токсигенной и нетоксигенной культур.
Результат учитывают через 24-48 часов инкубации при 37С. Если культура токсигенная, то между полоской бумаги и растущей культуры образуются белые линии преципитации в результате встречной диффузии антител-антитоксинов и продуцируемого культурой токсина. Образующиеся дугообразные линии должны совпадать с линией преципитата контрольной токсигенной культуры. У нетоксигенной культуры такие линии отсутствуют.
РОНГА. Ставят с эритроцитарным диагностикумом, который представляет собой взвесь отмытых эритроцитов, нагруженных специфическими иммуноглобулинами.
Методика. Планшет с 96 лунками, в них размещают двукратные культуральные жидкости, начиная с 1:8 в объеме 0.1 мл, туда же добавляют 0.1 мл эритроцитарного диагностикума. Контроли: культуральная жидкость токсигенного штамма, культуральная жидкость нетоксигенного штамма, контроль эритроцитарного антительного диагностикума.
Учет опыта через 2 часа в термостате при 37С - СКОРОСТНОЙ ТЕСТ - визуально аналогично РНГА.
РНАТ. Разновидность РОНГА. Участвуют: культуральная жидкость, возможно содержащая токсин, конкретная антитоксическая сыворотка, эритроцитарный диагностикум.
Методика. Разводят двукратно культуральную жидкость с NaCl и разливают в лунки по 0.1 мл, туда же добавляют 2х0.1 мл антитоксической сыворотки и выдерживают при 37С 30 минут. Для выявления нейтрализации токсина вносят эритроцитарный диагностикум и инкубируют 2 часа. Контроли: культуральная жидкость токсигенного штамма, культуральная жидкость нетоксигенного штамма, контроль эритроцитарного антительного диагностикума, контроль конкретной антитоксической сыворотки (стандартная антитоксическая+эритроцитарный диагностикум).
Визуально положительная реакция - пуговка, отрицательная - зонтик. Происходит из-за того, что при совпадении культуральной жидкости и сыворотки токсин нейтрализуется -> гемагглютинации не будет (все антитела израсходовались на токсин); если жидкость и сыворотка не совпали -> антитела остались -> гемагглютинация.