Лабораторная работа №14 Тема «Определение количества хлорофилла по т.Н. Годневу» (2 часа) Цель

1. Изучение процесса биосинтеза хлорофилла в зависимости от условий окружающей среды.

2. Систематизация знаний о физико-химических методах анализа

3. готовностью использовать основные методы защиты от возможных последствий аварий, катастроф, стихийных бедствий (ОК-11) профиль подготовки: Физическая культура. Безопасность жизнедеятельности (очная форма обучения);

4. способностью использовать возможности образовательной среды для формирования универсальных видов учебной деятельности и обеспечения качества учебно-воспитательного процесса (ПК-5) профиль подготовки: Физическая культура. Безопасность жизнедеятельности (очная форма обучения).

Содержание

Проведение количественного анализа содержания хлорофилла

Обработка результатов анализа

Формулирование выводов

Работа с вопросами и расчетными задачами

Требования к умениям бакалавров

Знать

Особенности аминокислот и белков как буферных соединений

Термины

Уметь

Готовить образцы для анализа

Решать задачи по соответствующему разделу

Проводить качественный анализ

Приготовление стандарта (по Гетри): а) 10 г химически чистой (несколько раз перекристаллизованной) CuS0₄ • 5Н₂0 растворяют в 1 л дистиллированной воды; б) 20 г К₂Сг₂0₇ в мерной колбе на 1 л растворяют в дистиллированной воде и доводят водой до метки; в) готовят 2 н. раствор NHS. Из полученных трех растворов готовят стандарт: отмеряют 28,5 мл раствора (а) в мерную колбу емкостью 100 мл, вносят в нее 50 мл раствора (б) и 10 мл раствора (в). Смесь доводят водой до метки. Приготовленный таким образом стандартный раствор соответствует по окраске 85 мг чистого хлорофилла в 1 л.

Методика опыта. Навеску 2—3 г зеленого листа или другой исследуемой зеленой части растения тщательно растирают в фарфоровой ступке с кварцевым песком и мелом или еще лучше с MgCO₃. К растертому материалу добавляют несколько миллилитров 96%-ного этилового спирта и материал еще раз осторожно растирают вместе с растворителем. Жидкость сливают в небольшую воронку Бюхнера (диаметром 3—5 см) и отсасывают. К массе прибавляют снова 4—5 мл спирта и вновь растирают в течение нескольких минут. Так повторяют 2—3 раза, а затем количественно переносят смесь из ступки на фильтр и отсасывают. Ступку ополаскивают несколькими .миллилитрами спирта, сливая его на уплотненный материал фильтра, затем через 2—3 мин производят отсасывание. Этот прием повторяют до тех пор, пока растворитель, стекающий с кончика отводной трубки воронки, не станет совсем бесцветным. Полученный экстракт количественно переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят этиловым спиртом до метки. Раствор анализируют на ФЭКе и количество хлорофилла вычисляют по калибровочной кривой, составленной согласно стандартному раствору:

Х=аlv100/l₁g1000

где а — количество хлорофилла, которому соответствует 1 мл стандартного раствора, мг; / — оптическая плотность спиртового экстракта исследуемого образца; 1г — оптическая плотность стандарта; v — объем полученного спиртового экстракта; g — навеска зеленого материала,

г.

Вопросы

1. Какие особенности структуры хлорофилла можете назвать

2. Как осуществляется синтез хлорофилла

3. Назовите основные спектры поглощения хлорофиллов

4. Влияние экологических условий на синтез хлорофилла

Средства контроля: -активные формы: фронтальный опрос; доклады по рефератам «Актуальные вопросы изучения фотосинтеза». Групповое творческое задание создание презентации: Метаболизм клетки при воздействии химических факторов.

Содержание внеаудиторной работы бакалавра при подготовке к занятию

1. Владеть содержанием вопросов (по лекции).

2. Законспектировать вопрос Обмен веществ между организмом и окружающей средой как основное условие жизни. Ассимиляция (анаболизм) и диссимиляция (катаболизм). Пластический и функциональный обмен.

3. Подготовиться к диагностической самостоятельной работе в форме опроса и теста.

4. Изучить термины по данной теме

Литература

1. Филиппович Ю.Б., Коничев А.С., Севостьянов Г.А., Кутузова Н.М. Биохимические основы жизнедеятельности человека. - М.: Владос, 2005. - 407 с.

2. Митякина Ю.А. Биохимия: учебное пособие. - М.: РИОР, 2005.- 113 с. (Электронный ресурс. - Режим доступа: http://www.knigafund.ru/books/28653).

3. Тестовый контроль знаний по биохимии: методическое пособие. – Ульян. гос. пед. ун-т им. И. Н. Ульянова. – Ульяновск: УлГПУ, 2010. - 28 с.