2. 57.Составьте технологическую и аппаратурную схемы получения экстракционных органопрепаратов на примере препарата «Пепсин».

Особенности технологии. А) стабилизация ферментов (т.к. они очень лабильны и их эффективность зависит от рН и температуры ) как на стадии получения субстанции, так и в ЛФ: защита активных центров (н.п. иммобилизацией), защита от инактивирующих факторов нанесением оболочки, введение в субстанцию и в ЛФ веществ ингибирующих деструкцию ферментов.

Б) Органы и ткани берут на мясокомбинате от здоровых животных (прошедших ветеринарный осмотр). Перед переработкой удаляются жилы, жир, загрязнения. Животное сырье быстро портится, подвергается микробной порче, поэтому особое внимание уделяется подготовке сырья. Свежие органы и ткани быстро перерабатывают или чаще всего консервируют различными способами:

1. Замораживание при t «– 25»-«- 40С».; В таком виде сырье можно перевозить в холод устан и хранить при t= - 18 – 15С в теч 1 года.

2.Консервирование орг р-телями (спирт, ацетон). Происходит частичное обезвоживание сырья и одновременно обезжиривание.

3.Удаление влаги можно проводить сублимационным высушиванием биологического сырья (замораживают и т.о. удаляется и влага и пар). 4.Засаливание хлоридом натрия или его конц раствором.

Технологическая схема получения препаратов.

Пепсин – сырьем служит слизистая оболочка желудка свиней, где он образуется в виде профермента – пепсиногена. Пепсиноген активируется кислотой хлороводородной и с помощью образовавшихся молекул пепсина.

Iстадия. Подготовка сырья и экстрагента.

Измельчение. На механизир мясорубках-волчках, превращ в фарш.

IIстадия. Экстракция (методом мацерации) совмещ с автолизом.

(Вода + HCl, рН 1,4-1,5) (Сырье : экстрагент = 1:10) (реактор с мешалками) t= 44С - 24ч.

IIIстадия. Очистка.

1 операция.Автолизат сливают, отделяют от верхнего слоя жира.

2 операция.фильтруют через плотные ткани (бельтинг), центрифугированием в центрифуге фильтрующего действия(стр. ротор перфорирован, внутри него укреплен фильтрующий материал и под действием ценробежной силы происходит фильтрование).

3 операция. Высаливание – добавляют 20 – 25%-ный раствор NaCl. Пепсин выделяется из раствора и всплывает на поверхность.

IVстадия. Сушка.( в вакуум-сушильном шкафу при t=35 – 40С) (или в распылительной сушилке).

Vстадия. Измельчение в шаровой мельнице и просеивают.

VI.Стандартизация – по протеолитической активности (переваривать куриный белок яйца): 10г белка + 0,1г препарата = растворение за 3-4ч, образование опалесцирующего раствора.

VII. Смешивание с сахарной пудрой.

VIII. упаковка в банки

Способы очистки. (по лекциям).

1. мембранное фильтрование (микро и ультрафильтрация)

2. достиже изоэл точки (созд рН – балластн белки - в осадок)

3. хроматографические методы:

- гель-фильтрация

- Ионно-обменная хроматография

- Гидрофобная хроматография: гидрофобные вещества сильнее связываются с сорбентом и выходят позднее

- Аффинная: 1 из компонентов смеси ковалентно связывается с лигандом, нарушая эту связь элюируют высокоочищенный белок.

4. кристаллизация: многократно повторяют при разных значениях рН, в конце достигая изоэлектрической точки.

5. электрофорез в полиакриламидном геле: используют перед кристаллизацией: определенный белок с определенной массой проходит через гель, а другой нет.

Технологии получ органопреп.

1. Высуш, обезжир и измел. железы и ткани – тиреоидин, энтеросан.

2. Экстракционные – пепсин, инсулин, панкреотин.

3. Гидролизаты – церебролизин, солкосерил;

4. Инъек р-ры, сод макс. очищ в-ва (адреналин)