- •Список литературы
- •2.0Бзор литературы
- •2.1. Общие представления по этологии пчел.
- •2.3. Некоторые аспекты микробиологического состояния пчелиной семьи.
- •Признаки болезни.
- •2.5. Микрофлора здоровой пчелиной семьи .
- •2.6. Почему болеют пчелы.
- •2.7. Хитозан и его значение
- •2.9. Основные этапы получения хитозана
- •2.8. Источники и способы получения хитозана
- •2.10. Основные источники хитозана Ракообразные
- •2.11. Пчела как потенциальный источник хитозана
- •3.Экспериментальная часть
- •3.1.Объекты и методы исследования.
- •3.1.1. Объекты исследования.
- •3.1.2. Методы исследования.
- •Отбор проб и смывов для микробиологического анализа.
- •Подготовка к анализу.
- •3.1.2.3. Идентификация микрофлоры.
- •3.1.2.3.2.Идентификация микроорганизмов.
- •3.1.2.4. Определение чувствительности микроорганизмов к бактерицидным веществам.
- •3.1.2.5.2. Методы получения хитозана. Щелочной гидролиз
- •1. Жесткий щелочной гидролиз
- •2. Мягкий щелочной гидролиз
- •3.1.2.8. Определение динамической вязкости
- •3.1.2.9. Кондуктометрическое определение степени деацетилирования хитозана
- •3.2. Результаты и обсуждение.
- •Изучение микрофлоры ульев здоровых пчелиных семей в зависимости от годичного цикла.
- •3.2.1. Изучение особенности годичного цикла жизни пчелиной семьи.
- •3.2.2. Происхождение и роль микрофлоры здоровой пчелиной семьи.
- •3.2.3.Микрофлора ульев здоровой пчелиной семьи.
- •3.2.4.Влияние гигиенических условий углекислого газа в гнезде на семьи пчел.
- •3.2.5. Защитные свойства внешних покровов пчел от микрофлоры.
- •3.2.6. Получение хитозана из подмора пчел.
- •3.2.6.1.Характеристика подмора пчел.
- •3.2.6.2 Депротеинирование
- •3.2.6.3. Деацетилирование
- •3.2.6.4. Ферментативный гидролиз хитозана
- •3.2.7.Технология переработки подмора пчел.
- •3.2.8.Технология введения пчелозана (хитозана) в зубные пасты.
- •3.2.9.Клинические испытания зубной пасты «Пчелка».
- •5. Список литературы.
3.Экспериментальная часть
3.1.Объекты и методы исследования.
3.1.1. Объекты исследования.
Исследовательскую работу проводили в Пермской области на пасеках , принадлежащих компании "Тенториум".
К исследованию были взяты 70 пчелиных семей среднерусской породы пчел. Семьи размещались на 6-8 сотовых рамках.
На момент изысканий пчелиные семьи были сильными и здоровыми ,на сотовых рамках находилось 10 -15 тысяч пчел согласно визуальным наблюдениям.
На фотографии (рис.2) представлены рабочие пчелы из среднестатистического улья пасеки. На заснятом участке сотов выборка из пчел порядка 75 особей.
На фотографии (рис.3) запечатлен уголок сотов с открытым расплодом и пчелы кормилицы.
Слева вверху - полоска темных ячеек с пыльцевым кормом. Выше слева - несколько ячеек с запечатанным медом.
На фотографии (рис.4) показаны соты. В центре -свободные ячейки , из которых вышли молодые пчелы , и ячейки с еще запечатанным расплодом , обрамленные узкой полоской ячеек с пергой. Верх и углы сотов заняты медовыми ячейками.
Пчелиные семья размещались в многокорпусных ульях в двух корпусах , улья были выставлены на высоких ,сухих местах ,которые были защищены от прямых лучей солнца.
Подмор пчел , используемый для исследования и получения хитина , собирали после благополучной зимовки пчел и в течение активного медосбора.
Подмор пчел хранили при 4°С в условиях холодильника в холщевых мешках
.
\
среднестатистического улья пасеки. На заснятом участке сотов выборка из пчел порядка 75 особей.
39
Рис.З.На фотографии запечатлен уголок сотов с открытым расплодом и пчелы кормилицы.
Слева
вверху - полоска темных ячеек с пыльцевым
кормом. Выше слева - несколько ячеек с
запечатанным медом.
3.1.2. Методы исследования.
Отбор проб и смывов для микробиологического анализа.
Пробы для микробиологического анализа отбираются с соблюдением правил асептики , чтобы исключить вторичное микробное загрязнение продукта. Объем пробы корректируется в зависимости от предполагаемых исследований.
Контроль микробиологической обсемененности ульев, сотовых рамок с помощью смывов стерильными тампонами.
Стерильные ватные тампоны готовят предварительно на стеклянных , деревянных или металлических палочках , вмонтированных в ватно-марлевые пробки пробирок. Пробирки должны содержать приблизительно 2 мл стерильного 0,9 % раствора хлорида натрия. На месте взятия смыва тампон увлажняют наклоном пробирки.Для получения смыва увлажненным тампоном проводят многократно по поверхности стенок улья или сотовых рамок , площадь для смыва должна составлять 100 см2.Смывы с мелких предметов берутся со всей поверхности.
После взятия пробы тампоном проводят несколько раз по поверхности чашки Петри с мясо-пептонным агаром (МПА) для выявления бактериальной микрофлоры и на чашки Петри со средой Сабура (СА) для выявления грибных культур. Чашки помещают в термостат и выдерживают при 37°С в течение 48 часов , после чего проводят подсчет выросших колоний микроорганизмов . Обнаруженные таким образом микроорганизмы служат основой для идентификации микрофлоры поверхности ульев.
