- •Список литературы
- •2.0Бзор литературы
- •2.1. Общие представления по этологии пчел.
- •2.3. Некоторые аспекты микробиологического состояния пчелиной семьи.
- •Признаки болезни.
- •2.5. Микрофлора здоровой пчелиной семьи .
- •2.6. Почему болеют пчелы.
- •2.7. Хитозан и его значение
- •2.9. Основные этапы получения хитозана
- •2.8. Источники и способы получения хитозана
- •2.10. Основные источники хитозана Ракообразные
- •2.11. Пчела как потенциальный источник хитозана
- •3.Экспериментальная часть
- •3.1.Объекты и методы исследования.
- •3.1.1. Объекты исследования.
- •3.1.2. Методы исследования.
- •Отбор проб и смывов для микробиологического анализа.
- •Подготовка к анализу.
- •3.1.2.3. Идентификация микрофлоры.
- •3.1.2.3.2.Идентификация микроорганизмов.
- •3.1.2.4. Определение чувствительности микроорганизмов к бактерицидным веществам.
- •3.1.2.5.2. Методы получения хитозана. Щелочной гидролиз
- •1. Жесткий щелочной гидролиз
- •2. Мягкий щелочной гидролиз
- •3.1.2.8. Определение динамической вязкости
- •3.1.2.9. Кондуктометрическое определение степени деацетилирования хитозана
- •3.2. Результаты и обсуждение.
- •Изучение микрофлоры ульев здоровых пчелиных семей в зависимости от годичного цикла.
- •3.2.1. Изучение особенности годичного цикла жизни пчелиной семьи.
- •3.2.2. Происхождение и роль микрофлоры здоровой пчелиной семьи.
- •3.2.3.Микрофлора ульев здоровой пчелиной семьи.
- •3.2.4.Влияние гигиенических условий углекислого газа в гнезде на семьи пчел.
- •3.2.5. Защитные свойства внешних покровов пчел от микрофлоры.
- •3.2.6. Получение хитозана из подмора пчел.
- •3.2.6.1.Характеристика подмора пчел.
- •3.2.6.2 Депротеинирование
- •3.2.6.3. Деацетилирование
- •3.2.6.4. Ферментативный гидролиз хитозана
- •3.2.7.Технология переработки подмора пчел.
- •3.2.8.Технология введения пчелозана (хитозана) в зубные пасты.
- •3.2.9.Клинические испытания зубной пасты «Пчелка».
- •5. Список литературы.
3.2.7.Технология переработки подмора пчел.
Описание технологической схемы комплексной переработки подмора пчел.
Подмор пчел (1) в сухом виде суспендируют в дистиллированной воде для лучшего смачивания сырья. Далее добавляют дистиллированной воды до концентрации суспензии 10% и эмульгируют в течение 40минут при 4550 °С (2), после чего суспензию разделяют фильтрованием (3). При фильтровании отделяют эмульгат, содержащий до 12-15% белковой фракции, и твердый остаток. Стадия получения белка не предусмотрена и эмульгат выливают в канализацию. Твердый остаток направляют на депротеинирование (4). Депротеинирование возможно проводить классическими щелочными методами (5) и ферментативным способом (6).
В зависимости от концентрации щелочи гидролиз проводят по двум различным схемам. При использовании жесткого щелочного гидролиза (7) твердый остаток суспензируют в 10% растворе ЖОН, после чего суспензию разделяют фильтрованием (8) с получением гидролизата и хитин-меланинового комплекса (ХМК). Гидролизат, содержащий до 50% белка целесообразно использовать для выделения белковой фракции с последующим получением кормового белка. Осадок после фильтрования промывают дистиллированной водой до рН промывных 7,0 (9). Промывные воды не содержат токсических веществ и их выливают в канализацию.
При использовании в технологическом процессе мягкого щелочного гидролиза (10) депротеинирование осуществляют 3%-ным раствором ЫаОН в течение 2ч. Суспензию подвергают фильтрованию (И) с получением щелочного гидролизата и твердого остатка. Гидролизат также может быть использован для получения белковых веществ. Твердый остаток посл
е
фильтрования, промывают дистиллированной водой до рН промывных вод 7,0 (12) и далее направляют на щелочную доочистку. Промывные воды не требуют очистки и могут быть сброшены в канализацию.
Ферментативное депротеинирование подмора (6) проводят в присутствии фермента - трипсина и дистиллированной воды при 40-45 °С в течение 2ч. Далее суспензию фильтруют с получением ферментного гидролизата и осадка (И). Гидролизат, содержащий до 40-45% белка, целесообразно направлять на стадию выделения белковых веществ. Осадок промывают дистиллированной водой (12) до рН промывных вод 7,0 и далее направляют на щелочную доочистку.
Щелочную доочистку хитина (13) после щелочного гидролиза в мягких условиях и ферментативного гидролиза проводят 1%-ным раствором №ОН с добавлением в количестве 0,05% Ка2803. Гидролиз ведут при 65-70 °С в течение 40мин. Гидролизованный хитин подвергают фильтрованию (14) с получением гидролизата и ХМК. Гидролизат направляют на очистку от белковых веществ. Твердый осадок промывают дистиллированной водой (15) до рН промывных вод 7,0.
После стадии депротеинирования хитин подвергают деацетилированию (16) 50%-ным раствором ЫаОН при 130 °С в течение 1.5ч. Далее суспензию охлаждают до 50 °С и фильтруют (17) с получением концентрированного гидролизата и твердого остатка - хитозана. Гидролизат возможно подвергать регенерации с выделением и очисткой щелочи, которую впоследствии можно использовать повторно (до 3-4 раз). Хитозан, полученный после деацетилирования, тщательно промывают дистиллированной водой (18) до рН промывных вод 7,0.
Для придания хитозану водорастворимых свойств проводят гидролиз хитозана (19). Хитозан гидролизуют ферментативным способом вприсутствии комплекса ферментов ТпсТгойегта \iride при 55 °С в течение 2ч. Гидролиз останавливают 0,1М №ОН. В щелочной среде хитозан выпадает в осадок, который отделяют центрифугированием. Осадок промывают дистиллированной водой до рН промывных вод 7,0 и высушивают на лиофильной сушке (20) с получением низкомолекулярного пчелиного хитозана (НПХ) (21).
Для дальнейших исследований был взят низкомолекулярный хитозан , полученный из подмора пчел в результате мягкого гидролиза последнего.
