75. Строение бактериофагов. Взаимод-е т-фагов с клеткой (адсорбция, проникн-е фаговой днк в к-ку, размнож-е фага и выход из к-ки). Лизогения и лизогенн конверсия, мех-м, использ-е фагов в медицине.

Бактериофаги – вирусы, паразит-ют в клетках бактерий. Различают бактериофаги: вегетат, вирулентные, дефектные, зрелые, умеренные. По спектру д-я: типовые фаги (Т-фаги – лизируют бактерии отд типов внутри вида), моновалентные (лизируют бактерии 1-го вида), поливалентные (лизируют бактерии нескольких видов). Бактериофаги устойчивы, переносят высокие t, дезинф-ю (кроме к-т и формалина), солнечный свет, УФО. Морфология: похожи на головастиков. Нуклеокапсид - по типу смеш симметрии. Головка – по типу кубич симметрии, ДНК-содерж геном, хвост – по типу спиральной симметрии, включает полый стержень, сократит чехол вокруг стержня, в дистальном отделе стежня – базальная пластина.

Взаимод-е Т-фагов с клеткой: адсорбция (при помощи рецепторов на бактер/стенке), инъекция (лизоцим хвоста расщепляет клет/стенку, чехол сокращ-ся и вталкивает стержень в клетку, вир ДНК впрыскив-ся), репродукция фага (вирус начинает генетич управл-е клеткой, синтез-ся фаговые белки и нулкиеновые к-ты), выход дочер/популяций (клетка хозяина лизир-ся).

Лизогения – способ-ть разл штаммов бактерий, содержащих бактериофаги, лизировать др штаммы бактерий, не разрушаясь при этом. Геном бактерии и умеренного фага сосуществуют в виде единой хромосомы, в кот-й ДНК фага включена в ДНК хромосомы бактерии. Перед-ся по наследству дочер/клеткам, фаговый геном освобожд-ся с последующим лизисом бактерии.

Лизогенная конверсия – ассоциация фаговой ДНК с геномом бактерии вызывает измен-е морфологии и Аг-св-в бактерии. Св-ва меняются не только у бактерии, но и у фага. Размножаясь в клетке, он способен захватывать некот-е гены бактерии и, инфицируя др клетку, передаёт приобрет гены новому хозяину. Это - трансдукция. В ней участвуют умеренные и дефектные фаги. Использ-ся как векторы в генной инженерии.

76. Бактериофаги, вирулентные и умеренные фаги. Мех-м взаимод-я вирулентного фага с микробом. Особ-ти морфогенеза крупных фагов. Мех-м и крупные фаги смотри 75

Бактериофаг – вирус бактерий, паразитирует только на жив микробной клетке. Существуют вирулентные и умеренные фаги. Вирулентные фаги вызывают лизис бактерии и синтез новых фагов. Умеренные фаги не лизируют бактерию, их ДНК включ-ся в хромосому бактерии и при делении перед-ся неограниченному числу потомков – это лизогения.

Большинство фагов видоспецифичны, но есть фаги, способные поражать отд варианты одного и того же вида бактерий. Это используют для фаготипирования внутри вида. Бактериофаги применяют при эпидемиологич исслед-ях, выявляющих резервуар инф-и. По содерж-ю бактериофагов в воде судят о наличии в ней патогенных бактерий. Выдел-е бактерий 1-го фаготипа от разных б-ных указ-ет на общий источник зараж-я. Бактериофаги применяют с леч целью (стафилококковые).

77. Методы культив-я вирусов. Заражение жив-х, куриных эмбрионов. Получение культур. Среды. Цитопатич эффект, проявления. Р-я гемадсорбции.

Вирусы размнож-ся только в жив клетках. Культив-е вируса происходит на уровне орг-ма подопытн жив-го и на уровне культуры клеток (вне орг-ма). Вирусы имеют тканевую и типову специф-ть. Поэтому при выдел-и неизвестного вируса одномоментно заражают 3-4 культуры клеток. Чаще используют эмбрион/ткани (кур/эмбрион). Вирусы оспы хорошо размнож-ся в хорион-аллантоисной оболочке, паротита – в амнионе, гриппа – в амнионе и аллантоисе, бешенства – в желточном мешке. Берут 12-дневные эмбрионы.

При невозмож-ти выделить и идентиф-ть вирус стандартными методами (на культуре клеток, кур/эмбрионах) инфекц материал вводят лаборат жив-м (мыши, кролики, обезьяны), после развития инфекц процесса проводят повторное зараж-е чувствит клеточных культур. Методы типирования вирусов:

• микроскопические – вирусоскопия, обнаруж-е внутриклеточных включ-й;

• иммуновирусологич – метод иммунной электронной микроскопии, иммунофлюоресценции, гемагглютинации, гемадсорбции.

Идентиф-я вирусов – иммуновирусологич методы, включают р-и – РТГА, задержки гемадсорбции, РСК, РН, преципитации в геле агара.

Цитопатич эффект - индикатором наличия вирусов в заражённой культуре клеток служат:

1. Развитие специфич дегенерации клеток – под микроскопом: образ-е многоядерных гигантских клеток, округление клеток, очаги клеточной пролиферации.

2. Обнаруж-е внутриклет включ-й – в цитоплазме или ядре (окрашивают, смотрят под микроскопом).

3. Обнаруж-е специфического Аг методом иммунофлюоресценции.

4. (+) р-я гемадсорбции, (+) р-я гемагглютинации.

5. Образ-е бляшек – появл-ся обесцвеч участки в культуре, состоящие из погибших клеток – это колонии вируса. Окрашивают красным красителем – бляшки круглые, светлые.

Р-я гемадсорбции – вирусы адсорбируют вносимые в культуру клеток эритроциты (позволяет судить о репродукции вирусов).