- •Волгоградский государственный медицинский университет
- •Волгоград, 2013
- •Учёт успеваемости и посещаемости
- •Тематический план проведения занятий по разделу «Общая микробиология»
- •Часть I морфология микроорганизмов
- •Устройство и требования, предъявляемые к работе в микробиологической лаборатории
- •Устройство микробиологической лаборатории
- •Уровень опасности работ с микробами и категории лабораторий
- •Требования к работе с микроорганизмами I и IV групп патогенности
- •Основные помещения микробиологической лаборатории
- •Требования, предъявляемые к работе в бактериологической лаборатории
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Аппаратура для выращивания микроорганизмов, стерилизации и других микробиологических исследований
- •Микроскопы и методы микроскопии
- •Контрольные вопросы
- •Морфология и структура бактерий Программ трех занятий
- •С пособы окраски
- •Позитивные
- •Самостоятельная работа студента
- •Методика окраски по Граму
- •Методика окраски по Нейссеру
- •Метод Бурри-Гинса (выявление капсулы)
- •Методика окраски по Бурри-Гинсу
- •На практическом занятии
- •Контрольные вопросы
- •Часть II физиология микроорганизмов
- •Питательные среды. Методы выделения чистых культур бактерий
- •Требования к питательным средам
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Методические указания Работа 1
- •Работа 3
- •Бактериологический метод исследования
- •Техника посева и пересева
- •Изучение бактериальных колоний
- •Выделение чистой культуры бактерий аэробов
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Методы культивирования анаэробных микробов
- •1. Физические методы:
- •2. Химические методы:
- •3. Биологические методы:
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии по теме: «Бактериологический анализ, культивирование анаэробов»
- •Ферментативные свойства бактерий
- •Среды для определения сахаролитических свойств
- •Cамостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Контрольные вопросы
- •Основные противоэпидемические мероприятия в лаборатории Стерилизация
- •Физические методы
- •Механические методы
- •Химические методы
- •Контроль стерилизации
- •Биологический контроль
- •Внутренний контроль качества микробиологических исследований
- •Контроль температурных режимов инкубации
- •Контроль качества стерилизации и дезинфекции
- •Химический контроль
- •Термический контроль
- •Контроль качества дистиллированной воды
- •Центральное стерилизационное отделение
- •Классификация антисептиков по механизму действия
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Демонстрация опыта действия солнечного света на бактерии (опыт Бухнера).
- •Оформление альбома:
- •Санитарная микробиология воды Общие вопросы
- •Санитарно-микробиологическое исследование воды
- •Санитарно-гигиенические показатели и нормативы качества питьевой воды
- •Санитарная микробиология воздуха Общие вопросы
- •Санитарная микробиология предметов обихода и медицинского оборудования Общие вопросы
- •Санитарно-микробиологическое исследование
- •Посевы на стерильность хирургического инструмента
- •Бактериологический контроль эффективности обработки кожи операционного поля и рук хирургов
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Микрофлора тела человека
- •Микрофлора кожи
- •Микрофлора уха
- •Микрофлора конъюнктивы
- •Микрофлора дыхательных путей
- •Микрофлора полости рта
- •Микрофлора желудочно-кишечного тракта
- •Микрофлора мочеполовой системы
- •Значение нормальной микрофлоры
- •Понятие «дисбактериоз». Условия развития
- •Вопросы для обсуждения
- •Микрофлора кожи Посев волоса и «отпечатков» с губ и пальцев рук на мпа
- •Микрофлора носа и зева Посев отделяемого из носа на кровяной агар
- •Микрофлора кишечника Посев кала на среду Эндо
- •Миклофлора зубного налета
- •Оформление протокола
- •Тема: «Генетика бактерий»
- •Механизмы рекомбинаций
- •Самостоятельная работа студентов на практическом занятии
- •Опыт «Конъюгация 2»: передача плазмидного признака рези-стентности к тетрациклину (r Тc).
- •Опыт по определению колициногенности.
- •Диагностика фенилкетонурии.
- •Инфекция
- •Самостоятельная работа студентов на практическом занятии
- •Контрольные вопросы
- •Классификация химиотерапевтических препаратов
- •Механизмы антимикробного действия
- •Основные осложнения при химиотерапии
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии
- •Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом стандартных индикаторных дисков
- •Микрофлора человека и санитарная бактериология
- •Список литературы
Механические методы
Фильтры задерживают микроорганизмы благодаря пористой структуре матрикса, но для пропускания раствора через фильтр требуется вакуум или давление, поскольку сила поверхностного натяжения при таком малом размере пор не дает жидкостям фильтроваться.
Существуют 2 основных типа фильтров - глубинные и фильтрующие.
Глубинные фильтры состоят из волокнистых или гранулированных материалов (асбест, фарфор, глина), которые спрессованы, свиты или связаны в лабиринт проточных каналов, поэтому четкие параметры размера пор отсутствуют.
Частицы задерживаются в них в результате адсорбции и механического захвата в матриксе фильтра, что обеспечивает достаточно большую емкость фильтров, но может приводить к задержке части раствора.
Фильтрующие фильтры имеют непрерывную структуру, и эффективность захвата ими частиц определяется в основном соответствию их размеру пор фильтра. Мембранные фильтры имеют низкую емкость, но эффективность не зависит от скорости протока и перепада давлений, а фильтрат почти или совсем не задерживается.
Мембранная фильтрация в настоящее время широко применяется для стерилизации масел, мазей и растворов, неустойчивых к нагреванию - раствор для внутривенных инъекций, диагностические препараты, растворы витаминов и антибиотиков, сред для культур тканей и т. д. и т. п..
Химические методы
Химические методы стерилизации, связанные с применением химических веществ, обладающих явно выраженной антимикробной активностью, делятся на 2 группы: стерилизация газами и растворами (чаще известна как «дезинфекция»).
Химические методы стерилизации газами используются в лечебно- профилактических учреждениях для обеззараживания медицинских материалов и оборудования, которые нельзя стерилизовать другими способами (оптические приборы, кардиостимуляторы, аппараты искусственного кровообращения, эндоскопы, изделия из полимеров, стекла).
Бактерицидными свойствами обладают многие газы (формальдегид, окись пропилена, озон, надуксусная кислота и метилбромид), но шире всего используется окись этилена, поскольку она хорошо совместима с различными материалами (не вызывает коррозию металла, порчи обрабатываемых изделий из бумаги, резины и всех марок пластмасс). Время экспозиции при использовании газового метода стерилизации варьирует от 6 до 18 часов в зависимости от концентрации газовой смеси и объема специального аппарата (емкости) для этого вида стерилизации. Согласно «Методическим рекомендациям по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации медицинских инструментов» № 26-613 от 09.02.88 г. для стерилизации газами в качестве газового стерилизационного аппарата возможно применение микроанаэростата, а кроме окиси этилена или смеси окиси этилена с бромистым метилом, - паров 40 % формальдегида в этиловом спирте при температуре 80 °С в стерилизационной камере в течение 60 минут.
Контроль стерильности производят в специально оборудованных боксах, исключающих возможность вторичного контакта изделий с микрофлорой. Для контроля отбирают не менее 1 % из числа одновременно простерилизированных изделий. Производят посев изделий в питательную среду для контроля. При отсутствии роста бактерий дают заключение о стерильности изделия.
Стерилизация растворами применяется при обработке большинства поверхностей (пространств) или медицинских приборов, которые не могут быть обеззаражены другими методами.
Согласно требованиям отраслевого стандарта ОСТ 42-21-2-85 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения» большинство изделий медицинского назначения из металла, стекла, пластмасс, резины, проходят предстерилизационную обработку, состоящую из нескольких этапов:
замачивание в моющем растворе при полном погружении изделия в дезинфицирующий раствор в течение 15-ти минут;
мойка каждого изделия в разобранном виде в моющем растворе в ручном режиме в течение 1-ой минуты;
ополаскивание под проточной водой хорошо промытых изделий в течение 3-10 минут;
сушка горячим воздухом в сушильном шкафу.
Контроль качества предстерилизационной очистки изделий медицинского назначения на наличие крови проводят путем постановки амидопириновой пробы. Остаточные количества щелочных компонентов моющего средства определяют с помощью фенолфталеиновой пробы.
Согласно требованиям этого же ОСТа обязательным условием стерилизации растворами изделий медицинского назначения является полное погружение изделий в стерилизационный раствор в разобранном виде, с заполнением каналов и полостей, при температуре раствора не менее 18 °С. Используют только эмалированные емкости (без повреждений) со стеклянными или пластмассовыми крышками. После стерилизации изделия быстро извлекают из раствора с помощью пинцетов или корнцангов, удаляют раствор из каналов и полостей, затем дважды последовательно промывают простерилизованные изделия стерильной водой. Простерилизованные изделия используют сразу по назначению или помещают в стерильную емкость, выложенную стерильной простыней, и хранят не более 3-х суток. В специальном журнале ведут обязательный учет всех циклов химической стерилизации с указанием даты, точного времени стерилизации (закладки, выемки раствора), название используемого препарата и его концентрации.
Препараты, используемые для стерилизации, классифицируются по группам: кислоты или щелочи, перекиси (6 % раствор перекиси водорода), спирты (этиловый, изопропиловый), альдегиды (формальдегид, глутаровый альдегид), галогены (хлор, хлорамин, иодофоры - вескодин), четвертичные аммониевые основания, фенольные соединения (фенол, крезол).
Кроме того, в качестве удобных и экономичных дезинфицирующих растворов могут использоваться универсальные препараты, т.е. позволяющие проводить обеззараживание от всех форм микроорганизмов (бактерий, в том числе микобактерий туберкулеза, вирусов, включая ВИЧ, патогенных грибов) или комбинированные препараты («Дезэффект», «Аламинал», «Септодор», «Виркон»), совмещающие одновременно два процесса - дезинфекцию и предстерилизационную обработку.
Комплекс дезинфекционных мероприятий, ориентированных на удаление или уничтожение возбудителей инфекционных болезней в объектах или на биотических объектах окружающей среды, т. е. при их передаче от источника к восприимчивым людям, делится на 2 вида: очаговая дезинфекция и профилактическая дезинфекция.
Очаговая дезинфекция осуществляется в эпидемических очагах и в свою очередь подразделяется на текущую, если источник возбудителя присутствует, и заключительную, если источник удален.
Текущая дезинфекция направлена на постоянное обеззараживание экскрементов, рвотных масс, мокроты, патологического отделяемого, перевязочного материала и др. объектов в окружении больного, которые обсеменены или могли быть обсеменены возбудителями в течение всего периода, пока больной или носитель служат источником возбудителя инфекции.
Заключительная дезинфекция направлена на уничтожение патогенных микроорганизмов, оставшихся в очаге в жизнеспособном состоянии н различных предметах, хотя источник удален, т. е. после госпитализации, выздоровления или смерти больного. При заключительной дезинфекции обработке подлежат помещения, экскременты, рвотные массы, белье, предметы быта и все другие объекты, которые могли быть контаминированы возбудителями данного заболевания. Этот вид дезинфекции, как правило, осуществляется специализированными службами органов госэпиднадзора.
Профилактическая дезинфекция проводится в том случае, если источник инфекции не обнаружен, но предполагается возможность его существования. Этот вид дезинфекции чаще всего используют в медицинских учреждениях (профилактика профессионального заражения медицинского персонала внутрибольничных инфекций), на предприятиях общественного питания, предприятиях, изготавливающих, перерабатывающих и реализующих пищевые продукты, а также в местах массовых скоплений людей, где может находиться источник возбудителя инфекционного заболевания среди здорового населения.
При кишечных инфекциях дезинфекционные мероприятия направлены на очистку и обеззараживание источников питьевого водоснабжения, сточных вод, отбросов, пищевых продуктов, материалов от больного, посуды, белья, пищеблоков, санузлов. В очаге проводят и текущую, и заключительную дезинфекцию.
При инфекциях дыхательных путей дезинфекцию проводят с целью снижения микробного загрязнения воздуха конкретных помещений, что может достигаться путем не только влажной уборки и обеззараживания объектов в окружении больного, но и проветривания или УФ-облучения воздуха в данном помещении.
В очагах трансмиссивных инфекций дезинфекционные мероприятия проводят только при чуме, туляремии, лихорадке Ку, и на объектах, где работают с кровью.
При инфекциях наружных покровов дезинфекции подлежат все вещи, бывшие в употреблении (белье, расчески, ножницы, губки) в банях, душевых, бассейнах, парикмахерских, причем рекомендуется по возможности использовать универсальные препараты, обладающие бактерицидным (в т. ч. спорицидным), вирулицидным, фунгицидным свойствами.
При профилактике внутрибольничных инфекций дезинфекции должны подвергаться все изделия медицинского назначения после каждого пациента, руки персонала, раневая поверхность, операционное поле и т. д. и т. п.
Биологическая стерилизация - основана на применении антибиотиков, используется ограниченно - в культурах тканей для культивирования вирусов.
