Лабораторная работа Обнаружение кетоновых тел в моче

Принцип метода. Кетоновые тела (β-гидроксимасляная кислота, ацетатоуксусная и ацетон) появляются в моче при нарушениях углеводного и жирового обменов, в частности при диабете, а так же при голодании. В номальной моче кетоновые тела обычными реакциями не обнаруживается. Определение кетоновых тел в моче очень важно для диагностики заболевания, для контроля за ходом лечения и установлением диеты для больного диабетом.

Ход определения. 1. Проба Люголя на ацетон. К 2 мл мочи добавляют 3-4 капли раствора нитропруссида натрия и 2-3 капли раствора гидроксида натрия. Появляется красно-бурое окрашивание. При подкислении концентрированной уксусной кислотой окрашивание становиться ярко-красным. Если ацетон отсутствует в моче, при подкислении уксусной кислотой красное окрашивание переходит в желтое (реакция на креатинин в моче).

2. Проба Либена на ацетон. К 2 мл мочи добавляют 3-4 капли раствора гидроксида натрия и затем по каплям раствор Люголя до слабо-желтой окраски раствора. При наличии ацетона в моче жидкость мутнеет вследствие выделения бледно-желтого кристаллического осадка йодоформа, обладающего характерным запахом:

CH₃COCH₃ + 2I₂ + 4NaOH → CH₃I + CH₃COONa + 3NaI + 3H₂O

йодоформ

3. Проба Герхарда на ацетоуксусную кислоту. К 5 мл мочи прибавляют по каплям раствор хлорида железа(III), выпадает осадок фосфатов в форме FePO₄; при наличии ацетоуксусной кислоты от прибавления лишней капли хлорида железа (III) появляется винно-красное окрашивание (реакция на енолы), постепенно бледнеющее при стоянии вследствие самопроизвольного декарбоксилирования ацетоуксусной кислоты:

CH₃COCH₂COOH → CH₃COCH3 + CO₂

Вопросы к итоговому занятию «обмен липидов».

1. Напишите в формулах этапы окисления пальмитиновой жирной кислоты. Приведите расчет АТФ, выделяющегося при окислении пальмитата до СО₂ и Н₂О (органы, локализация процесса в клетке, ферменты).

2. Приведите расчет АТФ, выделяющегося при окислении стеариновой кислоты до СО₂ и Н₂О (органы, локализация процесса в клетке, ферменты).

3. Напишите в формулах этапы окисления жирной кислоты с 5 углеродными атомами. Напишите процесс включения в метаболизм пропионил-СоА (локализация процесса в клетке, органы, ферменты).

4. Напишите в формулах этапы окисления масляной жирной кислоты (С₄). Приведите расчет АТФ, выделяющихся при окислении до СО₂ и Н₂О (локализация процесса в клетке, ферменты).

5. Напишите биосинтез тристеарата в слизистой кишечника (формулы, локализация в клетке, ферменты).

6. Напишите биосинтез трипальмитата в печени (формулы, локализация в клетке).

7. Биосинтез пальмитиновой, стеариновой жирных кислот (в формулах до бутирил-АПБ) (органы, локализация в клетке, ферменты).

8. Биосинтез кетоновых тел (формулы, ферменты, локализация в клетке, органы).

9. Окисление кетоновых тел (этапы, ферменты, значение).

10. Биосинтез холестерола (до мевалоновой кислоты в формулах) (органы, локализация в клетке, ферменты).

11. Напишите липолиз триацилглицеролов в жировых депо (формулы, фермент, транспорт в крови продуктов липолиза).

12. Назовите особенности обмена липидов в жировой ткани.

13. Назовите особенности обмена липидов в печени.

14. Перечислите нарушения обмена липидов при сахарном диабете.

15. Нарушения обмена липидов при атеросклерозе (причины, последствия, профилактика).

16. Нарушения обмена липидов при ожирении.

17. Нарушения обмена липидов при жировой дистрофии (инфильтрации) печени.

18. Взаимосвязь обмена углеводов и липидов.