III. План практической работы

1. Изучить схему оценки иммунного статуса человека, тесты оценки иммунного статуса человека: клеточных и гуморальных факторов врожденного и приобретенного иммунитета и методы их определения (см. базовый текст).

2. Изучить схему постановки и учесть реакцию Манчини с целью определения концентрации IgG.

Моноспецифическую антиIgG сыворотку смешивают с расплавленным агаровым гелем и выливают в чашку Петри. После застывания в геле делают лунки, в которые вносят равные объемы исследуемых и стандартных сывороток. Стандартные сыворотки содержат различные известные концентрации IgG. Чашку Петри инкубируют при 37ºС в течение 4 часов. Антиген (IgG) диффундирует в гель и образует со специфическими антителами кольца преципитации (зоны иммунодиффузии). Затем измеряют диаметры зон иммунодиффузии вокруг контрольных лунок и строят калибровочную прямую. Измерив диаметры зон иммунодиффузии вокруг исследуемых лунок и используя калибровочную прямую, находят концентрацию IgG в образце.

3. Изучить схему постановки и учесть реакцию определения титра комплемента в сыворотке крови.

Готовят разведения исследуемой сыворотки 1:10, 1:15, 1:20, 1:25, 1:30, 1:35 и 1:40. К 0,2 мл каждого разведения сыворотки добавляют по 0,4 мл гемолитической системы (смесь равных объемов 3% суспензии эритроцитов барана в изотоническом растворе хлорида натрия и гемолитической сыворотки кролика в тройном титре после их инкубации в течение 30 минут). Готовят контроли гемолитической системы, включающий компоненты гемолитической системы и изотонический раствор хлорида натрия, и контроль комплемента, содержащий гемолитическую систему и стандартный препарат комплемента. После инкубации пробирок 30 минут при 37ºС определяют титр комплемента  наибольшее его разведение, которое вызывает полный лизис эритроцитов в гемолитической системе.

4. Разобрать предложенные биопрепараты, распределить их по группам, охарактеризовать состав, метод получения и цель применения.

5. Изучить и выписать названия вакцин, схемы вакцинации и ревакцинации для вакцин, применяемых согласно национальному календарю иммунизации и используемых по эпидемиологическим показаниям согласно таблице.

IV. Примеры ситуационных задач

Задача 1

При учете реакции Манчини получены следующие результаты: диаметр зоны иммунодиффузии контрольной лунки, в которую была внесена стандартная сыворотка, содержащая IgM в концентрации 1 г/л, равен 5 мм, диаметр зоны иммунодиффузии одной из опытных лунок равна 15 мм. Рассчитать, какая концентрация IgM содержится в исследуемой сыворотке. Оцените полученный результат и интерпретируйте его в контексте инфекционной патологии.

Задача 2

Реакция иммунного гемолиза была использована для предварительного этапа РСК. В пробирках с разведениями комплемента 1:10, 1:15, 1:20 наблюдается гемолиз, с разведениями 1:25, 1:30, 1:35, 1:40  отсутствие гемолиза. В пробирке с контролем гемолитической системы гемолиз отсутствует, в пробирке с контролем комплемента  гемолиз. Дайте оценку специфичности реакции. Определите титр и рабочую дозу комплемента.

Задача 3

Назовите какие группы биопрепаратов могут быть использованы для профилактики инфекционных заболеваний лицам, контактировавшим с уже заболевшими людьми. Объясните механизм их действия.

Таблица 34. Прививочный календарь России с учетом вакцинации против гепатита В

Прививки против	Сроки вакцинации		Сроки ревакцинация				Примечание
			Первая		Вторая	Последующие
Гепатита В, дрожжевая, рекомбинантная «Комбитех ЛТД»  Россия, Энджерикс-В  «СмитКляин Битчем», H-B-Vax П «Мерк Шарп и Доум»	Первая доза  в первые 12 часов, вторая в месяц и третья  в 6 мес. (вместе с АКДС-3 и ОПВ-3).		через 7 лет				Дети от матерей  носителей вируса и больных гепатитом В вакцинируются в первые 24 часа жизни по схеме: 0, 1, 2 и 12 мес. жизни
Туберкулеза (БЦЖ)	35 день		7 лет		1112 лет	1617, 22-23, 27-30 лет	Ревакцинацию проводят только туберкулинонега-тивньм лицам
Полиомиелита (ОПВ)	с 3-х мес. трехкратно с интервалом 45 дней		от 1 до 2 лет двукратно		от 2 до 3 лет двукратно	7-8 и 15-16 лет однократно	Рекомендуется проводить одновременно с АКДС (АДС)
Коклюша, дифтерии, столбняка (АКДС)	с 3-х мес. трехкратно с интервалом 45 дней		через 1218 мес. после законченной вакцинации				Вакцинация может проводиться одновременно с вакцинацией против полиомиелита
Дифтерии и столбняка (АДС — анатоксин)	с 3-х мес. двукратно с интервалом 45 дней		через 912 мес. после законченной вакцинации				Вакцинация может проводиться одновременно с вакцинацией против полиомиелита
Дифтерии и столбняка (АДС-М  анатоксин)					67 лет перед школой	1617 лет, далее каждые 10 лет	Ревакцинация проводится однократно. Взрослым лицам ревакцинация проводится однократно каждые 10 лет
Дифтерии (АДМ  анатоксин)	Примечание: При иммунизации детей по индивидуальным графикам, интервал между первой и второй ревакцинацией должен быть не менее 4 лет, а между последующими ревакцинациями он не должен превышать 5 лет					1112 лет	Ревакцинация проводится однократно
Кори (ЖКВ)	с 12 мес.	67 лет перед школой
Эпидемического паротита (ЖПВ)	с 12 мес.