3) Гжх (газожидкостная хроматография)

Газо-жидкостная хроматография  используется как косвенный метод диагностики дисбактериоза кишекника, основанный на определении в фекалиях летучих жирных кислот

Газовая хроматография  — разновидность хроматографии, метод разделения летучих компонентов, при котором подвижной фазой служит инертный газ (газ-носитель), протекающий через неподвижную фазу с большой поверхностью. В качестве подвижной фазы используют водород, гелий, азот, аргон, углекислый газ. Газ-носитель не реагирует с неподвижной фазой и разделяемыми веществами. То есть газо-жидкостная хроматография — разделение газовой смеси вследствие различной растворимости компонентов пробы в жидкости или различной стабильности образующихся комплексов. Неподвижной фазой служит жидкость, нанесенная на инертный носитель, подвижной — газ.

Это достаточно информативный метод, хотя он и используется для индикации лишь некоторых анаэробных бактерий. Данный метод основан на установлении спектра и уровня летучих жирных кислот, которые продуцируются смесью микроорганизмов. Также определяется концентрация индола, крезола, фенола, скатола. ГЖХ — это не строго специфичный метод, так как бактерии, которые относятся к разным видам или группам могут иметь похожие хромотограммы летучих кислот по качественным и количественным параметрам. Например, похожие хромотограммы имеют штаммы кишечной палочки и стафилококков.

Преимущества Газо-жидкостной хроматографии (ГЖХ):

• Быстро выполняется исследование. Время исследование всего 30-40 минут.

• Информативность: определение возбудителя по спектру до вида и рода.

• Очень высокая чувствительность.

• Возможность исследовать любые биологические среды организма.

• Возможность контролировать эффективность лечения.

Критерии биохимической активности микроорганизмов записываются после исследования в“микробный метаболический паспорт фекалий”. В таблице (паспорте) описываются показатели взаимосвязи в микроценозе популяции в целом; показатели межгрупповых взаимосвязей в микроценозе; определения нормы для данных показателей. В паспорте вы сможете встретить профили ЛЖК, ДКК, ФС.

• 1. Профиль ЛЖК — это доля летучих жирных кислот в общем пуле. Данный профиль характеризует биохимическую активность анаэробов, которые являются защитниками флоры толстого кишечника и некоторых анаэробов в отношении углеводов.

• 2. Профиль ДКК (дикарбоновых кислот) — это соотношение содержания в кале здорового человека щавелеуксусной, молочной и альфакетоглутановой кислот. Данный профиль характеризует активность и аэробных, и анаэробных бактерий в отношении углеводов.

• 3. Профиль ФС (фенольных соединений). Данный профиль показывает соотношения содержания в кале здоровых людей индола, скатола и n-крезола. Профиль характеризует биохимическую активность микрофлоры толстого отдела кишечника в отношении ароматических аминокислот.

Интересно, что при дисбактериозе уменьшается в процентном соотношении выделение с фекалиями уксусной, и увеличивается выделение валериановой, изовалериановой, капроновой и изомасляной кислот при общем снижении легких жирных кислот.