IV. Примеры ситуационных задач

Ситуационная задача № 1:

При заражении клеток культуры ткани материалом из носоглотки через 1-2 суток обнаружено образование синцития. Идентифицировать вируспоможет реакция:

1. Иммунофлюоресценции

2. Нейтрализации

3. Связывания комплемента

4. Агглютинации

5. Гемагглютинации

Тема 3: Бактериофагия.

Цель занятия: знать — строение бактериофагов, этапы взаимодействия вирулентного и умеренного фага с бактериальной клеткой, цели использования бактериофагов в медицине и генетике.

уметь: учитывать результаты: фаголизабельности по методу Отто, определения титра бактериофага по методу Грациа, определения фаготипа и фагогруппы стафилококка

Задание на дом:

Ι. Вопросы для самоподготовки:

1. Особенности строения бактериофагов

2. Репродукция и этапы взаимодействия вирулентного бактериофага с бактерией

3. Репродукция и этапы взаимодействия умеренного бактериофага с бактерией

4. Применение бактериофагов в медицине и генной инженерии

II.Базовый текст

1. Особенности строения бактериофагов

Бактериофаги (от бактерия и греч. phagos — пожирающий) — вирусы бактерий, специфически проникающие в бактерии и паразитирующие в них вплоть до гибели (лизиса) бактериальные клетки. В 1915 г. французский микробиолог Д'Эррель, наблюдал лизис бактериальной культуры дизентерии. Д'Эррель сделал заключение, что открытый им литический агент является вирусом бактерий, и назвал его «бактериофагом»- пожирателем бактерий.

Бактериофаги широко распространены в природе — их выделяют из воды, почвы, организмов различных животных и человека. Они выявлены у большинства бактерий, а также у других микроорганизмов, например у грибов. Поэтому бактериофаги в широком смысле слова часто называют просто фагами.

Принципы классификации бактериофагов аналогичны подходам к общепринятой систематике вирусов. В основу классификации положены антигенная структура, морфологические свойства, спектр действия, тип взаимодействия с клеткой и др. Бактериофаги принято обозначать буквами латинского, греческого или русского алфавита, часто с цифровым индексом перед которыми стоит название вида бактерий (например, фаги E.coli T2). Для обозначения группы родственных фагов используют родовые и видовые названия микробов, из которых выделены соответствующие фаги: колифаги, стафилофаги, актинофаги, микофаги и т.д. Вирусы, вызывающие гибель инфицированных бактерий, известны как литические бактериофаги. Размножение и выход дочерних популяций вируса из бактерии сопровождается ее гибелью и разрушением (лизисом). По спектру действия выделяют типовые фаги (Т-фаги), лизирующие бактерии отдельных типов внутри вида, моновалентные фаги, лизирующие бактерии одного вида, и поливалентные фаги, лизирующие бактерии нескольких видов.

Фаги более устойчивы к действию физических и химических факторов, чем многие вирусы человека. Большинство из них инактивируются при температуре свыше 65°- 70°С. Переносят замораживание и длительно сохраняются при низких температурах и высушивании. Ультрафиолетовые лучи и ионизирующая радиация так­же вызывают инактивирующий эффект, а в низких дозах — мутации.

Строение бактериофагов изучают с помощью электронной микроскопии. Большинство фагов относится к ДНК-содержащим вирусам с нуклеокапсидом, организованным по принципу смешанной симметрии. Размер бактериофагов  колеблется от 20 до 800 нм (у нитевидных форм). Бактериофаги (фаги) содержат ДНК или РНК. Наиболее изучены крупные бактериофаги, имеющие форму сперматозоида и сокращающийся чехол отростка, например, колифаги Т2, Т4, Т6. Они достигают длины до 200 нм и состоят из хвостового отростка, головки в форме многоранника, содержащей нуклеиновую кислоту. У фагов, имеющих форму сперматозоида, одна молекула двунитевой суперспирализованной ДНК находится внутри головки и защищена капсидом. Капсид головки и чехол хвостового отростка бактериофага состоят из полипептидных субъединиц, уложенных по икосаэдрическому (головка) или спиральному (отросток) типу симметрии. Хвостовой отросток имеет внутри трубку (стержень), сообщающуюся с головкой, а снаружи — чехол отростка, способный к сокращению, наподобие мышцы и заканчивающийся шестиугольной базальной пластинкой с шипами, от которых отходят фибриллы (нити).

В зависимости от формы и структурной организации фаги подразделяют на несколько морфологических типов (таблица 40).

Таблица 40. Морфологические типы бактериофагов

I тип	нитевидные ДНК-содержащие фаги, которые лизируют клетки бактерий, несущих F-плазмиду
II тип	Представлены головкой и рудиментом хвоста; геном большинства представлен молекулой РНК, за исключением фага jc-174 с однонитевой геномной ДНК
III тип	это фаги ТЗ, Т7 с коротким отростком
IV тип	фаги с несокращающимся чехлом отростка и двунитевой ДНК (Т1, Т5 и др.)
V тип	ДНК-содержащие фаги с сокращающимся чехлом отростка, заканчивающимся базальной пластинкой (Т2, Т4, Т6)