Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
практикум по биохимии Часть3.doc
Скачиваний:
13
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
7 Мб
Скачать
☆

Реакция с фелинговой жидкостью

Нередко пользуются так называемой фелинговой жидкостью, в которой ион меди в степени окисления +2 находится в виде комплексного соединения с тартратами. Механизм реакции редуцирующих углеводов с фелинговой жидкостью такой же, как и в реакции Троммера. Преимуществом фелинговой жидкости является то, что медь при избытке реактива не выпадает в виде оксида меди (II).

Реакция Ниландера

Для обнаружения редуцирующих сахаров часто применяют также соли висмута. Соли висмута особенно удобны для обнаружения сахара в моче, так как в отличие от солей меди они не восстанавливаются мочевой кислотой.

Bi(OH)2NO3 + NaOH  Bi(OH)3 + NaNO3

Реакция Барфеда (позволяет отличать восстанавливающие дисахариды от моносахаридов)

Проба Барфеда отличается от всех предыдущих реакций восстановления того или иного реагента тем, что окисление сахара протекает не в щелочной среде, а в среде, близкой к нейтральной. В этих условиях редуцирующие дисахариды в противоположность моносахаридам практически не окисляются, что позволяет отличить их от моносахаридов.

Реактив Барфеда представляет собой подкисленный раствор ацетата меди (II) (Данная соль в водном растворе подвергается гидролизу с образованием Cu(OH)2 и СH3COOH). Моносахариды восстанавливают гидроксид меди (II) до оксида меди (I), дисахариды реакции не дают.

Необходимо отметить, что следует избегать длительного кипячения, так как дисахариды в кислой среде могут гидролизоваться до моносахаридов, в результате чего реакция Барфеда станет положительной.

Метиленовая проба

Данная реакция представляет собой пробу на восстанавливающие дисахариды с метиламинохлоридом (CH3–NH2HCl). В присутствии восстанавливающих дисахаридов раствор, который сначала (после подщелачивания) приобрел желтый цвет, становится ярко-карминовым. Сахароза и другие нередуцирующие дисахариды реакцию не дают. В присутствии моносахаридов окрашивание остается желтым или переходит в оранжевое.

Качественные реакции на углеводы р еакция Толленса (проба с нафторезорцином)

Данная реакция является одной из наиболее специфичных и чувствительных на углеводы. Отличительной ее особенностью является зависимость окраски раствора от природы углевода. Например, глюкоза, манноза, галактоза дают сине-зеленую окраску, рамноза – фиолетовую, арабиноза и ксилоза – темно-синюю, уроновые кислоты, для обнаружения которых часто применяется эта реакция, окрашивают эфирную фракцию в фиолетовый цвет.

Реакция на углеводы с -нафтолом

Чувствительной реакцией на углеводы является реакция с -нафтолом.

Данная проба основана на том, что при взаимодействии с концентрированной серной кислотой углеводы образуют фурфурол [номенклатурн. – фурфураль] или 5‑(оксиметил)-фурфурол, которые конденсируются с двумя молекулами сульфированного -нафтола.

Получающийся при этом триарилметановый хромоген затем окисляется в серной кислоте, образуя окрашенное хиноидное соединение.

Серная кислота, добавляемая в реакционную смесь (делать это нужно осторожно, по стенке пробирки, без встряхивания), опускается на дно пробирки и на границе двух жидкостей образуется кольцо красно-фиолетового цвета.

Р еакция на сахара с антроном

Фурфурол или 5-(оксиметил)фурфурол, образующиеся при действии серной кислоты на сахара, конденсируясь с антроном, дают соединения ксантенового типа от синего до зеленого цвета.

Конденсация происходит за счет альдегидной группы фурфурола или 5-(оксиметил)-фурфурола и активной метиленовой группы антрона.

Антрон дает реакцию только с восстанавливающими сахарами, но нет значительных различий между моносахаридами с различной эпимерией и их соединениями. Так, галактоза дает лишь несколько более слабое окрашивание, чем глюкоза.

Недостатком метода является то, что с антроном могут давать цветную реакцию и полисахариды (например, гликоген). При сильном разведении, эта реакция дает завышенные результаты определения глюкозы в тканях. Развитие окраски с антроном также может быть усилено присутствием галоидов в среде.