- •Методичнi вказівки з мiкробiологiчної дiагностики менiнгококової iнфекцiї та гнійних бактерiальних менiнгiтiв вступ
- •1. Показання до лабораторного бактеріологічного обстеження.
- •2.Характеристика основних збудників менінгітів
- •2.1.Мікроорганізми роду Neisseriа
- •2.2.Мікроорганізми роду Haemophilus
- •2.3.Пневмококи
- •3. Взяття і доставка матеріалу для лабораторного дослідження
- •Первинні середовища, необхідні для первинного посіву матеріалу
- •4. Порядок проведення досліджень
- •Властивості основних збудників гбм, якi враховуються через 24 години вiд початку бактерiологiчного дослiдження ліквору або крові
- •Диференцiальні властивостi стрептококiв та ентерококів якi викликають менiнгiт
- •Біотипування h.Influenzae
- •5.Методи бактеріологічного та біохімічного вивчення менінгококів, пневмококів та гемофілів
- •5.1.Створення пiдвищеної концентрацiї вуглекислого газу для культивування посiвiв
- •5.2.Проба на каталазу
- •5.3.Проба на оксидазу
- •5.4.Визначення сахаролітичної активності
- •5.8.Застосування дискiв з жовчу для iдентифiкацiї збудників менінгітів
- •5.9.Оптохіновий тест
- •5.10.Визначення ферменту уреази
- •5.11.Визначення індолоутворення
- •5.12.Визначення наявності орнітиндекарбоксилази
- •5.13.Визначення наявності β-галактозидази у штамів h.Influenzae
- •6.Методи серологiчної дІагностики та типування збудників гнійних бактеріальних менінгітів
- •6.1.Реакція латекс-аглютинації.
- •6.2.Реакцiя аглютинацiї на склi
- •Реакцiя аглютинацiї в полiстиролових панелях
- •7. Визначення чутливості до антибіотиків
- •8. Термiни видачi вiдповiдi та її формулювання
- •10. Зберiгання та транспортування видiлених культур
- •11.Організаційно-методична робота бактеріологічних лабораторій
- •12.Обов’язки спеціалістів лабораторій, що проводять дослідження з метою діагностики гнійних бактеріальних менінгітів.
- •13. Штами для контролю якості поживних середовищ та постановки тестів ідентифікації
- •Зони інгібіції тест-штамів на середовищі Мюллер-Хінтон.
- •14. Вимоги безпеки
- •Культуральнi та бiохiмiчнi властивостi нейсерiй I m.(b.) catarrhalis
- •Приготування поживних середовищ та індикаторів
- •1.Сироватковий агар
- •1.1.Сироватковий агар з ристомiцином
- •1.2.Сироватковий агар з лiнкомiцином
- •2.Кров'яний агар
- •3."Шоколадний" агар (кип’ячений)
- •3.1.Шоколадний бульйон
- •3.2.Середовище Левінталя
- •4.Жовчно - сироватковий агар
- •5. Середовища з вуглеводами для визначення сахаролітичних властивостей нейсерій
- •6.Середовище для визначення продукції полісахаридів на агарі з 5% сахарози
- •7.Середовище для тесту відновлення нітратів в нітрити
- •8.Нтм агар (Середовище для тестування гемофілів)
- •9.Реактиви для визначення ферменту уреази за методом Заксе Готується 2 реактиви: а і в.
- •10.Реактив Грісса
- •11.Реактив Касаткіна
- •12.Індикатор феноловий червоний (фенолрот)
- •13.Водний розчин Люголя
- •Застосування реакцiї непрямої гемаглютинацiї для виявлення протименiнгококових антитiл
- •Показання до проведення серологiчних дослiджень
- •2. Реакцiя непрямої гемаглютинацiї (рнга) з еритроцитарними менiнгококовими дiагностикумами
- •Забiр кровi
- •Рекомендованi терміни, кратнiсть обстеження та трактування результатiв серологiчних досліджень
- •4.1. Рнга при генералiзованих формах менiнгококової iнфекцiї
- •4.1.1. Рнга з дiагностикумами а I с
- •4.1.2. Рнга з дiагностикумом серогрупи в
- •4.1.3.Групова специфiчнiсть рнга
- •4.2. Рнга при локалiзованих формах менiнгококової
- •Iнфекцiї (назофарингiт I бактерiоносiйство)
- •4.3.Рнга при iмуно-епiдемiологiчних дослiдженнях
- •4.4. Застосування рнга для оцiнки ефективностi вакцинопрофiлактики менiнгококової iнфекцiї
Зони інгібіції тест-штамів на середовищі Мюллер-Хінтон.
Тест-диски |
Зони інгібіції тест-штамів, мм |
||
Escherichia coli
ATCC 25922 |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 |
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 |
|
Карбеніцилін 100 мкг |
23-29 |
- |
18-24 |
Гентаміцин 10 мкг |
19-26 |
19-27 |
16-21 |
Тетрациклін 30 мкг |
18-25 |
19-28 |
- |
Поліміксин В 300 Од |
12-16 |
7-13 |
- |
Ампіцилін 10 мкг |
16-22 |
24-35 |
- |
Сульфаметоксазол 1,25 мкг + Триметаприм 23,75 мкг |
24-32 |
24-32 |
- |
14. Вимоги безпеки
Мікробіологічні дослідження з метою діагностики та профілактики менінгококової інфекції та гнійних бактеріальних менінгітів проводять з дотриманням вимог біологічної безпеки відповідно до ДСП 9.9.5. -080 –2002 “Правила влаштування і безпеки роботи в лабораторіях (відділах, відділеннях) мікробіологічного профілю”
Додаток 1
Культуральнi та бiохiмiчнi властивостi нейсерiй I m.(b.) catarrhalis
Назва виду |
Ставлення до умов культивування |
Залежність росту від СО2 при первин- ному виді- ленні |
Утворення пігменту |
Біохімічна активність |
Утворення полісахариду на агарі з 5% сахарози |
Редукція* нітратів |
Затримка росту навколо дисків з жовчу
|
||||||
глю-коза |
маль-тоза |
саха-роза |
лак-тоза |
фрук-тоза |
|||||||||
Ріст на |
|||||||||||||
сироват- ковому агарі |
безсиро- ватково му агарі |
агарі з 0,20% жовчі |
|||||||||||
N. gonorrhoeae |
+ |
- |
- |
+ |
- |
К |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
N. meningitidis |
+ |
- |
- |
+ |
- |
К |
К |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
N. subflava |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
К |
К |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
N. perflava |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
К |
К |
К |
- |
К |
+ |
- |
- |
N. flava |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
К |
К |
- |
- |
К |
- |
- |
- |
N. sicca |
+ |
+(-) |
+(-) |
- |
+(-) |
К |
К |
К |
- |
К |
+ |
- |
- |
N. mucosa |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
К |
К |
К |
- |
К |
+ |
+ |
- |
N. flavescens |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
N. lactamica |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
К |
К |
- |
К |
- |
- |
- |
- |
N. cinerea |
+ |
+ |
+ |
- |
+(-) |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
N. elongata |
+ |
+ |
+ |
- |
+(-) |
+(-) |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
M. (B.) catarrhalis |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
Позначення: К - утворення кислоти;
(-) - рiдко
* - тест використовують як додатковий при диференцiацiї непатогенних нейсерiй
-
Додаток 2