Дія ферментів

Дія амілази

Принцип реакції. Амілаза є ферментом, який каталізує гідроліз α-глюкозидного зв'язку α-І-4-крохмалю та глікогену до проміжних продуктів-декстринів. Крохмаль утворює з йодом сполуки синього кольору, амілодекстрин – фіолетового, еритродекстрин – червоно-бурого, ахродекстрин – жовтого.

Дія ліпази

Принцип реакції. Ліпаза каталізує гідроліз тригліцеролів на гліцерол та жирні кислоти, кількість яких можна визначити за зміною рН середовища:

Дія уреази

Принцип реакції. Уреаза прискорює розщеплення сечовини з утворенням CO₂ і NH₃. За зміною рН у лужну зону середовища завдяки утворенню NH₃ судять про дію уреази:

Дія пероксидази

Принцип реакції. Пероксидаза прискорює реакцію окислення органічних речовин під впливом H₂O₂:

Бензидин під дією пероксидази окислюється з утворенням сполуки оранжевого кольору. За наявності пероксидази (екстракт хрону) пероксид водню окислює пірогалол із утворенням пурпуро-галіну – сполуки червоного кольору:

Дія тирозинази

Принцип реакції. Тирозиназа каталізує перетворення тирозину в меланін (пігмент чорного кольору) через забарвлені в червоний колір проміжні продукти – 3,4-діоксифенілаланін (ДОФА), який внаслідок окислення та циклізації перетворюється на 2,3-дигідро-5,6-діокси-р-індолілкарбонову кислоту (І). Сполука (І), окислюючись, перетворюється на 2,3-дигідро-5,6-дикето-р-індолілкарбонову кислоту (II) – пігмент червоного кольору:

Дія альдегідоксидази

Принцип реакції. Альдегідоксидаза прискорює дегідрування різних аліфатичних і ароматичних альдегідів (ацетальдегіду, формальдегіду, саліцилового альдегіду тощо) В аеробних умовах (за наявності газоподібного кисню) фермент каталізує реакцію дегідрування шляхом перенесення водню на кисень з утворенням пероксиду водню:

За наявності метиленового синього мурашина кислота є акцептором, на який альдегідоксидаза переносить водень із окислюваного альдегіду:

В аеробних умовах дію альдегідоксидази можна виявити за знебарвленням метиленового синього.

Дія сукцинатдегідрогенази

Принцип реакції. Сукцинатдегідрогеназа (дегідрогеназа янтарної кислоти) каталізує окислення янтарної кислоти в фумарову. Коферментом цього ферменту є ФАД (флавінаденіндинуклеотид):

Як акцептор можна використати 2,6-дихлорфеноліндофенол або його натрієву сіль:

У водному розчині окислена форма натрієвої солі 2,6-дихлорфеноліндофенолу забарвлена в синій колір, відновлена форма – безбарвна. Активність сукцинатдегідрогенази визначається за зміною інтенсивності забарвлення розчину натрієвої солі 2,6-дихлорфе-ноліндофенолу.

Дія сахарази

Принцип реакції. Сахараза каталізує гідроліз сахарози до глюкози та фруктози:

С₁₂H₂₂O₁₁ + H₂O  2C₆H₁₂O₆

Моносахариди, які утворюються, визначають реакцією Фелінга. Сахароза не містить вільної альдегідної групи й тому не має відновних властивостей.

Вплив температури на активність амілази слини

Принцип реакції. Швидкість розщеплення крохмалю під дією амілази залежить від температури й визначається за інтенсивністю забарвлення розчину крохмалю або продуктів його перетворення з йодом.

Вплив температури на активність уреази

Принцип реакції. За різних значень температури уреаза неоднаково гідролізує сечовину, внаслідок чого утворюється різна кількість NH₃, що зумовлює неоднакову інтенсивність забарвлення його розчинів за наявності фенолфталеїну.