- •Передмова
- •Тема: напрями та методи дослідження в біохімії Основні напрямки розвитку біохімічних досліджень
- •Матеріали для біохімічних досліджень
- •Методи виділення речовин з біологічного матеріалу
- •Методи кількісного аналізу та їх класифікація
- •Тема : рН розчинів і біологічних рідин. Буферні розчини
- •Залежність між концентрацією водневих йонів і рН середовища
- •Значення рН фізіологічних рідин
- •Молекулярно-кінетичні властивості колоїдних систем
- •Тема : електрокінетичні властивості колоїдів
- •Дифузія і осмотичний тиск
- •Швидкість осідання у воді частинок різної величини
- •Ультрацентрифугування
- •Оптичні властивості колоїдних систем
- •Ультрамікроскопія і електронна мікроскопія
- •Електрокінетичні явища
- •Стійкість і коагуляція колоїдних систем
- •Фактори стійкості дисперсних систем
- •Теорії стійкості і коагуляції
- •Коагуляція гідрофобних золів
- •Коагуляція під дією електролітів
- •Біологічне значення коагуляції
- •Компенсаційний діаліз і вівідіаліз
- •Ультрафільтрація
- •Тема: поверхневі явища і адсорбція
- •Поверхневий натяг сироватки крові при 20с (293 k)
- •Явище адсорбці
- •Вибіркова адсорбція і її біологічне значення
- •Хроматографія
- •Тема: розчини високомолекулярних сполук
- •Класифікація і структура високомолекулярних сполук
- •Властивості розчинів високомолекулярних сполук
- •Фактори стійкості розчинів вмс
- •Колоїдний захист
- •В’язкість розчинів вмс
- •Поліелектроліти. Особливості розчинів білків
- •І основні властивості:
- •Ізоелектричні точки деяких білків
- •Біологічне значення процесів набрякання і старіння драглів
- •Тема: амінокислоти та білки
- •Класифікація амінокислот за будовою радикала і функціональних груп
- •Амінокислоти, що постійно зустрічаються в складі білків
- •Визначення окремих амінокислот хроматографічними методами Метод розподільчої (радіальної) хроматографії на папері
- •Розділення суміші амінокислот методом розподільчої хроматографії в тонкому шарі целюлози
- •Біологічне значення амінокислот
- •Біологічне значення пептидів
- •Роль білків в організмі тварини
- •Методи поділу білків і пептидів
- •Фізико-хімічні властивості білків
- •Переварювання білків у шлунково-кишковому тракті. Всмоктування амінокислот. Регуляція і порушення переварювання і всмоктування
- •Декарбоксилування амінокислот у тканинах. Гниття амінокислот у товстому кишечнику
- •Біологічна роль амінів
- •Обмін аміаку в організмі. Біосинтез сечовини
- •Біосинтез сечовини в печінці
- •Тема: нуклеїнові кислоти
- •Тема: Вітаміни
- •Подібність і відмінність вітамінів і гормонів
- •Гормони. Гормональна регуляція метаболізму в організмі тварини
- •IV. Вплив на мінеральний обмін:
- •I. Вплив на обмін вуглеводів
- •Якісні реакції на гормони щитовидної залози
- •Реакції на гормон підшлункової залози (інсулін)
- •Тема: ферменти
- •Дія ферментів
- •Вплив реакції середовища на активність ферментів
- •Вплив активаторів та інгібіторів на активність ферментів
- •Специфічність ферментів
- •Групова специфічність дії сахарази
- •Визначення активності ферментів
- •Тема: біоенергетика. Енергетичний обмін
- •Цикл лимонної кислоти – цтк – цикл Кребса
- •Біохімічні функції циклу Кребса:
- •Енергетична роль цтк
- •Регуляція циклу Кребса
- •Клінічне значення визначення пірувату
- •Роль кисню в метаболізмі
- •Токсичність кисню
- •Макроергічні молекули
- •Тема: вуглеводи
- •Цикл трикарбонових кислот Кребса (цтк)
- •Співвідношення між аеробним і анаеробним процесами перетворення вуглеводів в організмі
- •Якісні реакції на вуглеводи
- •Пентози
- •Дисахариди
- •Кількісне визначення та обмін вуглеводів
- •Обмін вуглеводів
- •Тема: ліпіди
- •Фізико-хімічні властивості ліпідів
- •Визначення хімічних параметрів жирів
- •Якісні реакції на ліпіди
- •Енерговитрати людини при різних видах діяльності
- •Енерговитрати різних вікових груп
- •Перелік індикаторів і характеристика деяких їх властивостей
- •Водневий показник біологічних рідин
- •Ізоелектричні точки деяких білків і ферментів (рН)
- •Rf окремих амінокислот для ідентифікації їх при хроматографії на папері (в бутилово-оцтово-водній суміші 4:1:5* або 40:15:5*)
- •Молекулярна маса деяких білків організма людини
- •Замінні і незамінні амінокислоти для організму людини
- •Відносна щільність та концентрація водних розчинів їдкого натру
- •Метали, активатори ряду ферментів в організмі людини
- •Відносна щільність та концентрація водних розчинів азотної кислоти
- •Відносна щільність та концентрація водних розчинів соляної кислоти
Значення рН фізіологічних рідин
Рідини (свині) |
Ймовірне значення рН |
Можливі коливання |
Кров (плазма) Шлунковий сік (пристінковий) Панкреатичний сік Кишковий сік Сеча Слина Піт Міхурцева жовч Печінкова жовч |
7,36 1,05 7,5 6,51 5,80 6,4 5,4 6,2 7,8 |
7,35-7,45 0,90-1,50 7,00-8,00 5,07-7,07 5,00-6,50 6,20-7,00 4,5-7,5 5,6-7,2 7,4-8,0 |
Йонам гідрогену і гідроксильним йонам належить особливе місце серед інших йонів завдяки різко вираженому впливові їх на фізико-хімічні властивості речовин і перебіг багатьох хімічних реакцій. Багато процесів у живих організмах відбувається при певному значенні рН. Наприклад, шлунковий сік людини має рН 1,0-1,5.
Усі ферментні процеси відбуваються при певних значеннях рН. Так, цукраза дріжджів проявляє максимум дії при рН 5, амілаза слини – при рН 6,8.
З наведених прикладів видно, що рН внутрішніх середовищ організму, які є водними розчинами, впливає на життєдіяльність клітин, тканин, органів і організму в цілому. Значення рН біологічних рідин регулюється фізіологічними механізмами і буферними системами.
Буферною системою називають протолітичну систему, що володіє властивістю стійко утримувати рН середовище при добавленні невеликих кількостей сильної кислоти або лугу, або при розведенні.
Протолітичні буферні системи складаються із слабк
ої кислоти і надлишку спряженої з нею основи або із слабкої основи і надлишку спряженої з ним кислоти.
Буферні системи – двохкомпонентні системи, що складаються із слабкого електроліту, який володіє резервною кислотністю або лужністю, і сильного електроліту, що має одноіменний іон зі слабким електролітом і який утримує слабкий електроліт від дисоціації.
В залежності від складу розрізняють:
(І тип) |
(ІІ тип) |
Кислотні буфери |
Основні буфери |
наприклад, Н2СО3/ NаНСО3 |
NН4ОН/ NН4Cl |
бікарбонатний буфер |
амонійний(аміачний) буфер |
рН в буферних системах розраховують по формулі Гендерсона-Гассельбаха:
рН = рК + lg |
[сіль] |
[кислота] |
Буферна ємність – кількість молярних еквівалентних мас сильної кислоти або сильної основи, які треба добавити до 1л буферного розчину, щоб зсунути рН на 1:
-
В =
С
РН1 – рН0
Де Варт. крові = 25,3 ммоль/л, Ввен. крові = 24,3 ммоль/л.
Кислотно-основний стан (КОС), або кислотно-лужна рівновага (КЛР) в організмі людини і тварини характеризується трьома показниками: 1)лужними резервами ВЕ = 2,3ммоль/л; парціальний тиск вуглекислого газу (РСО2) = 36 – 44 мм рт. ст; 3) рН = 7,36 – 7,42.
ВЕ – це кількість основи, яку потрібно добавити або нейтралізувати, щоб рН крові зберігся в нормі. Позитивне значення ВЕ вказує на надлишок основи або дефіцит кислот; від’ємне значення ВЕ вказує на дефіцит основи або надлишок кислот.
Межа життя – 6,8 – 8,0, так як при рН 6,8 наступає ізоелектрична точка для -глобулінів, які при цьому втрачають заряд і наступає і проходить коагуляція, що призводить до утворення тромбів в судинах (як наслідок – інфаркт, інсульт).
У процесі обміну речовин утворюється велика кількість кислих продуктів. Так, в організмі людини щодобово утворюється 20-30 л 1 н кислоти, а у жуйних у передшлунках утворюється до 5 кг кислот за добу. Збереження сталості кислотності середовища організму забезпечується, перш за все, наявністю буферних систем.
Водневий показник різних біологічних рідин коливається від 1,0 до 9,0, крові – 7,2-7,95. При деяких захворюваннях реакція крові зміщується в кислу (при виразці шлунка і дванадцятипалої кишки) або в лужну (при пневмонії) зону. Зміщення кислотності середовища крові у кислу зону називається ацидозом, в лужну – алкалозом. При ацидозі збільшується вміст аніонів в організмі і рН знижується на 0,2-0,5. Це призводить до коматозного стану і загибелі тварин. При алкалозі в крові зростає концентрація катіонів і збільшується числове значення рН. Внаслідок цих змін настає смерть тварини.
У тваринному і людському організмах для підтримання сталості рН, перш за все крові, на гідрокарбонатний буфер припадає близько 7%, фосфатний – 1%, гемоглобіновий і оксигемоглобінів – 81%, білковий – 10% і на кислотний близько 1%. Гідрокарбонатна буферна система характеризується рівновагою молекул слабкої карбонатної кислоти і сіллю цієї ж кислоти. Гідрокарбонатна система – найсильний буфер плазми крові і позаклітинної рідини. Значення рН плазми залежить від співвідношення компонентів буферної системи, яке для
рН
= 7,4 становить
.
Функція гідрокарбонатної буферної системи спрямована на нейтралізацію кислих і лужних продуктів. У системі, якщо до неї надходять кислі продукти (наприклад HCl), відбуваються наступні процеси:
протоліз HCl + Н2О ⇄ Н3О+ + Cl–;
нейтралізація Н3О+ + НСО3– ⇄ Н2СО3 + Н2О
Таким чином, надлишкова концентрація гідроген-йонів нейтралізується завдяки їх взаємодії з гідрокарбонатними йонами. Надлишок карбонатної кислоти гідролізується карбоангідразою: Н2СО3 ⇄ СО2 + Н2О. Карбон (IV) оксид вилучається через легені і співвідношення концентрації кислоти і солі буферної системи знову стабілізується. При надходженні лужних продуктів у реакцію вступає кисла частина буферної системи:
Н2СО3 + ОН– ⇄ НСО3– + Н2О
У цьому випадку сильна основа замінюється йоном гідрокарбонату, надлишок якого виводиться нирками.
При
рН = 7,4 співвідношення компонентів
фосфатного
буфера
.
Фосфатна буферна система функціонує
так само, як гідрокарбонатна, і є
найсильним внутріклітинним буфером.
Білковий буфер – це система із протеїну (Рt) і його солі. Компоненти цього буфера можуть бути виражені як Рt–СООН – слабодисоційована білок-кислота і її сіль Рt–СООNa:
Рt–СООН ⇄ Рt–СОО– + Н+;
Рt–СООNa ⇄ Рt–СОО– + Na+
При збільшенні концентрації йонів Гідрогену сіль білка буде реагувати з кислотами, утворюючи слабкодисоційовану білок-кислоту:
Протоліз НСl+Н2О ⇄ Н3О++Cl–
Нейтралізація
При взаємодії з лугами в реакцію вступає білок-кислота і замість сильної основи утворюється слабколужна сіль:
Нейтралізація
Отже, білковий буфер діє аналогічно буферним системам, які розглянуті раніше.
Однак білки володіють також амфотерними властивостями, бо до складу молекул білка входять кислотні і основні групи. Тому навіть окрема білкова молекула проявляє буферну дію:
цвіттеріон
Протоліз НСl+Н2О ⇄ Н3О++Cl–
Нейтралізація
Аналогічно при додаванні сильної основи:
Нейтралізація
Найпотужнішою буферною системою крові є гемоглобінова і оксигемоглобінова. Буферні властивості гемоглобіну за механізмом дії ідентичні білковим буферним системам. Крім того, система оксигемоглобін-гемоглобін бере участь ще в одному механізмі підтримання сталості рН крові. Як відомо, венозна кров містить велику кількість карбонатної кислоти. Через легені вона видаляється у повітря; однак зміщення рН крові у лужний бік не проходить, тому що утворений оксигемоглобін є сильнішою кислотою, ніж гемоглобін. У тканинах, в артеріальній крові під дією низького парціального тиску Оксигену оксигемоглобін дисоціює і Оксиген дифундує в тканини. Утворений гемоглобін, однак, не обумовлює зміни рН крові у лужний бік, тому що в кров із тканин надходить карбонатна кислота.
Враховуючи, що сталість кислотно-основної рівноваги в організмі відіграє суттєву роль у проходженні всіх біохімічних процесів, у клініці при аналізі крові значна увага надається визначенню резервної лужності крові. Для цього у досліджуваній плазмі крові визначають кількість СО2, яка є у зв’язаному стані, головним чином, у формі гідрокарбонатів. Одержана величина, виражена в об’ємних процентах (кількість мл СО2 у 100 мл плазми), називається резервною лужністю крові. У нормі резервна лужність людини буває від 50-65 об% СО2; при ацидозі ж спостерігається зниження.
Таким чином, у підтриманні кислотно-основної рівноваги беруть участь декілька буферних систем (оксигемоглобінова, білкова, карбонатна, фосфатна), а також ряд органів – легені, нирки, шкіра, печінка.
