- •Общая микробиология Занятие №1. Тема: вводное занятие.
- •2. Микробиологическая лаборатория.
- •3. Методы микробиологических исследований.
- •1. Микроскопический (бактериоскопический, вирусоскопический).
- •2. Культуральный (бактериологический, вирусологический, микологический, протозоологический методы).
- •3. Биологический (экспериментальный).
- •4. Строение микроскопа. Особенности микроскопии в иммерсионной системе.
- •4. Иммунобиологический (серологический).
- •5. Аллергологический (аллергический).
- •6. Молекулярно-генетический (молекулярно-биологический).
- •Занятие №2. Тема: бактериоскопический метод исследования. Морфология микроорганизмов.
- •2. Морфология микроорганизмов.
- •1. Шаровидные формы бактерий (кокки)
- •2. Палочковидные формы бактерий
- •3. Извитые формы бактерий
- •3. Размеры микроорганизмов.
- •4. Полиморфизм микроорганизмов.
- •Занятие №3. Тема: бактериоскопический метод исследования. Микроскопия окрашенных и неокрашенных микроорганизмов.
- •2. Исследование микробов на подвижность.
- •1. Приготовление препарата «раздавленная капля»
- •2. Приготовление препарата «висячая капля»
- •3. Техника приготовления мазков.
- •1. Техника приготовления мазков-препаратов
- •2. Техника приготовления мазков-отпечатков
- •2. Метод пешкова (метод окраски спор)
- •Занятие №4. Тема: бактериологический метод исследования. Культивирование микроорганизмов.
- •2. Питательные среды и методы стерилизации.
- •2. Посев (пересев) бактерий в пробирку со скошенной плотной:
- •3. Посев (пересев) бактерий в пробирку уколом с плотной средой (агаром или желатином)
- •4. Посев (пересев) бактерий в чашку петри с плотной средой:
- •4. Культивирование аэробов.
- •I. Механические методы (механические методы разобщения микробных клеток):
- •1. Метод пастера.
- •2. Метод коха.
- •3. Метод дригальского.
- •4. Метод истощающего штриха.
- •II. Термический метод.
- •III. Химические методы.
- •1. Метод выделения микроорганизмов с помощью кислот, щелочей, спирта.
- •2. Метод обогащения.
- •3. Методы с применением антибиотиков.
- •IV. Биологический метод.
- •3. Метод культивирования в жидких средах под слоем масла.
- •4. Использование редуцирующих и окисляющих веществ.
- •5. Метод виньяля-виона.
- •6. Метод с использованием специальных приборов и аппаратов (анаэростат и эксикатор).
- •Занятие №5. Тема: бактериологический метод исследования. Биохимические свойства микроорганизмов.
- •3. Сахаролитические свойства микроорганизмов.
- •1. Обнаружение сахаролитической активности на средах гисса.
- •2. Обнаружение сахаролитической активности на других средах.
- •4. Протеолитические свойства микроорганизмов.
- •1. Обнаружение протеалитической активности на мясо-пептонной желатине (мпж).
- •2. Обнаружение протеолитической активности на молоке.
- •5. Редуцирующие свойства микроорганизмов.
- •1. Определение редуцирующих свойств на молоке с метиленовым синим.
- •2. Определение редуцирующих свойств на лакмусовом молоке.
- •6. Гемолитические свойства микроорганизмов.
- •1. Определение гемолитических свойств на кровяном агаре.
- •Занятие №6. Коллоквиум
- •Специальная микробиология Занятие № 7. Тема: микробиология молока и молочнокислых продуктов.
- •Микрофлора молока
- •1. Молочные стрептококки:
- •2. Молочные палочки:
- •Микрофлора молочнокислых продуктов
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочнокислых продуктов.
- •3. Обнаружение возбудителей туберкулеза и бруцеллеза в молоке и молочнокислых продуктах.
- •Занятие № 8. Тема: микробиология кормов.
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование кормов.
- •3. Обнаружение возбудителей ботулизма в кормах. Микотоксикозы.
- •4. Консервирование кормов.
- •Занятие № 9. Тема: микробиология мяса, кожевенно-мехового сырья и яиц.
- •Микрофлора мяса
- •Микрофлора кож-мех сырья
- •Микрофлора яиц
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование мяса, кожевенно-мехового сырья и яиц. Санитарно-микробиологическое исследование мяса
- •3. Обнаружение возбудителей сибирской язвы в мясе и кожевенно-меховом сырье.
2. Метод коха.
Сущность метода: основывается на механическом разведение микробных клеток с использованием питательных сред. Получают изолированные колонии, при пересеве которых на питательную среду получают чистую культуру одного вида микробов.
Посев проводят пипеткой Пастера или бактериологической петлей.
Подготовка к посеву: берут ряд пробирок с расплавленным или охлажденным до 45-50°С агаром по 9 мл в каждой пробирке.
Техника постановки:
Такая же, как и в методе Пастера, но вместо физ. раствора используют расплавленную (охлажденную) питательную среду. Содержимое каждой пробирки (начиная с первой) выливают в стерильные чашки Петри. После застывания среды в чашках, чашки с посевами ставят в термостат для культивирования.
3. Метод дригальского.
Сущность метода: он основан на механическом разделении микробных клеток на поверхности плотной питательной среды в чашках Петри. Каждая микробная клетка, фиксируясь в определенном месте, начинает размножаться, образуя колонию.
Посев проводят пипеткой Пастера, бактериологической петлей или шпателем Дригальского.
Подготовка к посеву: берут ряд из 4-х чашек Петри, с плотной питательной средой.
Техника постановки:
1) На поверхность плотной питательной среды 1-й чашки наносят каплю исследуемого материала.
2) С помощью стерильного шпателя (петли) эту каплю распределяют по всей питательной среде.
3) Этим же шпателем или петлей (не обжигая их) осуществляют посев во 2-ю, 3-ю и т.д. чашки Петри.
4) Посевы ставят в термостат и культивируют.
Как правило, в 1-й чашке появляется рост микробов в виде сплошного налета, в последующих чашках содержание микроорганизмов снижается и образуются изолированные колонии, из которых отсевом можно легко выделить чистую культуру.
4. Метод истощающего штриха.
Делается подобно методу Дригальского, но в целях экономии сред и посуды можно пользоваться 1 чашкой, разделив ее на сектора, и последовательно засевать их штрихом.
Посев проводят бактериологической петлей.
Подготовка к посеву: для посева по методу истощающего штриха используют одну чашку Петри, которую разделяют на сектора (до 5).
Техника постановки:
1) Для этого материал берут петлей и проводят ею ряд параллельных штрихов сначала по поверхности первого сектора, а затем последовательно оставшимися на петле клетками засевают все другие сектора. При каждом последующем штрихе происходит уменьшение количества засеваемых клеток.
2) Посевы ставят в термостат и культивируют.
II. Термический метод.
Сущность метода: при нагревании смеси микробов, спорообразующие – выживают, а не спорообразующие – гибнут. При последующих высевах на плотную среду выжившие споры бактерий прорастают, формируя колонии.
Применяют для выделения чистых культур споровых форм бактерий (бацилл, клостридий).
Техника постановки: перед посевом исследуемый материал прогревают на водяной бане при температуре 80 0С в течение 15-20 мин. Это нужно для того, чтобы остались только споровые микроорганизмы, устойчивые к нагреванию.