- •Общая микробиология Занятие №1. Тема: вводное занятие.
- •2. Микробиологическая лаборатория.
- •3. Методы микробиологических исследований.
- •1. Микроскопический (бактериоскопический, вирусоскопический).
- •2. Культуральный (бактериологический, вирусологический, микологический, протозоологический методы).
- •3. Биологический (экспериментальный).
- •4. Строение микроскопа. Особенности микроскопии в иммерсионной системе.
- •4. Иммунобиологический (серологический).
- •5. Аллергологический (аллергический).
- •6. Молекулярно-генетический (молекулярно-биологический).
- •Занятие №2. Тема: бактериоскопический метод исследования. Морфология микроорганизмов.
- •2. Морфология микроорганизмов.
- •1. Шаровидные формы бактерий (кокки)
- •2. Палочковидные формы бактерий
- •3. Извитые формы бактерий
- •3. Размеры микроорганизмов.
- •4. Полиморфизм микроорганизмов.
- •Занятие №3. Тема: бактериоскопический метод исследования. Микроскопия окрашенных и неокрашенных микроорганизмов.
- •2. Исследование микробов на подвижность.
- •1. Приготовление препарата «раздавленная капля»
- •2. Приготовление препарата «висячая капля»
- •3. Техника приготовления мазков.
- •1. Техника приготовления мазков-препаратов
- •2. Техника приготовления мазков-отпечатков
- •2. Метод пешкова (метод окраски спор)
- •Занятие №4. Тема: бактериологический метод исследования. Культивирование микроорганизмов.
- •2. Питательные среды и методы стерилизации.
- •2. Посев (пересев) бактерий в пробирку со скошенной плотной:
- •3. Посев (пересев) бактерий в пробирку уколом с плотной средой (агаром или желатином)
- •4. Посев (пересев) бактерий в чашку петри с плотной средой:
- •4. Культивирование аэробов.
- •I. Механические методы (механические методы разобщения микробных клеток):
- •1. Метод пастера.
- •2. Метод коха.
- •3. Метод дригальского.
- •4. Метод истощающего штриха.
- •II. Термический метод.
- •III. Химические методы.
- •1. Метод выделения микроорганизмов с помощью кислот, щелочей, спирта.
- •2. Метод обогащения.
- •3. Методы с применением антибиотиков.
- •IV. Биологический метод.
- •3. Метод культивирования в жидких средах под слоем масла.
- •4. Использование редуцирующих и окисляющих веществ.
- •5. Метод виньяля-виона.
- •6. Метод с использованием специальных приборов и аппаратов (анаэростат и эксикатор).
- •Занятие №5. Тема: бактериологический метод исследования. Биохимические свойства микроорганизмов.
- •3. Сахаролитические свойства микроорганизмов.
- •1. Обнаружение сахаролитической активности на средах гисса.
- •2. Обнаружение сахаролитической активности на других средах.
- •4. Протеолитические свойства микроорганизмов.
- •1. Обнаружение протеалитической активности на мясо-пептонной желатине (мпж).
- •2. Обнаружение протеолитической активности на молоке.
- •5. Редуцирующие свойства микроорганизмов.
- •1. Определение редуцирующих свойств на молоке с метиленовым синим.
- •2. Определение редуцирующих свойств на лакмусовом молоке.
- •6. Гемолитические свойства микроорганизмов.
- •1. Определение гемолитических свойств на кровяном агаре.
- •Занятие №6. Коллоквиум
- •Специальная микробиология Занятие № 7. Тема: микробиология молока и молочнокислых продуктов.
- •Микрофлора молока
- •1. Молочные стрептококки:
- •2. Молочные палочки:
- •Микрофлора молочнокислых продуктов
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочнокислых продуктов.
- •3. Обнаружение возбудителей туберкулеза и бруцеллеза в молоке и молочнокислых продуктах.
- •Занятие № 8. Тема: микробиология кормов.
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование кормов.
- •3. Обнаружение возбудителей ботулизма в кормах. Микотоксикозы.
- •4. Консервирование кормов.
- •Занятие № 9. Тема: микробиология мяса, кожевенно-мехового сырья и яиц.
- •Микрофлора мяса
- •Микрофлора кож-мех сырья
- •Микрофлора яиц
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование мяса, кожевенно-мехового сырья и яиц. Санитарно-микробиологическое исследование мяса
- •3. Обнаружение возбудителей сибирской язвы в мясе и кожевенно-меховом сырье.
2. Обнаружение сахаролитической активности на других средах.
Кроме того, сахаролитическую активность изучают на средах Эндо, Левина, Плоскирева и др.
Микроорганизмы, сбраживая до кислоты находящийся в этих средах молочный сахар (лактозу), образуют окрашенные колонии - кислота изменяет цвет имеющегося в среде индикатора. Колонии микробов, не ферментирующих лактозу, бесцветны.
Определение способности ферментировать лактозу на среде Эндо.
♦ Лактозопозитивные (+) колонии на среде Эндо – красные (кишечная палочка с типичной биохимической активностью образует на этой среде темно-красные колонии с металлическим блеском, схожим с блеском ртути).
♦ Лактозонегативные (-) колонии на среде Эндо – бесцветные (но энтеробактерии образуют прозрачные и полупрозрачные колонии, и поэтому они могут приобретать оттенок той среды, на которой вырастают).
Определение способности ферментировать лактозу на среде Левина.
♦ Лактозопозитивные (+) колонии на среде Левина – синие.
♦ Лактозонегативные (-) колонии на среде Левина – бесцветные.
Определение способности ферментировать лактозу на среде Плоскирева.
♦ Лактозопозитивные (+) колонии на среде Плоскирева – красные.
♦ Лактозонегативные (-) колонии на среде Плоскирева – бесцветные.
4. Протеолитические свойства микроорганизмов.
Протеолитические свойства (протеолитическая активность) – это способность расщеплять белковые соединения до промежуточных (аминокислоты) и конечных (сероводород, индол, аммиак, скатол и др.) продуктов.
Протеолитическую активность осуществляют протеолитические ферменты (протеазы).
1. Обнаружение протеалитической активности на мясо-пептонной желатине (мпж).
Сущность: если микроорганизмы обладают протеолитической активностью, то происходит разжижение желатины (благодаря ферменту – желатиназе). Фермент желатиназа гидролизует аминокислоты белков желатина, в результате чего гель разжижается.
Посев и культивирование: МПЖ разливают в пробирки столбиком (по 5- 6 мл), после застывания среды, посев производят «уколом» и культивируют в термостате.
Учет результатов:
♦ При положительной реакции (+): наблюдают разжижение желатины в месте укола. Также отмечают день появления признаков разжижения, степень и форму разжижения (послойно, перевернутой ёлочкой, воронкой и др.).
♦ При отрицательной реакции (-): желатина в месте укола не разжижается.
2. Обнаружение протеолитической активности на молоке.
Сущность: если микроорганизмы обладают протеолитической активностью, то происходит гидролиз казеина молока (благодаря ферменту – казеиназе). Под воздействием протеолитических ферментов казеин (сгусток казеина) растворяется (пептонизация), и среда приобретает желтоватую окраску.
Посев и культивирование: в пробирки разливают молоко, производят посев культуры в молоко и культивируют в термостате.
Учет результатов:
♦ При положительной реакции (+):среда приобретает желтоватую окраску.