- •Общая микробиология Занятие №1. Тема: вводное занятие.
- •2. Микробиологическая лаборатория.
- •3. Методы микробиологических исследований.
- •1. Микроскопический (бактериоскопический, вирусоскопический).
- •2. Культуральный (бактериологический, вирусологический, микологический, протозоологический методы).
- •3. Биологический (экспериментальный).
- •4. Строение микроскопа. Особенности микроскопии в иммерсионной системе.
- •4. Иммунобиологический (серологический).
- •5. Аллергологический (аллергический).
- •6. Молекулярно-генетический (молекулярно-биологический).
- •Занятие №2. Тема: бактериоскопический метод исследования. Морфология микроорганизмов.
- •2. Морфология микроорганизмов.
- •1. Шаровидные формы бактерий (кокки)
- •2. Палочковидные формы бактерий
- •3. Извитые формы бактерий
- •3. Размеры микроорганизмов.
- •4. Полиморфизм микроорганизмов.
- •Занятие №3. Тема: бактериоскопический метод исследования. Микроскопия окрашенных и неокрашенных микроорганизмов.
- •2. Исследование микробов на подвижность.
- •1. Приготовление препарата «раздавленная капля»
- •2. Приготовление препарата «висячая капля»
- •3. Техника приготовления мазков.
- •1. Техника приготовления мазков-препаратов
- •2. Техника приготовления мазков-отпечатков
- •2. Метод пешкова (метод окраски спор)
- •Занятие №4. Тема: бактериологический метод исследования. Культивирование микроорганизмов.
- •2. Питательные среды и методы стерилизации.
- •2. Посев (пересев) бактерий в пробирку со скошенной плотной:
- •3. Посев (пересев) бактерий в пробирку уколом с плотной средой (агаром или желатином)
- •4. Посев (пересев) бактерий в чашку петри с плотной средой:
- •4. Культивирование аэробов.
- •I. Механические методы (механические методы разобщения микробных клеток):
- •1. Метод пастера.
- •2. Метод коха.
- •3. Метод дригальского.
- •4. Метод истощающего штриха.
- •II. Термический метод.
- •III. Химические методы.
- •1. Метод выделения микроорганизмов с помощью кислот, щелочей, спирта.
- •2. Метод обогащения.
- •3. Методы с применением антибиотиков.
- •IV. Биологический метод.
- •3. Метод культивирования в жидких средах под слоем масла.
- •4. Использование редуцирующих и окисляющих веществ.
- •5. Метод виньяля-виона.
- •6. Метод с использованием специальных приборов и аппаратов (анаэростат и эксикатор).
- •Занятие №5. Тема: бактериологический метод исследования. Биохимические свойства микроорганизмов.
- •3. Сахаролитические свойства микроорганизмов.
- •1. Обнаружение сахаролитической активности на средах гисса.
- •2. Обнаружение сахаролитической активности на других средах.
- •4. Протеолитические свойства микроорганизмов.
- •1. Обнаружение протеалитической активности на мясо-пептонной желатине (мпж).
- •2. Обнаружение протеолитической активности на молоке.
- •5. Редуцирующие свойства микроорганизмов.
- •1. Определение редуцирующих свойств на молоке с метиленовым синим.
- •2. Определение редуцирующих свойств на лакмусовом молоке.
- •6. Гемолитические свойства микроорганизмов.
- •1. Определение гемолитических свойств на кровяном агаре.
- •Занятие №6. Коллоквиум
- •Специальная микробиология Занятие № 7. Тема: микробиология молока и молочнокислых продуктов.
- •Микрофлора молока
- •1. Молочные стрептококки:
- •2. Молочные палочки:
- •Микрофлора молочнокислых продуктов
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочнокислых продуктов.
- •3. Обнаружение возбудителей туберкулеза и бруцеллеза в молоке и молочнокислых продуктах.
- •Занятие № 8. Тема: микробиология кормов.
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование кормов.
- •3. Обнаружение возбудителей ботулизма в кормах. Микотоксикозы.
- •4. Консервирование кормов.
- •Занятие № 9. Тема: микробиология мяса, кожевенно-мехового сырья и яиц.
- •Микрофлора мяса
- •Микрофлора кож-мех сырья
- •Микрофлора яиц
- •2. Санитарно-бактериологическое исследование мяса, кожевенно-мехового сырья и яиц. Санитарно-микробиологическое исследование мяса
- •3. Обнаружение возбудителей сибирской язвы в мясе и кожевенно-меховом сырье.
Занятие №5. Тема: бактериологический метод исследования. Биохимические свойства микроорганизмов.
1. Значение исследования биохимических свойств микроорганизмов.
2. Ферментативные свойства микроорганизмов.
3. Сахаролитические свойства микроорганизмов.
4. Протеолитические свойства микроорганизмов.
5. Редуцирующие свойства микроорганизмов.
6. Гемолитические свойства микроорганизмов.
7. Определение газов, выделяемых микроорганизмами.
8. Определение фермента каталазы.
1. Значение исследования биохимических свойств микроорганизмов.
Биохимический метод исследования относится к культуральному (бактериологическому) методу и позволяет определять биохимические свойства бактерий.
Биохимические свойства бактерий в сочетании с их морфологическими, культуральными и другими постоянными признаками используются для определения видов и типов бактерий.
2. Ферментативные свойства микроорганизмов.
Биохимические свойства бактерий определяются количеством и качеством ферментов.
В жизнедеятельности микробов ферменты играют большую роль. Они являются обязательными участниками разнообразных биохимических реакций, лежащих в основе функций питания, дыхания, размножения.
Стабильность ферментативных систем бактерий позволяет использовать биохимические свойства бактерий в сочетании с их морфологическими, культуральными и другими постоянными признаками для определения видов и типов бактерий.
Ферменты – это высокомолекулярные соединения белковой природы, которые являются катализаторами, т. е. оказывают влияние на скорость протекающей реакции.
Ферменты подразделяются по месту действия на 2 группы:
1) экзоферменты (действуют вне клетки).
2) эндоферменты (действуют в самой клетке).
Ферменты подразделяют на несколько классов:
1) Оксидоредуктазы (катализируют окисл-вост-е реакции между двумя субстратами и принимают участие в дыхании клетки).
2) Трансферазы (осуществляют межмолекулярные перенос химических групп от одних соединений к другим).
3) Гидролазы (катализируют реакции расщепления внутримолекулярных связей, путем связывания молекул воды).
4) Лиазы (катализируют реакции путем присоединения или отрыва двух связей, но без присоединения воды или окисления).
5) Изомеразы (осуществляют реакции изомеризации, т. е. внутримолекулярные перемещения групп).
6) Лигазы (синтетазы) (катализируют процессы синтеза связей за счет энергии расщепления пирофосфатных связей в молекуле АТФ).
3. Сахаролитические свойства микроорганизмов.
Сахаролитические свойства (сахаролитическая активность) – это способность микроорганизмов с помощью ферментов расщеплять углеводы до конечных продуктов (кислоты и газа).
Сахаролитическую активность осуществляют сахаролитические ферменты.
1. Обнаружение сахаролитической активности на средах гисса.
Среды Гисса – это среды, которые содержат тот или иной углевод (глюкоза и др.) и индикатор (Андроде - красного цвета; ВР - синего цвета).
Сущность: при посеве на среды Гисса, на них происходит расщепление углевода (глюкозы и др.), находящегося в питательной среде до кислоты и газа или только до кислоты, или только до газа. Микробы, не ферментирующие данный углевод, растут на среде, не изменяя ее.
Посев и культивирование: берут ряд пробирок со средами Гисса («пестрый» ряд Гисса) и ставят в 1 ряд в штатив. На каждой пробирке пишут название сахара, содержащегося в среде. Посев делают петлей по общепринятой методике. Культивируют в термостате.
«Пестрым» ряд называют потому, что бактерии одни сахара расщепляют (цвет индикатора меняется – меняется цвет среды), а другие нет (цвет среды не меняется).
Различают:
1) Малый «пестрый» ряд Гисса. Он содержит пробирки с: глюкозой, лактозой, сахарозой, маннитом, мальтозой.
2) Большой «пестрый» ряд Гисса (для углубленного исследования биохимических свойств) дополняют пробирками с: дульцитом, сорбитом, ксилозой, арабинозой и некоторыми другими сахарами.
Учет результатов:
♦ При выделении кислоты – меняется цвет среды (рН питательной среды сдвигается в кислую сторону, а в кислой среде восстанавливается цвет индикатора и среда меняет свой цвет).
♦ При выделении газа:
- в полужидкой среде Гисса (с индикатором Андроде - красный) – образуются видимые пузырьки.
- в жидкой среде Гисса (с индикатором ВР - синий) – газ собирается в стеклянный поплавок.
♦ При выделении кислоты и газа – меняется цвет среды и появляются пузырьки.
♦ Отрицательная реакция (не выделяется кислота и газ) – цвет среды не изменяется, пузырьки не появляются.