4. Иммунобиологический (серологический).

Заключается в проведении иммунобиологических реакций (реакции иммунитета – определение групп крови и др.) и серологических реакций (реакций с сывороткой крови – реакция связывания комплемента и др.).

Диагностическая ценность: это второй по ценности метод, т. к. взаимодействие антигена и антитела характеризуется высокой степенью специфичности.

5. Аллергологический (аллергический).

Заключается в диагностике болезней путем постановки аллергических реакций (основанных на аллергии) на диагностический препарат-аллерген (туберкулинодиагностика).

Диагностическая ценность: метод не всегда информативен, он используется как дополнение к культуральному и серологическому методу. Возможности метода ограничены тем, что большинство микробов, попадая в организм животных, не вызывает аллергию.

6. Молекулярно-генетический (молекулярно-биологический).

Заключается в проведении ПЦР (полимеразной цепной реакции) – это метод, позволяющий диагностировать болезни, работая с генетическим материалом возбудителя.

Диагностическая ценность: метод очень точен и высокоспецифичен, но не является главным из-за частой генетической изменчивости микробов и возможности получения ложноположительных результатов.

Цель микробиологической диагностики: поставить МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ДИАГНОЗ.

4. Строение микроскопа. Особенности микроскопии в иммерсионной системе.

Микроскоп (от греч. mikros - маленький, skopeo - смотрю) – это оптический прибор, позволяющий получить увеличенное изображение изучаемого объекта и рассмотреть мелкие детали его строения, которые не видны невооруженным глазом.

Увеличение микроскопа – это произведение увеличений объектива и окуляра (объектив × окуляр). Человеческий глаз не способен увеличивать изображение предмета. Лупа может увеличивать в 2,3,4 раза. Простой микроскоп максимально в 800 раз, рабочий в 1000 раз.

Разрешающая способность микроскопа – это расстояние между двумя точками объекта, которые видны в микроскоп раздельно. Характеризует четкость получаемого изображения. Разрешающая способность невооруженного человеческого глаза около 1/10 мм или 100 мкм. Лучший световой микроскоп примерно в 500 раз улучшает возможность человеческого глаза, т. е. его разрешающая способность составляет около 0,2 мкм или 200 нм.

СТРОЕНИЕ МИКРОСКОПА

Строение микроскопа:

1. Механическая часть – это часть микроскопа, которая предназначена для фиксации и передвижения оптической и осветительной частей относительно рассматриваемого объекта. Механическая часть: основание, штатив, предметный столик, тубусодержатель, тубус, револьвер, гнёзда револьвера, клеммы (препаратоводитель), макровинт, микровинт, винт для перемещения конденсора, оправа для зеркала, оправа для откидной линзы.

2. Оптическая часть – это часть микроскопа, предназначенная для получения увеличенного изображения рассматриваемого объекта. Оптическая часть: окуляр, объективы.

3. Осветительная часть – это часть микроскопа, предназначенная для наилучшего освещения рассматриваемого объекта. Осветительная часть: зеркало (осветитель), конденсор, диафрагма.

Окуляр (от лат. oculus – глаз) – это система линз микроскопа, которая расположена ближе всего к глазу исследователя.

Расположение: вставлен в верхнюю часть тубуса.

Назначение: для рассматривания с некоторым увеличением оптического изображения, даваемого объективом оптического прибора.

Окуляр имеет определенную кратность увеличения (×7, ×10, ×15, ×20 и др).

Объектив – это система линз микроскопа, которая расположена ближе всего к исследуемому объекту.

Расположение: ввинчен в гнездо револьвера микроскопа.

Назначение: создает перевернутое действительное изображение предмета. Во многих микроскопах применяются взаимозаменяемые объективы с различной силой увеличения.

Виды объективов: сухие (при работе с ними между объективом и препаратом находится слой воздуха) и иммерсионные (при работе с ними между объективом и препаратом капают каплю иммерсионного масла).

Различают объективы: малого увеличения (×4, ×8); большого увеличения (×10, ×40); иммерсионные объективы (×90, ×100).

Конденсор (от лат. сгущаю, уплотняю) – это система линз, собирающая параллельные лучи от источника света, фокусирует их в 1 точке и направляет их на рассматриваемый предмет.

Расположение: между предметным столиком и источником света.

Назначение: для регулировки интенсивности освещения рассматриваемого объекта. Конденсор концентрирует свет в своем фокусе и направляет его на рассматриваемый предмет. Конденсор регулирует яркость, контрастность изображения, глубину резкости и равномерность освещения рассматриваемого предмета.

При опускании конденсора поле зрения несколько затемняется, при поднятии – освещается.

Диафрагма (от греч. перегородка) – это непрозрачная преграда, ограничивающая поперечное сечение световых пучков в оптических системах.

Расположение: между предметным столиком и источником света (ниже конденсора).

Назначение: для регулировки интенсивности света (убирает лишние лучи света). Это осуществляется с помощью рычага расширением или сужением отверстия, пропускающего свет к конденсору.

Чаще всего используется ирисовая диафрагма.

Макровинт (макрометрический винт) – предназначен для грубой фокусировки.

Микровинт (микрометрический винт) – предназначен для тонкой фокусировки.

Зеркало – используется для отражение и направление света на исследуемый объект. Оно имеет 2 поверхности: плоскую – ее используют при сильном (осветитель, электролампа) освещении и вогнутую – ее используют при слабом (естественном) освещении.

Револьвер (от лат. revolvo - вращаю) – нужен для закрепления объективов. При вращении револьвера можно переводить объективы с разным увеличением.

Предметный столик – выполняет роль поверхности, на которой размещают препарат. В разных конструкциях микроскопов предметный столик может двигать препарат в горизонтальной, вертикальной плоскости или поворачивать препарат на заданный угол. Для фиксации и передвижения на предметном столике препарата используют клеммы, препаратоводитель различной конструкции. Виды предметных столиков: неподвижный (стационарный), подвижный, координатный и др.

Порядок работы за микроскопом (кратко):

1. Поднять штатив.

2. Поднять конденсор.

3. Включить осветитель (или при помощи зеркала найти свет).

4. Положить на предметный столик предметное стекло с объектом микроскопирования.

5. Найти изображение (настраивая с помощью макровинта) на малом увеличении.

6. Под контролем зрения (смотрят сбоку) опускают иммерсионный объектив в каплю иммерсионного масла.

7. Поднимают штатив с помощью макровинта, под контролем зрения (смотрят в окуляр) до появления изображения.

8. Четкость изображения настраивают с помощью микровинта. После микроскопии.

9. Поднимают штатив.

10. Ставят на малое увеличение.

11. Иммерсионный объектив протирают салфеткой.

12. Опускают конденсор.

ОСОБЕННОСТИ МИКРОСКОПИИ В ИММЕРСИОННОЙ СИСТЕМЕ

Иммерсия в микроскопии – это введение между объективом микроскопа и рассматриваемым в нём предметом жидкости для усиления яркости и расширения пределов увеличения изображения. Чаще всего используют иммерсионное масло.

Иммерсионное масло имеет оптический коэффициент преломления, близкий к коэффициенту преломления стекла, благодаря этому световые лучи, не отклоняясь от своего первоначального направления, попадают на линзу объектива.