Тема № 9. Методы лабораторной диагностики. Правила забора биологического материала на исследование.

Цель занятия:

Студент должен знать:

• основные требования к забору биологического материала для лабораторного исследования;

• общий анализ крови;

• правила забора мочи на общий анализ, по Аддису-Каковского и Нечипоренко, 3-стаканную пробу, Зимницкого;

• правила забора кала на общий анализ, исследование кала на скрытую кровь.

Правила забора биологического материала на исследование.

При взятии анализов для исследования необходимо соблюдать ряд правил:

• Материал для исследований берут до начала антибактериальной терапии или через 8 – 10 часов после ведения последней дозы лечебных препаратов.

• Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования, а при необходимости забор повторяют.

• Транспортировку анализов в лабораторию проводят в максимальные сроки. Если отправить материал немедленно нет возможности, его хранят в холодильнике, или используют специальные транспортные среды. Транспортируют материал в специальных пеналах или биксах.

• К анализам, направляемых в лабораторию, прилагается сопроводительный документ, содержащий основные сведения, необходимые для проведения микробиологического исследования (характер материала, Ф.И.О. пациента, его возраст, название ЛУ, предполагаемый диагноз заболевания, дата и время взятия материала, цель исследования, подпись лица, направившего материал на исследование).

0. Кровь.

Кровь для клинического анализа берут из IV пальца левой руки после предварительной обработки кожных покровов смесью спирта и эфира. Прокол иглой-скарификатором производят сбоку в мякоть первой фаланги на глубину 2 – 2,5 мм. Первую каплю крови снимают ваткой. Из последующих капель кровь берут для следующих исследований: определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ), гемоглобина, лейкоцитов, эритроцитов, готовят мазки. После каждой манипуляции палец вытирают смоченной в спирте ватой. По окончании исследования кончик пальца заворачивают в вату, смоченную спиртом, и предлагают пациенту крепко прижать палец к ладони; кровотечение при этом быстро останавливается.

Содержание гемоглобина в крови здоровых людей колеблется в пределах 120 – 140 г/л у женщин, 130 – 160 г/л у мужчин. Нормальное содержание эритроцитов в 1 л крови составляет: 3,9 – 4,7 х 1012 у женщин, 4 – 5 х 1012 у мужчин. В норме цветовой показатель находится в пределах 0,85 – 1,05. В норме содержание лейкоцитов в 1 л крови составляет 4,0 – 9,0 х 109 (4000 – 9000 в 1 мкл.). в норме количество тромбоцитов составляет 180 – 300 х 109 (180,000 – 320,000 в 1 мкл. крови). Нормальные границы СОЭ составляют для женщин 2 – 15 мм/ч, для мужчин 2 – 10 мм/ч.

0. Мокрота.

Мокрота – патологический секрет, выделяемый слизистой оболочкой дыхательных путей при кашле и отхаркивании. Мокроту для бактериологических исследований собирают либо при кашле, либо при бронхоскопии. Больного необходимо обучит правилам сбора мокроты. Обычно собирают утреннюю порцию мокроты.

Пациент должен соблюдать правила сбора мокроты:

• Тщательно почистить зубы, прополоскать рот кипяченой водой.

• Снять крышку с емкости, в которую необходимо собрать мокроту.

• Поднести ко рту открытую емкость и откашлять в нее небольшое количество мокроты.

Мокроту собирают в стерильную посуду.

Для улучшения отхождения вязкой и плохо отхаркивающейся мокроты назначают щелочи: на стакан теплого молока щепотку гидрокарбоната натрия, настой термопсиса и девясила; банки и горчичники.

Больные, у которых в легких имеется полость, выделяют большое количество мокроты. Для ее лучшего отхождения необходимо найти удобное положение для больного – дренаж положением. Если воспалительный процесс находится на одной стороне – это положение на здоровом боку. Дренаж проводят несколько раз в день (3 – 4 раза по 25 – 30 мин).

Для исследования в лабораторию направляют утреннюю мокроту, полученную после сна или все суточное количество. Также выделению мокроты способствуют глубокие вдохи и покашливание. При обнаружении в мокроте примеси крови следует немедленно сообщить врачу и сохранить мокроту для направления в лабораторию.

1. Моча.

Исследование мочи указывает не только на состояние почек и их функцию, но и позволяет судить о наличии поражения других органов и систем.

Для общего анализа мочи используют утреннюю порцию мочи, т.к. она более концентрированная. Мочу собирают в чистую, сухую посуду в количестве 100 – 200 мл. на направлении указывается Ф.И.О. больного, № палаты и отделения, а также характера исследования (например: «Общий анализ мочи», «Исследование мочи на сахар и ацетон»). Если нет возможности быстро доставить мочу в лабораторию, ее сохраняют в холодильнике. У пациентов, с подозрением на сахарный диабет, исследованию подвергается суточная моча. При проведении общего анализа мочи учитывают ее цвет, прозрачность, запах, реакцию, относительную плотность.

У женщин в период менструации мочу для исследования берут катетером.

Виды забора мочи для лабораторного исследования:

• Трехстаканная проба – больной во время мочеиспускания заполняет 3 сосуда, на которых отмечены порции №1, №2, №3 на каждой из них указывается Ф.И.О. больного, возраст, отделение и номер порции мочи (№1, №2, №3). Все 3 сосуда должны быть быстро доставлены в лабораторию, поскольку при длительном хранении мочевой осадок претерпевает изменения и результаты его исследования будут недостоверны. Эта проба может выполняться в любое время в течение суток.

• Анализ мочи по Нечипоренко – анализ может проводиться в любое время суток, но желательно в утренние часы. Для анализа собирают среднюю порцию мочи в чистый и сухой сосуд, на котором уже имеется маркировка. Собранная моча должна быть немедленно доставлена в лабораторию, поскольку при длительном хранении изменяется мочевой осадок. В нормальном анализе мочи по Нечипоренко эритроцитов содержится до 1000, лейкоцитов до 4000, цилиндров 220 в 1 мл мочи.

• Анализ мочи по Каковскому-Аддису – мочу собирают в течении 10 ч (с 22.00 до 08.00 ч утра следующего дня). В 22.00 ч больной должен опорожнить мочевой пузырь и провести тщательный туалет наружных половых органов. Ночью с 22.00 ч и до 08.00 ч утра больной должен стараться не мочиться. Утром с 08.00 ч собирают утреннюю порцию мочи и направляют в лабораторию. При анализе по Каковскому-Аддису норма лейкоцитов до 2 000 000 (2,0 х 109/л), эритроцитов до 1000 000 (1,0 х 1012/л), цилиндров до 3000 в сутки. В последние годы этот анализ стали выполнять реже в связи с трудностями: мочу необходимо собирать в течение 10 ч с консервантом и хранить на холоде.

• Проба по Зимницкому – позволяет оценить колебания относительной плотности (удельного веса) и количества мочи, выделенное в дневное и ночное время. С помощью пробы по Зимницкому определяют состояние концентрационной и выделительной функций почек. Заранее готовят 8 баночек, на этикетке которых указывают Ф.И.О. больного, возраст, отделение, дату и время проведения исследования, номер порции. Каждые 3 часа больной собирает мочу в соответствующий сосуд: порция № 1 – 08.00 до 11.00, порция № 2 – 11.00 до 14.00, порция № 3 – 14.00 до 17.00, порция № 4 – 17.00 до 20.00, порция № 5 – 20.00 до 23.00, порция № 6 – 23.00 до 02.00 ч ночи, порция № 7 – 02.00 до 05.00, порция № 8 – 05.00 до 08.00 ч утра. Для получения мочи в ночное время медсестра должна разбудить больного за 5 мин до назначенного времени. В день окончания исследования мочи по Зимницкому больному не принято назначать какие-либо другие исследования, поскольку он будет нуждаться в отдыхе.

С помощью анализа по Зимницкому измеряют дневной и ночной диурез. Ночной диурез – с 21.00 до 06.00 ч утра следующего дня – по суммарному количеству выделенной в норме мочи должен составлять примерно 1/3 дневного диуреза. Общее количество мочи в норме составляет 65 – 75% выпитой жидкости за сутки.

Желательно в день исследования попросить больного отмечать количество выпитой жидкости. Зная общее количество выделенной мочи и принятой жидкости, можно оценить выделительную функцию почек при условии тщательного измерения всех показателей.

Функциональное состояние почек считается нормальным, если в анализе мочи по Зимницкому дневной диурез превышает ночной, а относительная плотность мочи колеблется от 1008 до 1025.

Относительная плотность мочи – один из важных показателей, характеризующих концентрационную функцию почек.

При нарушении этой функции относительная плотность мочи снижается равномерно во всех порциях до 1008 – 1010 и менее, что называется гипоизостенурией.

Значительное повышение относительной плотности во всех порциях свыше 1026 – 1030 может возникать при сильном потоотделении, сухоядении, глюкозурии.

0. Мазки.

При подозрении на ангину, дифтерию материал для исследования берут ватным тампоном. Материал для исследования должен быть собран в стерильных условиях и обязательно в стерильную посуду. Нельзя брать материал после приема пищи или после полоскания горла дезинфицирующим раствором. Для взятия мазка язык пациента фиксируют шпателем, осторожно, не касаясь тампоном слизистой оболочки полости рта и языка, проводят тампоном по дужкам и небным миндалинам. При подозрении на дифтерию проводят тампоном по границе измененной и неизменной поверхности миндалины. Затем тампон извлекается из полости рта и водится в пробирку, не касаясь наружной поверхности. Обязательно оформление сопроводительного документа для исследования в лаборатории. Время между взятием мазка и посевом на различные среды в лаборатории не должно превышать 5 – 6 часов.

Необходимо соблюдать следующее правило:

Сначала проводят тампоном по правой миндалине, затем переходят к небной дужке, язычку, левой небной дужке, левой миндалине и в конце – к задней стенке глотки. Используется только 1 тампон.

При ясно локализованных изменениях материал берется 2-мя тампонами: с пораженных мест одним тампоном, другим – из всех остальных.

0. Кал.

Кал формируется в толстой кишке и состоит из остатков пищи, в основном из растительной клетчатки. Часть кала составляют мертвые и живые микробы. Состав каловых масс зависит от характера пищи и функции пищеварительного тракта.

Кал для бактериологического исследования может быть получен 2-мя способами:

1. Кал для исследования собирают сразу после дефекации стерильным деревянным шпателем из нескольких мест последней порции и помещают в стерильную пробирку. Доставляют в лабораторию в течение 1 часа.

2. Забор материала на исследование производят из прямой кишки.

Собирают кал в теплом виде, чтобы не произошли изменения под действием микробов и ферментов. Кал собирают в сухую, чистую, просторную, стеклянную посуду. Направлять кал на исследование в картонных и спичечных коробках не рекомендуется.

Для исследования кала на скрытую кровь больного готовят в течение 3-х дней, из рациона исключают рыбу и мясо.

Кал для исследования на яйца глистов берут сразу же после дефекации из 3-х разных мест, т.к. в одном месте яйца глистов или их фрагменты могут отсутствовать.

Кал на дизентерию забирается следующим образом:

Готовится пробирка, содержащая консервант, со стерильной проволочной петлей. Пациентам объясняется ход манипуляции. Заборщиком одеваются перчатки. Пациент укладывается на бок, с немного согнутыми в коленях ногами. Разводятся ягодицы, и осторожно вводится петля в прямую кишку сначала по направлению к пупку на 3 – 4 см, а затем параллельно позвоночнику на глубину 5 – 6 см. Легкими вращательными движениями берется материал со стенок кишки. Петля извлекается из прямой кишки и осторожно, не касаясь наружной поверхности пробирки, опускается в нее. На направлении пишется Ф.И.О. больного, возраст, отделение, дату и время проведения исследования и отправляется в лабораторию.

Для обнаружения яиц остриц делают соскоб с перианальных складок деревянным шпателем.

Соскоб проводится в следующей последовательности:

Обследование проводится утром до дефекации или вечером через 2 – 3 часа после того, как пациент лег в постель. Шпатель перед соскабливанием смачивается в 50% р-ре глицерина. Готовятся предметное и покровное стекло. На предметное стекло капают 1 каплю глицерина. Разводятся ягодицы и берется соскоб с поверхности перианальных складок у ануса и с нижних отделов прямой кишки. Шпатель помещают на предметное стекло в глицерин. Предметное стекло накрывается покровным. Стекла заворачивают в крафт-бумагу. Материал отправляют в лабораторию, заполнив сопроводительный документ.