Показатели преломления спирто-водных растворов, концентрация которых выражена в об. %

Концентрация спирта	Показатель преломления при 20С	Поправка показателя преломления на 1% спирта	Температурный коэффициент	Концентрация спирта	Показатель преломления при 20С	Поправка показателя преломления на 1% спирта	Температурный коэффициент
0	1,33300		1×10-4	18	1,34270	6,1×10-4	1,5×10-4
1	1,33345	4,5×10-4	1×10-4	19	1,34330	6,0×10-4	1,5×10-4
2	1,33400	5,5×10-4	1×10-4	20	1,34390	6,0×10-4	1,6×10-4
3	1,33444	4,4×10-4	1,1×10-4	21	1,34452	6,2×10-4	1,6×10-4
4	1,33493	4,9×10-4	1,1×10-4	22	1,34515	6,0×10-4	1,7×10-4
5	1,33535	4,2×10-4	1,2×10-4	23	1,34573	6,1×10-4	1,8×10-4
6	1,33587	5,2×10-4	1,2×10-4	24	1,34635	6,2×10-4	1,9×10-4
7	1,33641	5,4×10-4	1,3×10-4	25	1,34697	6,2×10-4	2,0×10-4
8	1,33700	5,9×10-4	1,3×10-4	30	1,35000	6,0×10-4	2,0×10-4
9	1,33760	6,0×10-4	1,3×10-4	35	1,35320	6,4×10-4	2,1×10-4
10	1,33808	4,8×10-4	1,4×10-4	40	1,35500	4,0×10-4	2,4×10-4
11	1,33870	6,2×10-4	1,4×10-4	45	1,35700	4,0×10-4	2,4×10-4
12	1,33924	5,4×10-4	1,4×10-4	50	1,35900	4,0×10-4	2,6×10-4
13	1,33977	5,3×10-4	1,4×10-4	55	1,36060	3,2×10-4	2,6×10-4
14	1,34043	6,6×10-4	1,4×10-4	60	1,36180	2,4×10-4	3,4×10-4
15	1,34096	5,3×10-4	1,5×10-4	65	1,36300	2,4×10-4	3,6×10-4
16	1,34158	6,2×10-4	1,5×10-4	70	1,36380	1,6×10-4	3,8×10-4
17	1,34209	5,1×10-4	1,5×10-4	75	1,36450	1,4×10-4	4,0×10-4

При определении показателя преломления спирто-водных растворов следует на призму рефрактометра наносить не менее 5-7 капель и измерять величину n немедленно во избежание ошибки, связанной с летучестью спирта. Исследование необходимо проводить при температуре 20С. Если оно осуществляется не при 20С, следует вносить поправки на температуру. Величины поправок показателя преломления на 1С представлены в табл.19. Если определение проводится при температуре выше 20С, то поправку прибавляют к найденной величине показателя преломления; если анализ проводится при температуре ниже 20С, поправку вычитают.

Пример. Анализу подвергался 40% спиртовой раствор. Определение показателя преломления проводили при 23С. Показание рефрактометра – 1,3541. Согласно табл.19 поправка на 1С для показателя преломления, близкого по величине к полученному (1,35500), равна 2,4×10^-4 (т. е. 0,00024). Поскольку исследование проводилось при 23С, то поправка будет составлять 0,00024 × 3 = 0,00072. Показатель преломления, приведенный к 20С, равен 1,3541 + 0,00072 = 1,35482.

По табл.19 определяют соответствующую данному показателю преломления концентрацию спирта. Найденной величины показателя преломления (1,35482) в таблице нет; близкому по величине показателю преломления 1,35500 соответствует 40% спирт. Необходимо определить, какая концентрация спирта соответствует разности показателей преломления: 1,35500 – 1,35482 = 0,00018. Поправка на 1% спирта равна 4,0×10^-4. Следовательно, . Таким образом, истинное содержание спирта в исследуемом растворе 40 – 0,45 =39,55%.

Для определения концентрации этилового спирта в спиртовых растворах лекарственных препаратов, приготовленных на 70% спирте, разбавление проводят обычно 1:2, а приготовленных на 90% и 95% спирте, – 1:3. При этом необходимо учитывать, что при смешивании спирта с водой объем раствора несколько уменьшается, в связи с чем следует вносить поправку к фактору разведения: при смешивании 1 мл спирта с 2 мл воды умножают коэффициент 2,98 (вместо 3); при смешивании 1 мл спирта с 3 мл воды – на 3,93 (вместо 4).

Пример. Анализировали настойку барбариса, приготовленную по §4 на 70% спирте; определение проводили при 20С. По показаниям рефрактометра n = 1,34555. В табл.12 данная величина показателя преломления отсутствует, наиболее близким значением является 1,34573, что соответствует 23% концентрации спирта. Разность показателей преломления составляет: 1,34573 – 1,34555 = 0,00018. Поправка на 1% спирта по табл.12 равна 6,1×10^-4, следовательно, разности показаний соответствует концентрация спирта . Так как перед определением настойку разводили 1:2, истинная концентрация составляет (23 – 0,295) × 1,98 = 67,66%.

г) по плотности жидкости, определенной с помощью ареометра: по алкоголеметрическим таблицам ГФ находят соответствующее содержание спирта в процентах по массе и по объему;

• определение содержания тяжелых металлов: в фарфоровой чашке упаривают досуха 5 мл жидкого исследуемого препарата, затем остаток осторожно сжигают в присутствии серной кислоты и прокаливают. Полученный остаток обрабатывают при нагревании 5 мл насыщенного раствора аммония ацетата, фильтруют через беззольный фильтр и доводят до метки 100 мл. 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытания на тяжелые металлы (не более 0,001%).

Для контроля качества порошковых растираний (тритураций) проводят следующие определения:

• равномерность распределения лекарственных веществ в тритурациях: порошки рассматривают на расстоянии 20–25 см с помощью лупы или микроскопа с окулярным микрометром в прямом свете: лекарственное вещество должно быть равномерно распределено в молочном сахаре;

• соответствие окраски, вкуса, запаха: в низких разведениях у окрашенных, сильно пахнущих и имеющих резкий вкус исходных веществ можно заметить соответствующую окраску и почувствовать своеобразный запах или вкус;

• однородность: основная масса готовой тритурации должна состоять из частиц размером 25 мкм и менее, не должно быть частиц размером более 50 мкм;

• величина внешней удельной поверхности тритурации должна быть не менее 0,65 м²/г, а молочного сахара – не менее 0,50 м²/г;

• размер частиц металлических и угольных растираний: на предметное стекло наносят 0,02-0,03 г соответствующего растирания, добавляют 1-2 капли воды и вызывают растворение молочного сахара умеренным нагреванием; затем (при не очень высокой температуре) раствор выпаривают настолько, чтобы остался вязкий, олифоподобный остаток, который накрывают покровным стеклом. Препарат рассматривают под микроскопом при увеличении в 200 раз, а величину непрозрачных металлических частичек определяют с помощью окулярного микрометра;

• капиллярный анализ: растирания берут в количестве 5 г, смешивают примерно с двойным весовым количеством абсолютного этилового спирта и полученную смесь подвергают капиллярному анализу как жидкое разведение;

• перекристаллизация насыщенных растворов: взвешенную пробу вещества помещают в мерную колбу с определенным количеством воды, различным для каждого вещества, а колбу покрывают небольшим кристаллизатором. Растворения достигают нагреванием закрытой колбы в кипящей воде или на открытом пламени, затем медленно охлаждают на воздухе:

а) с веществами, пересыщенные растворы которых полностью кристаллизуются при соприкосновении с изоморфным кристаллом, поступают следующим образом: небольшой пипеткой осторожно берут несколько капель пересыщенного раствора и помещают по одной на стеклянную пластинку, затем небольшим, предварительно прокаленным, а затем полностью охлажденным платиновым шпателем берут небольшую пробу (приблизительно величиной с булавочную головку) растирания, подлежащего испытанию, и помещают ее в одну из капель пересыщенного раствора, находящегося на стеклянной пластинке. Если в пробе был хоть один изоморфный кристалл, то сравнительно быстро происходит кристаллизация всей капли, в результате чего образуется грубая кристаллическая поверхность и одновременно теряется ее прозрачность. Примером этого класса веществ являются натрия ацетат и сегнетова соль;

б) вещества, пересыщенные растворы которых, соприкасаясь с изоморфным кристаллом, увеличивают его, а сами при этом не кристаллизуются: с помощью пипетки берут несколько миллилитров пересыщенного раствора и осторожно, так, чтобы не смочить край и верхнюю поверхность стенки, помещают в маленькую пробирку, закрываемую резиновой пробкой. С помощью маленького, предварительно прокаленного и полностью охлаждённого платинового шпателя, добавляют к раствору небольшую пробу исследуемого растирания, пробирку закрывают резиновой пробкой, осторожно опрокидывают и оставляют в наклонном положении на несколько часов. Если в пробе были микроскопические изоморфные кристаллы, то через несколько часов на нижней стенке можно заметить некоторое количество выросших кристаллов или друз различной величины. Примером этого класса веществ являются бура и меди сульфат.

Примечание: у растираний веществ, которые в пересыщенных растворах могут вызывать явление перекристаллизации, этот метод можно использовать для проверки приготовления лекарства согласно прописи, т.к. явление перекристаллизации наблюдается и при высоких разбавлениях, например, таких как с 5 до 9 десятичные растирания.

Аналитический контроль^* качества основных гомеопатических препаратов по действующим веществам проводят различными методами в зависимости как от природы исходных веществ, так и от того являются ли они фармакопейными или не фармакопейными препаратами.

Фармакопейные аллопатические препараты, которые применяются также в гомеопатии, анализируют на подлинность и количественное содержание по методикам фармакопейных изданий. В качестве примеров можно привести некоторые химические соединения, применяемые для приготовления растворов или порошковых растираний:

меди сульфат (CuSO₄ ·5H₂O)

подлинность: реакция с железом металлическим (проба на Cu²⁺⁾;

реакция с аммиаком (проба на Cu²⁺⁾;

реакция с бария нитратом (проба на SO₄^2–);

количественное определение:

субстанция – йодометрическое определение;

тритурации, дилюции – йодометрическое определение – до Х3;

фотоколориметрически с аммиаком – до Х4;

калия карбонат (K₂CO₃)

подлинность: реакция с винной кислотой (проба на K⁺);

реакция с хлороводородной кислотой (проба на CO₃^2-);

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

тритурации, дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование;

прямая потенциометрия;

натрия карбонат (Na₂CO₃)

подлинность: реакция с цинкуранил ацетатом (проба на Na⁺);

реакция с хлористоводородной кислотой (проба на CO₃^2-);

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

тритурации, дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование;

прямая потенциометрия;

бура, натрия тетраборат (Na₂B₄O₇ ·10H₂O)

подлинность: реакция образования борноэтилового эфира;

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

тритурации, дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование;

прямая потенциометрия;

натрия гидрокарбонат (NaHCO₃)

подлинность: реакция с цинкуранил ацетатом (проба на Na⁺);

реакция с хлористоводородной кислотой (проба на CO₃^2–);

реакция с магния сульфатом (проба на HCO₃^–);

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

тритурации, дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование;

прямая потенциометрия;

натрия хлорид (NaCl)

подлинность: реакция с цинкуранил ацетатом (проба на Na⁺);

реакция с серебра нитратом (проба на Cl^–)^;

количественное определение:

субстанция – аргентометрическое определение по Мору;

тритурации, дилюции до Х3 – аргентометрическое титрование;

потенциометрическое титрование;

прямая потенциометрия;

магния сульфат (MgSO₄ ·7H₂O)

подлинность: реакция с натрия гидрофосфатом в аммиачном буфере (проба на Mg²⁺);

реакция с бария нитратом (проба на SO₄^2–);

количественное определение:

субстанция – комплексонометрическое титрование;

тритурации, дилюции до Х3 – аналогично;

кислота хлористоводородная (HCl)

подлинность: определение рН (проба на H⁺)

реакция с серебра нитратом (проба на Cl^–);

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование;

кислота уксусная (CH₃COOH)

подлинность: определение рН (проба на H⁺)

реакция со спиртом этиловым (проба на ацетат-ион);

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

тритурации, дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование;

прямая потенциометрия;

железа сульфат (FeSO₄ ·H₂O)

подлинность: реакция с калия гексацианоферратом (III) K₃[Fe(CN)₆] (проба на Fe²⁺);

реакция с бария нитратом (проба на SO₄^2–);

количественное определение:

субстанция – перманганометическое титрование;

тритурации, дилюции до Х3 – аналогично;

серебра нитрат (AgNO₃)

подлинность: реакция с хлористоводородной кислотой (проба на Ag⁺)

количественное определение:

субстанция – прямое тиоцианатометрическое титрование по Фольгарду;

тритурации, дилюции до Х3 – прямое тиоцианатометрическое титрование по Фольгарду;

прямая ионометрия;

железо металлическое (Fe)

получение: восстановление водородом из железа (II) оксида;

подлинность: растворение в серной кислоте и реакция на Fe²⁺ действием калия гексацианоферрата (III) K₃[Fe(CN)₆;

количественное определение:

субстанция – растворение в серной кислоте, затем перманганомет­рическое титрование;

тритурации до Х3 – аналогично.

Если препарат не является фармакопейным, то в качестве субстанций используют химические реактивы квалификации не менее «ч. д. а.». Их качество должно соответствовать ГОСТу на данный химический реактив и подтверждаться стандартными методиками.

Для примера можно привести следующие препараты:

цинк (Zn) марки «ч. д. а.» либо полученный электролизом раствора цинка сульфата;

подлинность: растворение без остатка в хлористоводородной кислоте;

количественное определение:

субстанция – комплексонометрическое титрование;

тритурации – комплексонометрическое титрование – до Х3;

фотоколориметричеси с дитизоном – до Х5;

серебро (Ag)

подлинность: растворение без остатка в азотной кислоте;

субстанция – растворение в азотной кислоте, затем прямое тиоцианатометрическое титрование по Фольгарду;

тритурации до Х3 – аналогично;

свинец (Pb)

подлинность: растворение без остатка в азотной кислоте;

количественное определение:

субстанция – растворение в азотной кислоте, затем комплексонометрическое титрование;

тритурации до Х3 – аналогично;

кислота азотная (HNO₃)

подлинность: определение рН (проба на H+)

реакция с железа сульфатом и серной кислотой (проба на NO^3–) или реакция с дифениламином (проба на NO^3–);

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование;

кислота серная (H₂SO₄)

подлинность: определение рН (проба на H⁺)

реакция с бария нитратом (проба на SO₄^2–);

количественное определение:

субстанция – кислотно-основное титрование;

дилюции до Х3 – кислотно-основное титрование;

потенциометрическое титрование.

В случае отсутствия соответствующих химических реактивов, субстанции получают особыми (специальными) методами. Например:

кальциум карбоникум, кальция карбонат (CaCO₃)

получение: белоснежные внутренние чешуйчатые кусочки разбитых раковин превращают в мелкий порошок;

подлинность: растворение в азотной кислоте и реакция с молибденовокислым аммонием (проба на Ca²⁺);

количественное определение:

субстанция, тритурации – не стандартизуются;

алюмина, обожжённый глинозём (Al₂O₃)

получение: из криолита или из раствора алюминиево-калиевых квасцов под действием аммиака;

подлинность: щелочное плавление, затем реакция с ализарином (проба на Al³⁺);

количественное определение:

субстанция, тритурации – не стандартизуются;

калия арсенит (KAsO₂·HAsO₂·H₂O)

получение: реакция мышьяковистого ангидрида с калия карбонатом;

подлинность: реакция с сероводородом, реакция с серебра нитратом (пробы на AsO₂^–);

количественное определение:

субстанция – иодометрически;

броматометрически;

тритурации до Х3 – иодометрически;

хлористое золото, тетрахлороаурат (III) водорода (H[AuCl₄]·H₂O)

получение: растворение золота в царской водке (смеси хлороводородной и азотной кислот);

подлинность: реакция с молочным сахаром и раствором формальдегида (проба на Au³⁺);

количественное определение:

субстанция, дилюции до Х6 – фотоколориметрически с толуиди­новым реактивом.

Контроль качества базисных гомеопатических препаратов из растительного сырья (эссенции, настойки) с целью их дальнейшей стандартизации также рекомендуется проводить по содержанию биологически активных веществ. Для этого используют:

• качественные реакции на основные группы биологически активных соединений;

• хроматографический анализ в различных системах растворителей;

• количественное определение инструментальными (газожидкостная хроматография, УФ- и ИК-спектрофотометрия, фотоколориметрия) и другими методами.

Широко распространёнными в растительном сырье классами соединений являются: алкалоиды, кардиотонические (сердечные) гликозиды, флавоноиды, сапонины, дубильные вещества, антраценпроизводные, кумарины, витамины, полисахариды и др. Для обнаружения основных групп биологически активных веществ (БАВ) в растительном сырье и препаратах наиболее часто используют цветные качественные реакции или реакции осаждения.

Алкалоиды обнаруживают следующими общими осадочными реакциями:

• с реактивом Майера (растворы ртути дихлорида и калия йодида) – бурый осадок;

• с реактивами Вагнера и Бушарда (растворы йода в растворе калия йодида) – бурый осадок;

• с реактивом Драгендорфа (раствор висмута нитрата основного, калия йодида и кислоты уксусной) – оранжево-красный или кирпично-красный осадок;

• с реактивом Марме (раствор кадмия йодида и калия йодида) – белый или желтоватый осадок;

• с реактивом Зонненшейна (раствор фосфорномолибденовой кислоты) – желтоватый осадок;

• с раствором кремневольфрамовой кислоты – беловатый осадок;

• с раствором пикриновой кислоты – жёлтый осадок;

• с раствором танина –беловатый или желтоватый осадок.

При определении кардиотонических гликозидов проводят цветные реакции на различные фрагменты молекулы:

на стероидную часть молекулы карденолида:

• реакцию Либермана-Бурхарда (ледяная уксусная кислота, уксусный ангидрид и концентрированная серная кислота) – на границе слоёв окраска от розовой до зелёной и синей;

• реакция Розенгейма (спиртовый раствор трихлоруксусной кислоты) – окраска от розовой до лиловой и синей;

на бутенолидное (лактонное) кольцо:

• реакция Раймонда (бензольный раствор м-динитробензола и спиртовый раствор калия гидроксида);

• реакция Легаля (растворы нитропруссида натрия и натрия гидроксида) – на границе слоёв красное окрашивание в виде кольца;

• на сахарный компонент:

• реакция Келлер-Килиани (ледяная уксусная кислота со следами железа сульфата и концентрированная серная кислота) – верхний слой окрашивается в васильково-синий цвет;

• реакция с реактивом Фелинга – оранжевый осадок после гидролиза.

Последняя из указанных реакций используется также для определения восстанавливающих сахаров.

Наличие флавоноидов устанавливают с помощью таких реакций:

• цианидиновая проба (порошок металлического магния и концентрированная хлороводородная кислота) – флавоны, флавонолы и флавононы дают красное или оранжевое окрашивание;

• борно-лимонная реакция – 5-оксифлавоны и 5-оксифлавонолы образуют ярко-жёлтое окрашивание с жёлто-зелёной флуоресценцией;

• реакция с трёххлористой сурьмой – 5-оксифлавоны и 5-оксифлавонолы дают жёлтое или красное окрашивание;

• реакции с раствором аммиака или спиртоводным раствором натрия (калия) гидроксида – флавоны, флавонолы, флавононы и флавононолы образуют жёлтое окрашивание, при нагревании переходящее в оранжевое или красное; халконы и ауроны дают сразу красное или пурпурное окрашивание;

• реакция с хлоридом окисного железа – при наличии полифенолов появляется зеленовато-синее окрашивание;

• реакция с раствором ванилина в концентрированной хлороводородной кислоте – катехины дают красно-малиновое окрашивание;

• реакция со средним ацетатом свинца – флавоны, халконы, ауроны, содержащие свободные ортогидроксильные группировки в кольце В, образуют осадки, окрашенные в ярко-жёлтый и красный цвета.

Для обнаружения сапонинов и установления их химической природы используют следующие реакции:

• проба на пенообразование (в присутствии кислоты и щёлочи) – равная по объёму и стойкости пена образуется в обеих пробирках при наличии тритерпеновых сапонинов; в случае содержания сапонинов стероидной природы в щелочной среде образуется пена в несколько раз больше по объёму и стойкости;

• реакция со спиртовым раствором холестерина – обе группы сапонинов образуют осадки;

• реакция с баритовой водой – обе группы сапонинов дают осадки;

• реакция с растворами ацетата свинца – тритерпеновые сапонины осаждаются средним ацетатом свинца, а стероидные – основным;

• реакция Либермана-Бурхарда – стероидные сапонины (как и сердечные гликозиды) дают окраску от розовой до зелёной и синей;

• реакция Лафона (раствор меди сульфата и концентрированная серная кислота) – при нагревании появляется сине-зелёное окрашивание;

• реакция Сальковского (хлороформ и концентрированная серная кислота) – наблюдается появление окраски от жёлтой до красной;

• реакция с пятихлористой сурьмой (хлороформный раствор) – появляется красное окрашивание, переходящее в фиолетовое;

• реакция с раствором натрия нитрата (в присутствии концентрированной серной кислоты) – ярко-красное окрашивание;

• реакция с ванилином (спиртовый раствор) и концентрированной серной кислотой – появляется красное окрашивание, при разбавлении водой тритерпеноиды образуют синие хлопья.

Наличие кумаринов можно обнаружить с помощью:

• реакции со щёлочью и диазотированной сульфаниловой кислотой – при нагревании с раствором калия гидроксида раствор желтеет, а после добавления диазотированной сульфаниловой кислоты окраска изменяется от коричнево-красного до вишнёвого цвета;

• лактонной пробы: после нагревания препарата со спиртовым раствором калия гидроксида, разбавления водой очищенной и добавления хлороводородной кислоты помутнение или выпадение осадка указывает на вероятное наличие кумаринов.

Обнаружение дубильных веществ проводят следующими качественными реакциями:

• с раствором желатина – образование мути;

• с раствором хинина гидрохлорида – аморфный осадок;

• с растворами железо-аммониевых квасцов или хлорида окисного железа появляется окрашивание: чёрно-синее – при наличии гидролизуемых дубильных веществ, и чёрно-зелёное – в присутствии конденсированных;

• с бромной водой – при наличии конденсированных дубильных веществ сразу образуется осадок;

• с раствором средней соли свинца ацетата в уксуснокислой среде – осадок выпадает при наличии гидролизуемых дубильных веществ; при добавлении к фильтрату раствора железо-аммониевых квасцов и кристаллического натрия ацетата в присутствии конденсированных дубильных веществ появляется чёрно-зелёное окрашивание;

• с кристаллическим натрия нитратом в присутствии хлороводородной кислоты – при наличии гидролизуемых дубильных веществ появляется коричневое окрашивание.

Другие классы соединений определяют отдельными специфическими качественными реакциями, описание которых изложено в методических материалах по химическому анализу лекарственных растений (Гринкевич Н. И., Сафронич Л. Н., М, 1983; Ковалёв В. Н., Солодовниченко Н. М., Харьков, 1987).

Для хроматографического анализа алкалоидов используют следующие системы растворителей:

а) для хроматографии на бумаге: н-бутанол – уксусная кислота – вода (5:1:4); этилацетат – уксусная кислота – вода (11:21:85); н-бутанол, насыщенный водой – ледяная уксусная кислота (100:5) и др.;

б) для тонкослойной хроматографии: хлороформ – ацетон – диэтиламин (5:4:1); хлороформ – диэтиламин (9:1); хлороформ – метанол – уксусная кислота (18:1:1); хлороформ – этанол (9:1) или (8:2); ацетон – раствор аммиака (95:5).

Проявителями для хроматограмм служат реактив Драгендорфа, пары йода, хлороформный раствор сурьмы трихлорида.

Обнаружение кардиотонических (сердечных) гликозидов методами ТСХ и хроматографии на бумаге проводят в системах: хлороформ – ацетон – вода (84:15:0,7); хлороформ – бензол – н-бутанол (78:12:5); этилацетат – бензол – вода (84:16:50); бензол – хлороформ (9:1), (7:5) или (3:7).

Для проявления хроматограмм используют реактивы Раймонда (растворы м-динитробензола и калия гидроксида спиртовый) или Йенсена (25%-хлороформный раствор трихлоруксусной кислоты).

Для обнаружения флавоноидов методом хроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента рекомендуемые системы растворителей: 15% уксусная кислота; н-бутанол – уксусная кислота – вода (4:1:2); этилацетат – муравьиная кислота – вода (70:15:17) или (10:2:3); метанол – уксусная кислота – вода (18:1:1) и др.

В качестве проявителей используют: 1% спиртовый раствор алюминия хлорида, 10% спиртовый раствор натрия (калия) гидрооксида, пары аммиака в УФ-свете и т. д.

Дубильные вещества методом ТСХ чаще всего анализируют в системе: н-бутанол – уксусная кислота – вода (40:12:28) и обрабатывают 1% раствором ванилина в концентрированной хлороводородной кислоте.

Хроматографирование сапонинов в тонком слое сорбента проводят в системах бензол – метанол (8:2); хлороформ – метанол – вода (61:32:7); изопропанол – вода – хлороформ (30:10:5); хлороформ – метанол (3:1); н-бутанол – этанол – 25% раствор аммиака (7:2:5) и др.

Проявление хроматограмм проводят соответственно парами йода, 20% раствором серной кислоты и 10% спиртовым раствором фосфорновольфрамовой кислоты.

Для анализа кумаринов предлагают такие системы растворителей:

а) для хроматографии на бумаге: петролейный эфир – бензол – метанол (5:4:1);

б) в тонком слое: бензол – этилацетат (2:1); ацетон – гексан (2:8); гексан – бензол – метанол (5:4:1).

Обработку хроматограмм проводят 10% раствором калия гидроксида и диазотированной сульфаниловой кислотой.

Кроме того, методами хроматографии обнаруживают такие классы химических соединений:

каротиноиды – системы: хлороформ – ацетон (9:1); бензол – метанол (1:1) и др.; реактивы для проявления хроматограмм – 10% спиртовый раствор фосфорномолибденовой кислоты, пары йода;

антраценпроизводные – системы: этилацетат – муравьиная кислота – вода (10:2:3), этилацетат – метанол – вода (100:17:13); реактив для проявления хроматограмм – 5% спиртовый раствор гидроксида калия (натрия);

аминокислоты – системы: бутанол – уксусная кислота – вода (4:1:1), этанол – вода (95:5), изопропанол – аммиак – вода (10:1:1), изопропанол – уксусная кислота – вода (7:2:1), н-бутанол – муравьиная кислота – вода (75:15:10); реактив для проявления хроматограмм – 0,2% спиртовый или бутанольный раствор нингидрина.

Примеры хроматограмм в тонком слое и на бумаге приведены на рисунке.

Примеры схем хроматографии флавоноидов:
а) – круговая бумажная хроматография: 1–эссенция туи; 2–тинктура из эссенции; 3–тинктура из свежего сырья; 4–тинктура из сухого сырья; 5–разведение Х2 из тинктуры (из эссенции); 6–разведение Х3 из тинктуры (из свежего сырья); 7–разведение Х3 (тинктура из сухого сырья); 8–гранулы Х3 (тинктура из свежего сырья);			б) – хроматография в тонком слое сорбента: 1–эссенция; 2–тинктура из эссенции; 3–тинктура из свежего сырья; 4–тинктура из сухого сырья;
	Система: 15% уксусная кислота; Проявители: пары аммиака, спирто-водный раствор калия гидроксида, УФ-свет

Количественное содержание БАВ в матричных настойках и других базисных препаратах в частных статьях фармакопей зарубежных стран указывается лишь в редких случаях, в частности при анализе настоек, содержащих ядовитые и сильнодействующие вещества (аконит, строфант, чилибуха, игнация, белладонна и др.).

В нормативные документы, предназначенные для гомеопатической фармакопеи Российской федерации, включены современные методы анализа, позволяющие осуществлять контроль качества гомеопатических лекарственных средств с учётом содержания БАВ.

Для этой цели можно использовать газожидкостную хроматографию, спектрофотометрию, фотоколориметрию и другие инструментальные методы, в некоторых случаях целесообразно использовать титриметрические методы анализа.