Робота 9 Визначення групи крові за системою аво за допомогою стандартних сироваток

Мета роботи - визначити групу крові за системою АВ0.

Для роботи потрібні: планшети для визначення груп крові, піпетки, предметне скло, кров обстежуваного, стандартні сироватки,ізотонічний розчин натрію хлориду.

Хід роботи

• Нанести на поверхню планшета у відповідний сектор по одній (0,1 мл) краплі стандартних сироваток І, ІІ,ІІІ груп

• Простежити, щоб не було бризок до сусідніх секторів.

• Одну краплю досліджуваної крові за допомогою піпетки помістити на сухому предметному склі.

• Куточками другого сухого предметного скла перенести частину крові (0,01 мл) в кожну краплю сироватки. Куточки скла для різних сироваток мають бути різними.

• Кров одразу розмішати з краплею сироватки цим самим куточком предметного скла. Співвідношення крові й сироватки повинно бути 1:10 ( змішана крапля має слабко-рожеве забарвлення).

• Спостереження за перебігом реакції провести, похитуючи планшет протягом 5 хв.

Оцінка результатів та контроль

1 Аглютинація відсутня в усіх краплях сироваток. Отже, можна припустити, що досліджувані еритроцити не містять антигенів А і В, а кров належить до групи І (0, αβ).

2 Аглютинація відбулася з сироватками І і ІІІ груп. Отже, можна припустити, що досліджувана кров, власне, її формені елементи містять лише антиген А, і кров належить до групи ІІ ( А, β).

3 Аглютинація відбулася з сироватками І і ІІ груп. Отже, можна припустити, що досліджувані еритроцити містять лише антиген В, і кров належить до групи ІІІ ( В, α).

4 Аглютинація еритроцитів спостерігається в усіх краплях сироваток. Отже, можна припустити, що досліджувані еритроцити містять обидва антигени – А і В, а кров належить до групи ІV( АВ-). У цьому випадку нанести на планшет сироватку ІV групи, змішати її з кров’ю і за відсутності аглютинації віднести кров до ІV групи.

Рекомендації щодо оформлення результатів роботи Описати у формі пропонованої таблиці результати реакції аглютинації з сироватками різних груп :

Сироватка Кров	І (αβ)	ІІ (β)	ІІІ (α)	ІV (-)
І (0)	–	–	–	–
ІІ ( А)	+	–	+	–
ІІІ ( В)	+	+	–	–
ІV( АВ)	+	+	+	–

У висновках відповісти на таке запитання:

Про що свідчить наявність/відсутність аглютинації досліджуваної крові з сироватками різних груп?

Робота 10 Визначення групи крові за системою СДЕ за допомогою методу Зотикова – Донського

Мета роботи визначити групову належність крові за системою СДЕ.

Для роботи потрібні: біла фарфорова тарілка, 4 марковані піпетки, предметне скло, кров досліджуваного, стандартні резус-позитивні - Rh(+), стандартні резус-негативні - Rh(-) еритроцити, стандартна антирезусна сироватка, олівець-склограф.

Хід роботи

• Поділити тарілку склографом на дві половини.

• На одну половину тарілки нанести одну краплю стандартної антирезусної сироватки, зробити її плоскою (діаметром не менше ніж 2 см).

• Кров обстежуваного помістити на предметне скло, а куточком другого предметного скла перенести частину крові в краплю сироватки і розмішати. Співвідношення крові і сироватки повинно бути 1:10.

• Тарілку похитати.

• Можливі два варіанти реакції.

1 Якщо аглютинація відбудеться, то це означатиме, що в крові є антигени системи СДЕ, тобто кров резус-позитивна. Щоб підтвердити це, треба проконтролювати сироватку.

На другу половину тарілки нанести 2 краплі сироватки і за допомогою предметних стекол розмішати в них стандартні еритроцити Rh(+) і Rh(-).Якщо аглютинації не буде в краплі з Rh(-) еритроцитами, а буде з Rh(+) еритроцитами, то це означатиме, що сироватка реагує добре. Отже, результати дослідження свідчать, що кров має антигени системи СДЕ.

2 Якщо аглютинації у краплі немає, то після проведеного контролю можна стверджувати, що кров не має антигенів системи СДЕ. Тобто вона резус – негативна.