11.9. Обеззараживание микробиологической лаборатории

Обеззараживание микробиологической лаборатории необходимо проводить с большой тщательностью. В этих случаях обеззараживание может состоять в дезинфекции рабочих поверхностей, обеззараживании оборудования, чтобы с ним было безопасно работать, или оно может потребовать стерилизации. Вне зависимости от метода цель обеззараживания состоит в защите сотрудников лаборатории, окружающей среды и любого, кто входит в лабораторию или работает с лабораторными продуктами за пределами лаборатории. Дополнительные выгоды связаны с уменьшением возможности перекрестного загрязнения в лаборатории.

Обеззараживание и чистка

Обеззараживание делает участок, устройство, предмет или материал безопасным в обращении (то есть, безопасным в том смысле, что он практически не создает риска передачи инфекции). Основная задача состоит в снижении уровня микробиологического загрязнения настолько, чтобы устранить возможность передачи инфекции. Процесс обеззараживания может состоять в простой мойке водой с мылом инструментов, устройств или участка. В лабораторных условиях обеззараживание предметов, отработанного лабораторного материала и регламентированных лабораторных отходов часто осуществляется с помощью операции стерилизации типа обработки паром в автоклаве, которая, наверное, является самым экономичным способом обеззараживания устройств и предметов. Присутствие любого органического вещества требует большего времени выдерживания в методе обеззараживания, если предмет или участок не был предварительно очищен. Например, цикл обработки паром, используемый для стерилизации предварительно очищенных предметов, составляет 20 мин при 121 °C. При использовании стерилизации паром для стерилизации предметов с высоким содержанием биологического материала, для которых не проводили предварительной очистки (то есть, инфекционных отходов), цикл оказывается длиннее. Обеззараживание в лабораторных условиях часто требует больших времен воздействия, поскольку патогенные микроорганизмы могут быть защищены от контакта с обеззараживающими факторами. Химические бактерицидные средства, используемые для обеззараживания, различаются своей активностью в диапазоне от мощных дезинфицирующих средств (то есть, высокая концентрация гипохлорита натрия [хлорный отбеливатель]), которые можно использовать для обеззараживания разливов культуры возбудителя инфекции или концентрированного возбудителя в исследовательской либо клинической лаборатории, до слабых дезинфицирующих средств и средств для санитарной обработки, предназначенных для общей уборки или обеззараживания малых участков внешних поверхностей вучреждениях здравоохранения. Устойчивость некоторых микроорганизмов к обеззараживанию приведена в уменьшающемся порядке в табл. 1. Если в лаборатории присутствуют опасные и очень инфекционные возбудители, то методы обеззараживания разливов, лабораторного оборудования, БШБ и инфекционных отходов становятся очень важными и могут включать длительные циклы обработки в автоклаве, сжигание или обработку поверхностей газом (см. ниже).

Таблица 1. Устойчивость к химическим бактерицидным средствам в порядке ееуменьшения

СПОРЫБАКТЕРИЙ

Bacillussubtilis, Clostridiumsporogenes

⇓

МИКОБАКТЕРИИ

Mycobacteriumtuberculosisvar. bovis, Nontuberculousmycobacteria

⇓

НЕ СОДЕРЖАЩИЕ ЛИПИДОВ ИЛИ МАЛЫЕ ВИРУСЫ

Poliovirus, Coxackievirus, Rhinovirus

⇓

ГРИБЫ

Trichophytonspp., Cryptococcus spp., Candida spp.

⇓

ВЕГЕТАТИВНЫЕБАКТЕРИИ

Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella choleraesuis, Enterococci

⇓

СОДЕРЖАЩИЕ ЛИПИДЫ ВИРУСЫ ИЛИ ВИРУСЫ СРЕДНЕГО РАЗМЕРА

Herpes simplex virus, Cytomegalovirus, Respiratory syncytial virus, HBV,

HCV, HIV, Hantavirus, Ebola virus

ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЕБОЛЬШИХПЛОЩАДЕЙ

Обеззараживание площадей относится к особым видам деятельности, и его должны проводить специалисты, имеющие соответствующую подготовку и защитные средства. Требования к обеззараживанию для лабораторных площадей в УББ-3 оказывает влияние на

проектирование этих помещений. Внутренние поверхности лаборатории УББ-3 должны быть

устойчивыми к воде, чтобы их можно было легко мыть и обеззараживать. Пролеты в этих поверхностях должны быть герметизированы или подготовлены для герметизации при обеззараживании. Поэтому в лаборатории УББ-3основным средством обеззараживания площадей служит обеззараживание поверхностей, а не фумигация. Необходимо следить, чтобы свести к минимуму проемы в стенах, поле и потолке и чтобы они были "герметизированы в свету". Для большинства лабораторий BSL-3 проверка герметизации обычно не требуется. Проектирование лаборатории BSL-2требует использования внутренних поверхностей, устойчивых к воде.

Формальдегид–параформальдегид

Для обеззараживания площадей часто используют газообразный формальдегид с концентрацией 0,3 г/фут3 в течение четырех часов. Газообразный формальдегид можно получать нагреванием параформальдегида в хлопьях (0,3 г/фут3) на жаровне и переводе его таким способом в газообразный формальдегид. Необходимо регулировать влажность, и система оптимально работает при относительной влажности 80 %. Этот метод позволяет эффективно убивать микроорганизмы, но при этом возникают проблемы токсичности.

Пары пероксида водорода

Пероксид водорода можно испарять и использовать для обеззараживания перчаточного бокса, а также помещений небольшой площади. Было показано, что пероксид водорода в паровой фазе эффективно убивает споры при концентрации в интервале от 0,5 до <10 мг/л. Оптимальная концентрация этого вещества составляет 2,4 мг/л при времени контакта не менее одного часа. Эту систему можно использовать для обеззараживания перчаточных боксов, проходов в инкубаторах и небольших помещений. Преимущество этой системы связано с тем, что конечный продукт (то есть, вода) не токсичен. Можно использовать низкую относительную влажность.

ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЕ ПОВЕРХНОСТЕЙ

Жидкие химические бактерицидные средства, приготовленные как дезинфицирующие

средства, можно использовать для обеззараживания больших площадей. Обычная методика состоит в заливке площади дезинфицирующим средством на срок до нескольких часов. Такой подход неаккуратный, и при его использовании для некоторых дезинфицирующих средств возникает токсическая опасность для сотрудников лаборатории. Например, большая часть "мощных" дезинфицирующих средств на рынке составлена с целью их использования для инструментов и медицинских устройств, а не для внешних поверхностей. Промежуточные и слабые дезинфицирующие средства составлены с целью применения для формитов и внешних поверхностей, но они не обладают возможностями мощных дезинфицирующих средств. Большую часть промежуточных и слабых дезинфицирующих средств можно безопасно использовать, но, как и для всех дезинфицирующих средств, необходимо строго следовать инструкциям изготовителя.

Используемые для обеззараживания дезинфицирующие средства содержат раствор гипохлорита натрия в концентрации от 500 до 6000 частей на миллион (млн-1), обладающие окислительным действием дезинфицирующие средства типа пероксида водорода и надуксусную кислоту, фенолы йодофоры.

Концентрации и времена воздействия меняются в зависимости от состава и инструкций

изготовителя для применения. Перечень химических бактерицидных средств и уровней их активности приведен в табл. 2. В лаборатории должен быть разработан план борьбы с разливами. В этом плане должны быть приведены критерии для выбора дезинфицирующего средства, методика его применения, время контакта и другие параметры. Средства, требующиеся при предотвращении распространения типа BSL-3, создают большой риск для сотрудников и, возможно, для окружающей среды, и их должны применять хорошо информированные и квалифицированные люди, подготовленные и оборудованные для работы с концентрированными материалами.

Дезинфектанты- химикат или смесь химикатов, используемых для уничтожения микроорганизмов:

• Применяются для обеззараживания поверхностей, предметов и жидкостей;

• Имеют первостепенную важность для работы с клиническими материалами и культурами микроорганизмов.

• Используемые в ТБ лаборатории дезинфектанты должны уничтожать МТБ;

• На коммерческих продуктах должна стоять пометка «туберкулоцидное средство».

4. главных типа дезинфектантов: 1)Фенолы; 2)Гипохлориты (хлорка); 3)Спирты; 4)Глютаральдегиды.

Использование феноловыхдезинфектантов:

- В специальных контейнерах для отходов:

- Для сбора надосадочных жидкостей;

-Для сбора контаминированных инструментов;

-Деконтаминация поверхностей;

-Очистка проливов, как малых так и больших, внутри и вне БББ.

Для того, чтобы феноловые дезинфектанты были эффективными в работе - дезинфектант следует оставить в контакте с микроорганизмами минимум на 15 минут для их уничтожения. Во многих коммерчески доступных дезинфектантах используются соединения фенола.

-Некоторые из этих соединений инактивируются жесткой водой и их следует разбавлять дистиллированной или деионизированной водой;

• Проверьте, стоит ли на контейнере пометка о том, что препарат туберкулоцидный

Фенол - едкое и сильно раздражающее кожу, глаза и слизистые оболочки вещество

• При обращении с кристаллами фенола следует надевать перчатки

• Если раствор расплескался, лужу следует немедленно осторожно промокнуть и вытереть

• Два основных способа употребления кристаллов фенола в ТБ лаборатории

  • Для приготовления 2-5% раствор дезинфектанта (карболки)

  • В качестве ингредиента для карбол-фуксина для окрашивания мазков по Циль-Нильсену

• Карболка должна готовиться ежедневно (дата приготовления должна указываться на резервуаре с раствором)

Использование хлорныхдезинфектантов:

- В специальных контейнерах для отходов ; для сбора надосадочных жидкостей ;для сбора контаминированных инструментов; деконтаминация поверхностей

Для того, чтобы феноловые дезинфектанты были эффективно уничтожали МТБ

• Дезинфектант следует оставить в контакте с микроорганизмами минимум на 15 минут для их уничтожения.

• Раствор нужно готовить ежедневно, так как испарение хлора уменьшает его активность

• Конечная концентрация раствора хлорки должна быть не менее 0.5%

Проверьте общую концентрацию хлора на контейнере. Обычно концентраты бывают 4-5%. Можно также использовать для определения концентрации специальные стрипы.

Даже в разведенном состоянии хлорка раздражает кожу и ОЧЕНЬ коррозийна по отношению к пластиковым и металлическим поверхностям (ШББ, центрифуги, автоклавы, пипетки). После обработки подобных поверхностей хлоркой : промойте поверхность водой или 70% спиртом после дезинфекции хлоркой в течение как минимум 15 минут.

ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ЗДОРОВЬЯ: Газообразный хлор, испаряющийся из раствора, крайне токсичен: контейнеры из-под хлорки НЕЛЬЗЯ автоклавировать . Хранить хлорку следует только в хорошо вентилируемых помещениях.

Спирты используются как дезинфектанты

• Для деконтаминации кожи и рабочих поверхностей

• Денатурированный спирт разводится и используется в концентрации 70%

Безопасен для применения на металлических поверхностях (ШББ, центрифуги, другое оборудование). Главное преимущество: некоррозийны, не оставляют следов на обработанных поверхностях. Очень летучие: абсорбент, смоченный 70% спиртом, сохраняет дезинфекционную активность только в течение 20 минут. Правильное использование спиртов в ТБ лаборатории : как дезинфектант для поверхностей (70%) ; в спиртовках; для обесцвечивания мазков. Ограничьте объёмы хранимого в лаборатории спирта, попадание его в организм может привести к летальному исходу.

Спирты летучи и горючи

• Летучие вещества – должны храниться в подходящих контейнерах для предотвращения испарения

• Горючие вещества – не должны использоваться вблизи открытого огня

• Бутылки со спиртами должны правильно маркироваться и не автоклавироваться