5.2. Визначення білка з біуретовим реактивом
Метод заснований на утворенні забарвленого в бузковий колір комплексу в наслідок взаємодії пептидних зв’язків білків з іонами двовалентної міді в лужному середовищі. За цим методом визначенню білків заважає присутність солей амонію. Цей метод частіше використовують як якісну реакцію на наявність білків у розчині.
5.3. Визначення білау по адсорбції барвником
Метод заснований на вимірюванні інтенсивності забарвлення розчину після адсорбції білками частини барвника та їх осадженні у присутності лимонної кислоти. В якості барвника використовують оранж-Ж і оранж-12 (в 100 см3 розчину барвника міститься 0,1 г оранжу Ж, 2,1 г лимонної кислоти і 0,25 см3 10%-вого спиртового розчину тимолу).
За допомогою даного методу швидко визначається вміст білка в розчині при достатньому репродукуванні результатів і високим коефіцієнтом кореляції з методом К’єльдаля.
5.4. Визначення нітратного і нітритного азоту
Вміст нітратного і нітритного азоту в продуктах харчування повинен строго контролюватися, оскільки збільшення його вмісту вище встановленої норми може привести до отруєння людини.
Для визначення вмісту нітратів і нітритів існують арбітражні методи, методи поточних досліджень.
Арбітражні методи передбачають відновлення нітратів до нітриту на колонці з кадмієм з подальшим фотометричним вимірюванням інтенсивності забарвлення, що утворюється при взаємодії нітриту з сульфаніламідом і N-(1-нафтил)-этилендіамін-дегідрохлоридом. При необхідності визначення тільки нітратів нітрити видаляють кип'ятінням з еталоном в кислому середовищі і подальшим відновленням нітратів на кадмієвій колонці з колориметруванням отриманих нітратів.
5.5. Іонометричний експрес-метод визначення нітратного азоту
Метод заснований на вимірюванні концентрації нітрат-іона іоноселективним електродом в сольовій суспензії 1%-го розчину алюмокалієвого галуну при співвідношенні 1:4 для сирого рослинного матеріалу.
Прилади, які використовуються - іономір „И-120” або „И-115м”; іоноселективний нітратний електрод „ЕМ- NO3-01”; електрод порівняння - хлорсрібляний насичений електрод типу „ЭВЛ-1МЗ”. Проводиться спеціальна підготовка електродів до аналізу – вимірювання концентрації іонів нітрату за відповідним методиками, а також підготовка проб для аналізу. Хлорсрібний електрод порівняння зберігають в розчині 10-1М КNO3. Перш ніж приступити до вимірювання, електрод поміщають на 10 хв. у дистильовану воду, потім обсушують його фільтрувальним папером і вимірюють потенціал в трьох розчинах порівняння КNO3 (10-4М, 10-3М і 10-2 М). Якщо характеристика електроду відрізняється від заданої, то електрод знаходиться в неробочому стані.
У проміжках між роботою нітратний мембранний електрод „ЭМ- NO3-01” зберігають в розчині концентрацією 10-1М КNO3. При тривалій перерві в роботі (більше двох днів) електрод зберігають на повітрі.
Підготовка проб для аналізу. Сирий рослинний матеріал подрібнюють і після відбору середньої проби беруть наважку масою 12,5 г, поміщають в стакан гомогенізатора, підливають 50 см3 1%-го розчину алюмокалієвого галуну і гомогенізують 1 хв. при 6000 об/хв. За відсутності гомогенізатора наважку розтирають в ступці до однорідної маси.
Проведення аналізу і виконання вимірювань. Градуювання іонометра вказане в інструкції до приладу. Закінчивши градуювання приладу в розчинах порівняння, електроди занурюють у випробовуваний розчин і знімають показання. Протягом робочого дня градуювання приладу періодично повторюють по розчинах порівняння.
Набуті значення С NO3, переводять в мг/кг N-NО3.
По величині рСNO3 в досліджуваних об'єктах знаходять вміст нітратного азоту (мг/кг або мг/л) за формулою
(1)
де X - вміст N-NO3 в аналізованому матеріалі, мг/кг;
14 - атомна маса азоту, г;
B - об'єм розчину, який екстрагують, см3;
Н - наважка аналізованої речовини, г;
103 - коефіцієнт перекладу, мг;
-pNO3- від’ємний логарифм концентрації іона нітрату –
–(–log CN–NO3), тобто CN–NO3=10-pNO3.
При необхідності перерахунку результатів на абсолютно суху речовину використовують формулу
(2)
де X1 - вміст N-NO3, мг/кг сухої речовини;
X - вміст N-NO3 в аналізованому матеріалі, мг/кг;
W - вологість матеріалу, %;
100 - коефіцієнт перерахунку, %.
Допустима точність вимірювання нітратним іоноселективним електродом складає 0,5 pN03.