Ситуационная задача № 5
1. В аналитическую лабораторию Центра сертификации лекарственных средств для получения сертификата качества поступил образец растительного сырья «Трава горца птичьего (спорыша)», фасованная в пачки по 100 г.
Какие методы фармакогностического анализа используются для подтверждения подлинности и качества травы спорыша?
Какие товароведческие показатели свидетельствуют о степени чистоты сырья и о нарушении правил его заготовки?
Предложите и обоснуйте методику количественного определения действующих веществ данного сырья.
Дайте рекомендации по применению травы горца птичьего. Какие еще виды лекарственного растительного сырья аналогичного действия вы можете предложить?
Ответ.
Трава спорыша (горца птичьего) – Herba polygoni avicularis
Спорыш (горец) птичий -Polygonum aviculare
Сем. Гречишные - Polygonaceae
Для подтверждения подлинности и качества ЛРС свидетельствуют следующие показатели, утвержденные ГФ: цельные или частично измельченные олиственные побеги длиной до 40 см. Стебли тонкие, ветвистые, цилиндрические, коленчатые. Листья простые, очередные, короткочерешковые, цельнокрайние, различные по форме, широколопатчатые или широкоэллиптические, обратнояйцевидные, реже узкопродолговатые или почти линейные, тупые или островатые, длиной до 3 см, шириной до 1 см. У основания листьев находятся два прилистника, сросшиеся в раструб. Раструбы серебристо-белые, пленчатые, рассеченные. Цветки расположены в пазухах листьев по 1-5. Околоцветник глубоко надрезанный почти до 2/3, пятичленный. Цвет листьев и стеблей зеленый или сизовато-зеленый, околоцветника в нижней части - бледно-зеленый, в верхней - белый или розовый. Запах слабый. Вкус слегка вяжущий.
Подлинность: Около 1 г измельченного сырья кипятят в течение 5 мин с 20 мл 70% спирта и фильтруют через бумажный фильтр. К 5 мл фильтрата прибавляют 3 мл 2% спиртового раствора алюминия хлорида; появляется желто-зеленое окрашивание (флавоноиды).
Какие товароведческие показатели свидетельствуют о степени чистоты сырья и о нарушении правил его заготовки?
Показатели чистоты: суммы флавоноидов в пересчете на авикулярин не менее 0,5%; влажность не более 13%; золы общей не более 13%; побуревших и почерневших частей травы не более 3%; корней не более 2%; органической примеси не более 2%; минеральной примеси не более 2%.
Нарушение сроков заготовки ведет к увеличению побуревших и почерневших частей травы.
Предложите и обоснуйте методику количественного определения действующих веществ данного сырья.
Количественное определение. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 150 мл, прибавляют 30 мл 70% спирта, колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры под струёй холодной воды и фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. Экстракцию повторяют еще 2 раза указанным выше способом. Объединенные извлечения повторно фильтруют через тот же фильтр в ту же мерную колбу, фильтр промывают 70% спиртом и доводят объем фильтрата тем же спиртом до метки (раствор А).
4 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл 2% раствора алюминия хлорида в 95% спирте и доводят объем раствора 95% спиртом до метки; через 20 мин измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют следующий раствор: 4 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 каплю разведенной хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора 95% спиртом до метки.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на авикулярин и абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = |
D • 100 • 100 • 25 |
|
|
330 • m • (100 - W) |
где D - оптическая плотность испытуемого раствора; 330 - удельный показатель поглощения комплекса авикулярина с алюминия хлоридом при 410 нм; m - масса сырья в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах.
Дайте рекомендации по применению травы горца птичьего. Какие еще виды лекарственного растительного сырья аналогичного действия вы можете предложить?
Лекарственные средства.
1. Спорыша (горца птичьего) трава, сырье измельченное. Способствующее отхождению мочевых конкрементов, противовоспалительное средство.
2. Входит в состав сбора для приготовления микстуры по прописи М.Н. Здренко; желчегонного, гепатопротекторного сбора «Гепафит».
3. Экстракт входит в состав препарата «Фитолизин».
Диуретическое, уролитическое средство. Спорыш оказывает вяжущее и мочегонное, противовоспалительное и антимикробное действие за счет дубильных веществ. Гликозид авикулярин повышает скорость свертывания крови, не изменяя вязкости крови, и оказывает тонизирующее влияние на мускулатуру матки. Галеновые формы растения оказывают вяжущее, кровоостанавливающее, противовоспалительное и антимикробное действие, защищая слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта от раздражающих воздействий. Настой спорыша повышает диурез, уменьшая обратное всасывание натрия и хлора, что увеличивает выделение воды. Кремниевая кислота способствует уплотнению, петрификации туберкулезных очагов и более быстрому их заживлению. В этом случае учитываются и кровоостанавливающие свойства спорыша.
Препараты травы горца птичьего применяют в качестве противовоспалительного, мочегонного и способствующего отхождению конкрементов средства при мочекаменной болезни. Настой травы применяют при туберкулезе почек и легких, при кровотечениях, хронических воспалительных заболеваниях.
ЛРС аналогичного действия: стальник полевой, можжевельник обыкновенный, хвощ полевой.
2. Пользуясь нормативной документацией, охарактеризуйте субстанцию глюкозы:
1) приведите русское, латинское, международное непатентованное наименование вещества; укажите химическую классификацию вещества, назовите функциональные группы;
2) обоснуйте физико-химические свойства в соответствии с составом и химическим строением вещества;
3) назовите методы определения примесей, напишите уравнения реакций для примесей, определяемых унифицированными методиками;
4) напишите уравнения реакций подлинности, указанных в нормативной документации; предложите другие методы идентификации вещества;
5) предложите и обоснуйте методы количественного определения, приведите химизм реакции.
1) Русское название: Глюкоза
Латинское название: Glucosum
Химическое название: α-D-глюкопираноза
Углевод, применяемый при различных заболеваниях сердца, печени, шоке, коллапсе.
Физико-химические свойства: белый, мелкокристаллический порошок без запаха, сладкого вкуса. Удельное вращение от +52 до +53° (10% раствор в воде), легко растворим в воде, слабо растворим в этаноле. Для идентификации используют сравнение с рисунком ИК-спектра, прилагаемого к НД, а также по совпадению пиков оптической плотности с указанными в ФС значениями длин волн.
2) Глюкоза является довольно реакционноспаособным веществом. Восстановительные свойства глюкозы связаны с наличием в молекуле полуацетального гидраксила.
Подлинность.
Для потверждения наличия глюкозы в растворах используют реакцию с реактивом Фелинга (раствор Фелинга №1 – меди II сульфат; раствор Фелинга №2 – натрия гидроксид и калия-натрия тартрат):
Также возможна идентификация оксиметилфурфурола (последний образуется непосредственно из глюкозы под воздействием температуры и концентрированных минеральных кислот):
Колличественное определение.
Из химических методов используется титрование в водной среде – метод йодометрии в щелочной среде (создание среды является необходимым условием для данного вида анализа):
Титрование обратное, т.к. диспропорционирование йода на йодиды и гипойдиты и окисление глюкозы протекает во времени. Избыток йода можно оттитровать натрия тиосульфатом после нейтрализации среды (при помощи разведённой серной кислоты, например).
Из инструментальных методов для субстанции глюкозы и её растворов широко используется поляриметрия (измерение угла вращения поляризованного света оптически активным веществом в растворе); расчёт концентрации производится по формуле с использованием значения удельного вращения вещества:
3. Аптека получает лекарственный растительный препарат «Горца птичьего (спорыша) трава», фасованная в пачки по 100 г. от регионального дистрибьютора. Какому уровню канала товародвижения это соответствует? Какие другие каналы товародвижения могут быть использованы при доведении данного товара от производителя до конечного потребителя?
Какие субъекты фармацевтического рынка участвуют при доведении товара до потребителя?
Какие сопроводительные документы должны быть проверены материально-ответственным лицом аптеки при приемке товара от поставщика?
Поясните, в чем отличия понятий «лекарственное растительное сырье» и «лекарственный растительный препарат»? Каким нормативным правовым документом Вы воспользуетесь при ответе на данный вопрос?
Какому уровню канала товародвижения это соответствует? Какие другие каналы товародвижения могут быть использованы при доведении данного товара от производителя до конечного потребителя?
Это соответствует прямому каналу товародвижения, т.к. он заключается в перемещении товаров от производителя к потребителю без посредников. Прямые каналы не имеют посредников, поэтому их называют каналами нулевого уровня.
Существует еще косвенные каналы, включающие различное число посредников. Количество посредников, участвующих в товародвижении от производителя до конечного потребителя, определяет уровень канала. Например,
производитель – дистрибьютор – аптека (одноуровневый канал),
производитель - дистрибьютор 1 – дистрибьютор 2 – аптека (двухуровневый канал).
Ответ.
Какие субъекты фармацевтического рынка участвуют при доведении товара до потребителя?
Производитель, зная затраты, непосредственно связанные с изготовлением конкретного вида продукции, добавляет к ним определенную долю косвенных затрат, распределяемых между всеми видами продукции (например, по аренде помещений, оборудования, коммунальных платежей и др.) и устанавливает желаемую величину рентабельности. Кроме того, в структуру цены включаются отдельные виды налогов (например, НДС), акцизы (взимаемые с отдельных видов продукции, например, спиртосодержащей).
Какие сопроводительные документы должны быть проверены материально-ответственным лицом аптеки при приемке товара от поставщика?
Поставщик при отгрузке товара выписывает аптечной организации:
расчетные документы - счета, платежные требования;
товарные документы - товарные накладные (ф. № Торг-12), товарно-транспортные накладные;
налоговые документы - счета-фактуры;
сопроводительные документы - сертификаты соответствия и другие документы, подтверждающие качество.
Приём товаров от организации транспорта производится с учетом правил действующих на транспорте и условий договора поставщика по перевозке груза. Как правило, товар в этом случае принимается по количеству мест и массе брутто, сверка производится по сведениям, указанным в транспортных накладных. При приемке товаров от поставщика МОЛ обязан проверить соответствие наименования, вида, цены и количества тем данным, которые указаны в товарно-транспортных накладных, ᴛ.ᴇ. произвести приемку товаров по количеству товарных единиц и массе нетто, по качеству и комплектности. Окончив приемку, заведующий аптекой подписывает сопроводительные документы, подтвердив факт приемки.
По результатам сверки составляется "Акт приёмки товара", при обнаружении недостачи, боя, порчи, брака оформляется "Акт об установленном расхождении по количеству и качеству при приёме товарно-материальных ценностей" для предъявления претензии поставщику (отправителю).
Поясните, в чем отличия понятий «лекарственное растительное сырье» и «лекарственный растительный препарат»? Каким нормативным правовым документом Вы воспользуетесь при ответе на данный вопрос?
В соответствии с ФЗ №61-ФЗ от 2011 «Об обращении лекарственных средств»:
Лекарственное растительное сырье - свежие или высушенные растения либо их части, используемые для производства лекарственных средств организациями - производителями лекарственных средств или изготовления лекарственных препаратов аптечными организациями, ветеринарными аптечными организациями, индивидуальными предпринимателями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность;
Лекарственный растительный препарат - лекарственный препарат, произведенный или изготовленный из одного вида лекарственного растительного сырья или нескольких видов такого сырья и реализуемый в расфасованном виде во вторичной (потребительской) упаковке.
4. Приведите состав инъекционного раствора указанного вещества. Обоснуйте необходимость стабилизации, объясните механизм. Назовите особенности очистки раствора в промышленных условиях. Предложите варианты стерилизации.
При получении антибиотиков в процессе ферментации в питательной среде возможно избыточное или недостаточное содержание вещества, указанного выше (см. формулу). Как в этом случае можно оптимизировать условия ферментации для получения максимального количества целевого продукта?
ОТВЕТ.
Промышленность выпускает 40% раствор глюкозы для инъекционного введения и 5%,10% для инфузий.
На стадии термической стерилизации без добавления стабилизатора происходит деструкция глюкозы, раскрытие цикла и образование ациклической молекулы. Далее идет дегидратация, окисление, изомеризация. Раствор глюкозы приобретает желтую или даже бурую окраску. Поэтому используют стабилизатор Вейбеля.
Раствор Вейбеля должен быть свеже приготовленным, проанализированным:
натрия хлорид (прокаленный) г.-0,52
раствор хлористоводородной кислоты (8,3%) мл.-0, 44
воды для инъекций л. - до 100 мл.
Добавляют раствора стабилизатора - 5% от объема раствора глюкозы, независимо от концентрации.
Натрия хлорид в стабилизаторе Вейбеля способствует циклизации глюкозы, блокирует альдегидную группу в ациклической активной форме, что препятствует окислению глюкозы. В кислой среде (за счет хлористоводородной кислоты) замедляются процессы окисления глюкозы.
Глюкоза неустойчива и в кислой среде - образуется D-глюконовая кислота и её лактоны в результате их окисления, особенно в процессе стерилизации, образуется 5-оксиметилфурфурол, вызывая пожелтение раствора. Для предотвращения деструкции глюкозы растворы после стерилизации необходимо охлаждать искусственно.
Раствор получают с учетом кристаллизационной воды в глюкозе дводной очисткой активированным углем марки «А», сначала подкисленным хлористоводородной кислотой, после чего раствор фильтруют через полотно (бельтинг, бязь) с использованием нутч- или друк-фильтров. После чего раствор доводят до кипения, вновь добавляют уголь и проводят фильтрацию (так же). К раствору добавляют стабилизатор Вейбеля и фильтруют через фильтр ХНИХФИ. После чего ампулируют и стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 100-102°С в течение 1часа. Возможно проведение стерильной фильтрации без термической стерилизации.
Известно, что глюкоза - лучший источник углерода и энергии для любых организмов. Однако быстрый катаболизм глюкозы резко снижает биосинтез антибиотиков. «Катаболитная репрессия» - подавление синтеза определенных ферментов продуктами катаболизма глюкозы и других легкоокисляемых соединений. Продукты катаболизма глюкозы подавляют не саму активность ферментов биосинтеза антибиотиков, а синтез этих ферментов. Глюкоза быстро потребляется во время трофофазы (накопление биомассы), и её количество в среде уменьшается. При протекании идиофазы ее потребление замедлено. Таким образом, интенсивному биосинтезу антибиотика способствует значительное уменьшение в среде источников углерода и азота, особенно легко усваиваемых. В этом случае происходит дерепрессия ферментов синтеза антибиотика. Однако выращивание продуцентов с самого начала ферментации на обедненных средах - нецелесообразно, так как незначительное накопление биомассы в течение трофофазы ведет, в конечном счете, и к незначительному накоплению антибиотика малым количеством клеток продуцента.
Медленно утилизирующиеся полисахариды (крахмал и др.) более благоприятны для биосинтеза антибиотиков. Не является репрессором биосинтеза и лактоза. Она также используется медленно: при гидролизе лактозы освобождающаяся глюкоза репрессирует бета-галактозидазу и, таким образом, гидролиз лактозы (и появление в среде глюкозы) замедляется.