Электрофоретические методы
Электрофорез — метод разделения веществ, основанный на явлении миграции заряженных микрочастиц в жидкой среде под действием внешнего электрического поля.
Существует три различных электрофоретических метода. Под собственно электрофорезом обычно понимают зональным электрофорез (ЗЭ), два других называют методами изоэлектрофокусирования (ИЭФ) и изотахофореза (ИТФ).
Электрофорез применяют главным образом для разделения веществ, молекулы которых различаются по электрофоретической подвижности, т. е. отношению скорости электрофореза (скорости перемещения заряженных частиц вещества) к напряженности электрического поля, которое зависит от свойств заряженных частиц окружающей их среды. Путем изменения внешних условий (например, рН среды, температуры, силы тока, состава и концентрации буферного раствора или носителя) создают подходящие условия для разделения. Вследствие того что при разделении на молекулы действуют только электростатические силы, электрофорез считают «мягким» методом и поэтому часто применяют для работы с лабильными веществами.
Рис. 1.7.6. Устройство электрофореза сыворотки крови на ацетатцеллюлозных пленках УЭФ-01-"Астра"
Метод капиллярного электрофореза используется для электрофоретического разделения фракций белков сыворотки крови, ферментативных гидролизатов белков, метаболитов, а также для разделения аминов, аминокислот, пептидов и белков, нуклеотидов, фенолов, а также различных неорганических соединений.
Глава 2. Лабораторный практикум
2.1. Правила работы в лаборатории и техника безопасности правила работы
В лаборатории необходимо соблюдать тишину. Рабочее место содержать в чистоте.
Для лабораторных работ иметь отдельную тетрадь, в которой аккуратно вести записи.
До начала работы надо ознакомиться с заданием, уяснить его цель и просмотреть соответствующий материал по руководству; подготовить рабочее место, проверить качество реактивов, исправность приборов и аппаратов.
При выполнении анализов работать стоя. Стулья поставить у стены, чтобы они не мешали. На рабочем столе не должно быть никаких посторонних предметов, кроме тетради для записи.
Нельзя работать в пальто или класть пальто и головные уборы на стулья, столы, приборы.
Категорически запрещается пить воду из химической посуды.
При выполнении анализов использовать посуду, реактивы, растворы, материалы для исследований в соответствии с методикой.
На склянках должны быть этикетки с названием реактива и датой его приготовления. Нельзя использовать реактивы без этикеток.
Реактивы должны стоять на определенных местах. Необходимо соблюдать порядок в расстановке реактивов.
При использовании реактивами соблюдать особую аккуратность: банки с сухими реактивами и склянки с растворами должны стоять закрытыми, открывать их только во время употребления; при закрывании склянок не путать пробки, в противном случае реактивы загрязняются и становятся не пригонными для работы; реактивы общего пользования не уносить на рабочие столы; склянки с растворами при взятии из них реактивов держать так, чтобы этикетка всегда находилась сверху, и раствор на нее не попадал; при взятии раствора из склянки пробку надо держать в руке или класть на стол так, чтобы входящая в горло склянки часть пробки не касалась стола; во всех случаях (за исключением тех, когда указано точное количество) брать самое минимальное количество реактивов и молока; заполнять растворами бюретки, отмеривать пипетками молоко и раствора следует в строгом соответствии с общепринятыми правилами.
Бумагу, фильтры, битую посуду выбрасывать в специальные сосуды или ведра.
Окончив работу, привести в порядок рабочее место (вымыть посуду, поставить на место реактивы, приборы и т.п.). Результаты анализов аккуратно вписать в тетрадь для записей.