4.4. Высвобождение лекарственных веществ из млф 127

ответствии с тем, как вносится образец в культуру микроба, находящегося в питательной среде.

Часто используемым методом является метод, при коте* ром на полотне с культурой микроба (обычно пептоновый агар) делается небольшое круглое отверстие и заполняется пробой мази. Важно, чтобы образец находился в тесном контакте с питательной средой на всей поверхности отвер­стия, что надежнее достигается нанесением подогретого об­разца в полутвердом состоянии. При сравнении результа­тов надо следить за тем, чтобы высота питательной среды в чашке Петри была одинаковой, среда имела всегда одина­ковый рН и не наблюдалось разницы в содержании других веществ,, внесенных в питательную среду.

Другой возможностью усовершенствования опытов мо­ жет быть размещение образца мази в металлическом (алю­ миниевом) цилиндре на питательной среде. ^ч

Третья возможность — это нанесение образца на бумагу (диск в диаметре до 1 см), которая кладется на твердую пи­тательную среду.

4.4.2. МЕТОДЫ С ХИМИЧЕСКОЙ (ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКОЙ) ДЕТЕКЦИЕЙ

При этих методах для оценки высвобождения ле­карственного вещества можно наблюдать или диффузию в жировой среде, или диффузию в водной среде в форме гидрогеля, или проникание в жидкую среду.

Диффузия в жировой среде (без перехода через полу$ проницаемую мембрану) может исследоваться следующим образом: образец мази наносится на площадь, обозначенную на фильтровальной бумаге, которая кладется на раствор, пред­ставляющий рецепторную фазу. Закрытая чашка оставля­ется на 4 ч в термостате при температуре 25 °С. Степень диффузии вещества определяется количественно в рецеп-торной фазе.

Другая разновидность этого же метода такова: образец наносится на фильтровальную бумагу, помещается на дно чашки Петри, заливается, например, вазелином и оставляет­ся на 12 ч при температуре 30 °С. В вазелине определяется количество высвобожденного лекарства. Аналогичный под-

9

ч

128 Глава 4. Методы оценки распадаемости, растворения и высвобождения ЛВ

ход существует и для веществ гидрофильного характера. В этом случае образец заливается водой.

Если речь идет о гидрофобной мази, то ее можно иссле­довать прямой диффузией: мазь в растопленном виде нано­сится на водную рецелторную фазу.

Диффузия в водной среде. Техника диффузии в среде в форме гидрогеля аналогична технике опытов с микробиоло­гической индикацией на полотнах питательной среды. Гид­рогель выбирается по консистенции, преимущество отдает­ся желатиновым гидрогелям, а не агаровым. Нужно сле­дить, чтобы образец мази имел очень тесный контакт с гелем, поскольку фазовая реакция должна быть выразительной, а граница цветовой зоны — четкой. Недостатком этих мето­дов является тот факт, что измерение диаметра окрашенной зоны сопряжено с довольно большой экспериментальной по­грешностью. Воспроизводимость результатов зависит от спо­соба подготовки геля и полотна, от химического состава по­казателя детекции, от постоянства окраски образующегося соединения, продолжительности выдержки и температуры.

Рецепторная фаза может быть водной (вода, физиологи­ческий раствор, раствор Рингера, буферные растворы) или

_{ь."_шм^-}

в.

Рис. 4.8. Устройство для исследо­вания проникания лекарственного вещества из мази в жидкую среду: А — трубочка с образцом мази; В — ре­цепторная фаза; С — целлофан. Опыт проводится при температуре 37 °С. Ре­цепторная фаза — раствор Рингера, мазь содержит красящее вещество, например метиленовый синий

Рис. 4.9. Устройство для исследо­вания проникания лекарственного вещества из мази в жидкую среду: А — камера, заполненная образцом мази; В — рецепторная фаза; С — цел­лофан. Камера может быть снабжена мешалкой

9

ч