Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
сам. роб. Біохімія молока та мяса.doc
Скачиваний:
4
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
1 Мб
Скачать
☆

7.2.3. Реакція на фосфотазу із застосуванням фенолфталеїнфосфату натрію

Фосфатаза, присутня у сирому молоці, при нагріванні його до 72°С протягом 20с руйнується, при нагріванні до більш високих температур руйнується миттєво. Натрієва сіль фенолфталеїн фосфату у буферному розчині рН 9,8 не має забарвлення. Під час гідролізу фосфатаза молока відщеплює від неї фосфат, внаслідок чого вивільнюється фенолфталеїн, який у лужному середовищі дає яскраво-рожеве забарвлення.

Фермент фосфатаза інактивується при низькій температурі і кислій реакції, тому реакція на цей фермент у заморожених кисломолочному сирі і сметані чи після їх тривалого зберігання у холодильнику може бути негативною, якщо вони виготовлені із сирих молока і вершків. Тому досліджувати продукти на фосфатазу слід перед відправленням на зберігання. Сир, з кислотністю вище стандартної, на ефективність пастеризації не досліджують.

Припади і реактиви. Прилади такі ж, як і при виявленні фосфатази за реакцією з 4-аміноантипірином; аміак водний, ч.д.а, розчин концентрацією 1 моль/дм3; амоній хлористий, х.ч. або ч.д.а., розчин концентрацією 1 моль/дм3; суміш буферна аміачна; натрію фенолфталеїнфосфат порошкоподібний, 0,1%-ний розчин; пробірки з безбарвного скла з нанесеними поділками на 2мл; піпетки на 1 і 2мл; пробки гумові; дистильована вода.

Хід визначення.

В пробірку відміряють 2 мл молока і 1 мл розчину натрію фенолфталеїнфосфату, закривають пробкою і перемішують. Потім пробірку вміщують на водяну баню з температурою води 40-45°С і визначають забарвлення молока в пробірці через 10 хв. і через годину.

При відсутності ферменту фосфатази забарвлення молока в пробірці не змінюється. Отже, його пастеризували при температурі не нижче 63°С. При наявності фосфатази молоко в пробірці набуває забарвлення від світло-рожевого до яскраво-рожевого. Значить, молоко не пастеризували або пастеризували при температурі нижче 63°С, або воно було змішане з негіастеризованим. Чутливість методу дає можливість виявити домішку не менше 2% непас геризованого молока до пастеризованого.

7.3. Бактеріологічні дослідження молока та молочних продуктів

Бактеріальна забрудненість молока є важливим показником, який характеризує його санітарну якість та умови одержання. Оцінку молока за бактеріальною забрудненістю проводять 1 раз у 10 днів і її показник поширюється на все молоко, що продається до наступної оцінки. При низькій якості молока за бактеріальною забрудненістю здавач має право зробити повторну оцінку, яка і буде остаточною.

Слід враховувати, що молоко' - добре живильне середовище для багатьох мікроорганізмів, у т.ч. й патогенних, які можуть викликати захворювання не тільки у молодняку сільськогосподарських тварин, але є досить небезпечними для здоров'я людей.

Тому достовірність результатів бактеріологічних досліджень молока має надзвичайно важливе значення.

7.3.1. Визначення бактеріальної забрудненості молока за редуктазною пробою (гост 9225-84)

Проба на редукгазу - це непрямий показник бактеріальної забрудненості, який грунтується на біохімічній активності мікроорганізмів. Визначають її двома методами: за редуктазною пробою з метиленовим блакитним і резазурином.

Суть методів полягає у здатності ферменту редуктази, який виділяють мікроорганізми, знебарвлювати органічні барвники метиленовий блакитний і резазурин. Залежно від часу знебарвлення або зміни забарвлення визначають бактеріальну забрудненість молока.