- •Уаан, директор Інституту біології тварин уаан
- •1. Міжнародна система одиниць вимірювання
- •2. Дослідження білкового обміну
- •2.1. Визначення загального білка в сироватці крові рефрактометричним методом
- •2.2. Визначення білкових фракцій сироватки крові
- •2.2.1. Визначення білкових фракцій сироватки крові
- •2.3. Визначення загальної кількості імуноглобулінів
- •2.3.1. Визначення загальної кількості імуноглобулінів у сироватці крові
- •2.4. Колоїдно-осадові проби
- •2.4.1. Сулемова проба (за Грінстедом)
- •2.4.2. Проба з розчином міді сульфату (за Постніковим в.С.)
- •2.3.2. Визначення загальної кількості імуноглобулінів у молозиві
- •2.4.3. Формолова проба
- •2.4.4. Проба Вельтмана (в модифікації Тейфля)
- •2.4.5. Коагуляційна стрічка Вельтмана
- •2.4.6. Цинк-сульфатна проба
- •2.4.7. Тимолова проба
- •2.5. Залишковий азот
- •2.5.1. Колориметричний метод визначення залишкового
- •2.5.2. Визначення сечовини в сироватці крові
- •2.5.3. Визначення сечовини у сироватці крові та сечі (за Марш)
- •2.5.4. Визначення сечової кислоти в сироватці крові
- •2.6. Визначення креатиніну
- •2.6.1. Визначення креатиніну за колірною реакцією Яффе
- •2.6.2. Визначення креатиніну в сироватці крові за колірною
- •3. Дослідження ліпідного обміну
- •3.1. Визначення загального холестеролу за методом Златкіс-Зака
- •3.2. Визначення загального холестеролу за методом Ілька
- •3.3. Визначення кетонових тіл у крові йодометричним методом
- •3.3.1. Визначення загальної кількості кетонових тіл
- •3.3.2. Визначення ацетону і ацетооцтової кислоти
- •3.3.3. Визначення бета-оксимасляної кислоти
- •4. Дослідження обміну вуглеводів
- •4.1. Визначення глюкози за колірною реакцією з орто-толуїдином
- •4.2. Визначення глюкози у плазмі крові глюкозо-оксидазним методом
- •4.3. Визначення вмісту хондроїтинсульфатів у сироватці крові
- •5. Ферментодіагностика
- •5.1. Визначення активності аланінамінотрансферази (алт) і аспартатамінотрансферази (аст)
- •5.2. Визначення активності гамма-глутамілтранспептидази (ггтп) в сироватці крові
- •5.3. Визначення α-амілази (за методом Каравея)
- •5.4. Визначення активності лужної фосфатази в сироватці
- •5.5. Визначення активності лужної фосфатази в сироватці
- •5.6. Визначення активності загальної лужної фосфатази
- •Розрахунок проводять за формулою:
- •5.7. Визначення активності термостабільної лужної фосфатази
- •5.8. Визначення активності кишкового ізоферменту лужної фосфатази
- •6. Дослідження кислотно-основного балансу
- •6.1. Визначення лужного резерву крові дифузійним методом
- •7. Дослідження пігментного обміну
- •7.1. Визначення білірубіну в сироватці крові (за методом Ієндрашика, Клеггорна і Грофа у модифікації Левченка в.І., Влізла в.В., 1988)
- •7.2. Визначення білірубіну за методом Ієндрашика, Клеггорна і Грофа
- •7.3. Визначення кількості гемоглобіну в крові геміглобінціанідним методом
- •8. Дослідження обміну вітаміну а
- •8.1. Визначення вітаміну а та каротину в сироватці
- •9. Дослідження обміну макро- і мікроелементів
- •9.1. Визначення загального кальцію в реакції з кальційарсеназо ііі
- •9.2. Визначення неорганічного фосфору
- •9.2.1. Визначення неорганічного фосфору в сироватці крові
- •Значення вітаміну d в гомеостазі кальцію та фосфору
- •9.3. Визначення магнію в сироватці крові
- •9.4. Визначення магнію методом атомно-абсорбційної
- •9.5. Визначення хлоридів у сироватці крові
- •9.6. Визначення натрію методом атомно-абсорбційної спектрофотометрії
- •9.7. Визначення калію методом атомно-абсорбційної спектрофотометрії
- •9.8. Визначення заліза
- •9.8.1. Визначення заліза в сироватці крові
- •9.8.2. Визначення заліза методом атомно-абсорбційної спектрофотометрії
- •9.9. Визначення міді
- •9.9.1. Визначення міді в сироватці крові
- •9.9.2. Визначення міді методом атомно-абсорбційної спектрофотометрії
- •9.10. Визначення цинку
- •9.10.1. Визначення цинку методом атомно-абсорбційної спектрофотометрії
- •Додатки
- •Коефіцієнти перерахунку “старих” одиниць в одиниці
- •Перерахунок одиниць активності ферментів
- •Вступ ……………………………………………………...................................3
- •2. Дослідження білкового обміну …………………......................8
- •Біохімічні методи дослідження крові тварин Методичні рекомендації
- •09117, Біла Церква, Соборна площа, 8/1, тел. 3-11-01.
- •09112, М. Біла Церква, бульвар 50-річчя Перемоги, 22
- •Методи дослідження крові тварин
Вступ ……………………………………………………...................................3
1. Міжнародна система одиниць вимірювання ……..........4
2. Дослідження білкового обміну …………………......................8
2.1. Визначення загального білка в сироватці крові
рефрактометричним методом ...................................................................8
2.2. Визначення білкових фракцій сироватки крові.......................................9
2.2.1. Визначення білкових фракцій сироватки крові
нефелометричним (турбідиметричним) методом ……...............10
2.3. Визначення загальної кількості імуноглобулінів.………………..........12
2.3.1. Визначення загальної кількості імуноглобулінів
у сироватці крові...................................................................................13
2.3.2. Визначення загальної кількості імуноглобулінів
у молозиві.........................................................................................14
2.4. Колоїдно-осадові проби.....……………………..........................................14
2.4.1. Сулемова проба (за Грінстедом).……………………...................15
2.4.2. Проба з розчином міді сульфату (за Постніковим В.С.)..….........15
2.4.3. Формолова проба …………………………………….…...............16
2.4.4. Проба Вельтмана (в модифікації Тейфля) …….......…....................16
2.4.5. Коагуляційна стрічка Вельтмана ......................................................17
2.4.6. Цинк-сульфатна проба ………………………………...................17
2.4.7. Тимолова проба …………………………………………...............19
2.5. Залишковий азот ……………...………………..………..…………...............21
2.5.1. Колориметричний метод визначення залишкового азоту
в сироватці крові ….............................................................................21
2.5.2. Визначення сечовини в сироватці крові (за колірною
реакцією з діацетилмонооксимом)……………….….....….............23
2.5.3. Визначення сечовини у сироватці крові та сечі (за Марш).........24
2.5.4. Визначення сечової кислоти в сироватці крові …….....…......….26
2.6. Визначення креатиніну ………...……….………………………............28
2.6.1. Визначення креатиніну за колірною реакцією Яффе …...............28
2.6.2. Визначення креатиніну в сироватці крові за колірною
реакцією Яффе (метод Поппера).....................................................30
3. дослідження ліпідного обміну ……..…….................................31
3.1. Визначення загального холестеролу за методом Златкіс-Зака ............32
3.2. Визначення загального холестеролу за методом Ілька.………...............33
3.3. Визначення кетонових тіл у крові йодометричним методом .................35
3.3.1. Визначення загальної кількості кетонових тіл ............................36
3.3.2. Визначення ацетону і ацетооцтової кислоти ...............................36
3.3.3. Визначення бета-оксимасляної кислоти .............................................37
4. дослідження обміну вуглеводІВ ..............................................39
4.1. Визначення глюкози за колірною реакцією з орто-толуїдином ..........41
4.2. Визначення глюкози у плазмі крові глюкозо-оксидазним
методом .....................................................................................................42
4.3. Визначення вмісту хондроїтинсульфатів у сироватці крові …..…......44
5. Ферментодіагностика ………………….…………………............45
5.1. Визначення активності аланінамінотрансферази (АЛТ) і аспартат-
амінотрансферази (АСТ) (за методом Рейтмана-Френкеля)…....…......45
5.2. Визначення активності гамма-глутамілтранспептидази (ГГТП)
в сироватці крові ……......................................................................................47
5.3. Визначення α-амілази (за методом Каравея) ………………….............49
5.4. Визначення активності лужної фосфатази в сироватці крові
(за Боданські)…………….........................................................................51
5.5. Визначення активності лужної фосфатази в сироватці крові
(за реакцією гідролізу динатрійфосфату) ..................................................53
5.6. Визначення активності загальної лужної фосфатази (Вагнер В.К.,
Путілін М.В., Харабуга Г.Г.) ……………...............................................55
5.7. Визначення активності термостабільної лужної фосфатази …..…......56
5.8. Визначення активності кишкового ізоферменту лужної
фосфатази ..................................................................................................56
6. дослідження кислотно-основного балансу..................58
6.1. Визначення лужного резерву крові дифузійним методом за
допомогою здвоєних колб (за Кондрахіним І.П.) ……………….........58
7. дослідження пігментного обміну …………………......…...62
7.1. Визначення білірубіну в сироватці крові (за методом Ієндрашика,
Клеггорна і Грофа у модифікації Левченка В.І.,
Влізла В.В., 1988) .....................................................................................62
7.2. Визначення білірубіну за методом Ієндрашика, Клеггорна
і Грофа........................................................................................................64
7.3. Визначення кількості гемоглобіну в крові геміглобінціанідним
методом (за Піменовою Л.М. та Дервізом Г.В.) ...................................66
8. дослідження обміну вітаміну а………………………............69
8.1. Визначення вітаміну А та каротину в сироватці крові і молозиві
(за методом Бессея О. в модифікації Левченка В.І.
зі співавт., 1998)............................................................................................69
9. дослідження обміну макро- і мікроелементів ..............72
9.1. Визначення загального кальцію в реакції з кальційарсеназо ІІІ.............72
9.2. Визначення неорганічного фосфору ………….…………………...........74
9.2.1. Визначення неорганічного фосфору в сироватці крові
(за методом УФ-детекції фосфомолібдатного
комплексу).......................................................................................75
9.3. Визначення магнію в сироватці крові ....................................................78
9.4. Визначення магнію методом атомно-абсорбційної
спектрофотометрії ....................................................................................79
9.5. Визначення хлоридів у сироватці крові ……………….........................80
9.6. Визначення натрію методом атомно-абсорбційної
спектрофотометрії …................................................................................81
9.7. Визначення калію методом атомно-абсорбційної
спектрофотометрії.....................................................................................84
9.8. Визначення заліза .....................................................................................85
9.8.1. Визначення заліза в сироватці крові (за реакцією
з бета-фенантроліном) ......................................................................86
9.8.2. Визначення заліза методом атомно-абсорбційної
спектрофотометрії...........................................................................88
9.9. Визначення міді ........................................................................................90
9.9.1. Визначення міді в сироватці крові (за реакцією
з бетакупріоном).............................................................................90
9.9.2. Визначення міді методом атомно-абсорбційної
спектрофотометрії...........................................................................90
9.10. Визначення цинку …………………………………..…………..........…...91
9.10.1. Визначення цинку методом атомно-абсорбційної
спектрофотометрії ........................................................................92
Додатки .................................................................................................................94
Список рекомендованої літератури ....................................................................100
