Тема 27. Хламидии

Возбудителей хламидиозов относят к порядку Chlamydiales, се­мейству Chlamydiaceae, включающему в себя один род Chlamydia с двумя видами С. trachomatis и С. psittaci. Это грамотрицательные не­подвижные облигатные паразиты с выраженным полиморфизмом, чаще кокковидной формы. С. trachomatis патогенен для человека и мышей. C.psittaci вызывает ряд инфекционных заболеваний у жи­вотных и птиц. Развитие патологического процесса зависит от мес­та локализации возбудителя. Хламидии чаще поражают респира­торные органы и кишечный тракт у птиц, ягнят, телят, поросят; ге­ниталии у крупного и мелкого рогатого скота; синовиальные ткани телят, поросят, ягнят, жеребят; слизистые оболочки глаз крупного рогатого скота, свиней, овец, кошек и др. Клинические проявления хламидиоза разнообразны: диарея, пневмонии, конъюнктивиты, полиартриты, перикардиты, энцефалиты, аборты, мертворождение, бесплодие, вагиниты, эндометриты и др. К С. psittaci восприимчивы дикие и домашние птицы (свыше 130 видов). Из домашних птиц чаще болеют утки, индейки, гуси, реже — куры, голуби (орнитоз).

Бактериологическое исследование. Включа­ет в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой и люминесцентной микроскопии, выделение чистой культуры методом биопробы и идентификацию возбудителя по морфологическим свойствам.

От павших или вынужденно убитых животных в лабораторию направляют кусочки паренхиматозных органов; при аборте — плод целиком или паренхиматозные органы и сычуг; для прижиз­ненной диагностики — пробы эякулята или замороженной спер­мы, кровь для серологических исследований. Материал берут в те­чение 2 ч после гибели, убоя или аборта, помещают в термос со льдом.

Микроскопия. Для световой микроскопии мазки из па­тологического материала окрашивают по Романовскому— Гимза (хламидии в зависимости от стадии развития окрашены в красно-или сине-фиолетовый цвет), Стемпу. При окраске по Стемпу препараты фиксируют нагреванием, окрашивают 15 мин фуксином Циля (рН 7,4), разведенным дистиллированной водой в соотно­шении 1 : 5, промывают дистиллированной водой. Затем обраба­тывают 1 мин 0,05 %-м раствором серной кислоты, вновь промы­вают дистиллированной водой, докрашивают 30 с 1 %-м водным раствором малахитовой зелени, после чего промывают водой и микроскопируют: хламидии ярко-красные на зеленоватом фоне клеток. При иммунофлуоресцентном выявлении хламидии в мате­риале используют прямой и непрямой варианты; в зависимости от этапа морфогенеза размеры хламидии варьируют от 0,2...0,4 до 0,6...1,5мкм.

Культурально-биохимические свойства. Для выделения хламидии используют 6...7-суточные куриные эмб­рионы или лабораторных животных. Из материала готовят суспен­зию на физиологическом растворе (1:10), центрифугируют, надо-садочную жидкость обрабатывают антибиотиками (100 ЕД/мл пе­нициллина, 500ЕД/мл стрептомицина) при 4°С в течение 24 ч, одновременно контролируя на стерильность. Затем исследуемый материал в объеме 0,2 мл вводят в желточный мешок. Эмбрионы инкубируют в термостате при 37 °С и относительной влажности 75 %. Эмбрионы, погибшие на 4...12-е сутки, вскрывают, аллантоисную жидкость контролируют на бактериальную контаминацию. Из желточных мешков готовят мазки-отпечатки и исследуют на нали­чие хламидии методом микроскопии. При отсутствии специфи­ческой гибели эмбрионы на 12-е сутки вскрывают и проводят вто­рой пассаж, при необходимости — и третий.

Биопроба. Для выделения хламидии заражают пять белых мышей или двух-трех морских свинок. Материал, подготовлен­ный ранее описанным способом, вводят внутрибрюшинио или интраторакально мышам в дозе 0,3 мл, морским свинкам — 0,5 мл. Наблюдение ведут в течение 3 сут. В положительных случаях жи­вотные погибают на 7...10-е сутки. При вскрытии обнаруживают большое количество серозно-фибринозного экссудата в грудной и брюшной полостях, очаговую пневмонию, кровоизлияния под ле­гочной плеврой. При отсутствии гибели животных проводят сле­пые пассажи. Обнаружение и идентификацию хламидии прово­дят, как описано ранее.

Серологическая диагностика. Основана на по­становке РСК или РДСК. Сыворотки исследуют в разведении 1: 5 и 1 : 10; положительным результатом считают задержку гемолиза на два—четыре креста в разведении 1:10, сомнительным — на один крест в разведении 1: 10 и на один—четыре креста — в разве­дении 1:5.

Биопрепараты. Инактивированная эмульгированная вакцина против хламидиозного аборта овец.

Набор антигенов и сывороток для серологической диагностики хламидиозов сельскохозяйственных животных.