- •Учебники и учебные пособия для студентов высших учебных заведений
- •Введение
- •Оборудование микробиологической лаборатории.
- •Правила работы в микробиологической лаборатории.
- •Тема 1. Микроскопический метод исследования микроорганизмов
- •Световая микроскопия.
- •Фазово-контрастное устройство
- •Темнопольный конденсор.
- •Люминесцентная микроскопия.
- •Электронная микроскопия.
- •Тема 2. Морфология микроорганизмов
- •2.1. Форма бактерий
- •Определение подвижности микроорганизмов.
- •Приготовление красителей и окраска мазков-препаратов. Методы пересева микроорганизмов.
- •Приготовление микроскопических препаратов.
- •Тема 3. Морфология грибов
- •Тема 4. Методы стерилизации
- •Стерилизация паром под давлением
- •Тема 5. Культивирование микроорганизмов
- •Тема 6. Методы выделения чистой культуры. Определение биохимических свойств микробов
- •Тема 7. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Бактериофаги
- •Тема 8. Определение биологических свойств микроорганизмов
- •Упаковка и пересылка патологического материала.
- •Принципиальная схема микробиологического исследования.
- •Определение патогенности.
- •Тема 9. Методы изучения генетики бактерий
- •Индукции мутаций под действием ультрафиолетового излучения
- •Постановка опыта трансформации.
- •Постановка опыта специфической трансдукции.
- •Определение Col-плазмид (колицикогенных факторов).
- •Метод генных зондов.
- •Тема 10. Микробиологические методы исследования объектов окружающей среды
- •Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочных продуктов.
- •Санитарно-бактернологическое исследование мяса, колбасных изделий к мясных продуктов.
- •Тема 11. Изучение неспецифической резистентности организма и серологические методы диагностики инфекционных болезней
- •Количественное определение лизоцима в сыворотке крови.
- •Количественное определение комплемента в сыворотке крови.
- •Демонстрация фагоцитоза бактерии.
- •Методы оценки иммунного статуса макроорганизма.
- •Серологические методы исследования.
- •Реакция агглютинации (ра).
- •Реакция преципитации (рп).
- •Реакция связывания комплемента (рск).
- •Иммуноферментный метод.
- •Тема 12. Биологические препараты и их контроль
- •Тема 13. Стафилококки и стрептококки
- •Тема 14.Энтеробактерии
- •Тема 15. Бруцеллы и возбудитель туляремии
- •Тема 16. Пастереллы
- •Тема 17. Иерсинии
- •Тема 18. Возбудители рожи и листериоза
- •Тема 19. Псевдомонады
- •Тема 20. Возбудитель сибирской язвы
- •Тема 21. Патогенные анаэробы
- •Возбудитель дизентерии ягнят
- •Возбудитель брадзота овец
- •Возбудитель энтеротоксемии овец
- •Возбудитель эмфизематозного карбункула (эмкар)
- •Тема 22. Патогенные микобактерии Возбудитель туберкулеза.
- •Тема 23. Возбудитель актиномикоза
- •Тема 24. Патогенные спириллы
- •Тема 25. Микоплазмы
- •Тема 26. Риккетсии
- •Тема 27. Хламидии
- •Тема 28. Патогенные грибы
- •Приложение методические указания к проведению практических занятий для преподавателей
- •Частные методики.
- •Тема 3. Цель занятия: ознакомить студентов с особенностями морфологии и методами исследования микроскопических грибов различных таксономических групп.
- •Тема 4. Цель занятия: ознакомить студентов с назначением и основными методами стерилизации, применяемыми в микробиологии.
- •Тема 6. Цель занятия: ознакомить студентов с методами изучения ферментативной активности и принципами идентификации микроорганизмов.
- •Тема 7. Цель занятия, ознакомить студентов с методами определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам, а также с действием бактериофагов и их практическим использованием.
- •Тема 8. Цель занятия: ознакомить студентов с основными методами и показателями санитарно-микробиологической оценки состояния объектов окружающей среды.
- •Тема 9. Цель занятия: ознакомить студентов с фенотипической и генотипической изменчивостью, генетическими методами идентификации микроорганизмов.
- •Тема 12. Цель занятия: ознакомить студентов с вакцинами различных типов, лечебно-профилактическими и диагностическими иммунными сыворотками, антигенами, аллергенами и принципами их контроля.
- •Тема 13. Цель занятия: ознакомить студентов с этапами лабораторной диагностики, основными свойствами возбудителей стафи-лококкозов, стрептококкозов и биопрепаратами.
- •Тема 14. Цель занятия: ознакомить студентов с методами лабораторной диагностики и биологическими свойствами возбудителей эшерихиозов и сальмонелл; биопрепаратами.
- •Тема 15. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей и лабораторной диагностикой бруцеллеза и туляремии, а также биопрепаратами.
- •Тема 17. Цель занятия: изучить свойства возбудителей и схемы лабораторной диагностики зооантропонозной чумы и псевдотуберкулеза.
- •Тема 18. Цель занятия: ознакомить студентов с этапами лабораторной диагностики и свойствами возбудителей рожи свиней, ли-стериоза, биопрепаратами.
- •Тема 19. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей и лабораторной диагностикой сапа, мелиоидоза, псевдомоноза норок и биопрепаратами.
- •Тема 20. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителя, схемой лабораторной диагностики сибирской язвы, биопрепаратами.
- •Тема 21. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей анаэробиозов, схемами лабораторного исследования, биопрепаратами.
- •Тема 22. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей, методами лабораторной диагностики туберкулеза и паратуберкулеза, биопрепаратами.
- •Тема 23. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителя актиномикоза.
- •Тема 24. Цель занятия: ознакомить студентов с методами лабораторной диагностики лептоспироза, кампилобактериоза и дизентерии свиней, биологическими свойствами возбудителей, биопрепаратами.
- •Тема 25. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей, методами лабораторной диагностики микоплазмозов.
- •Тема 27. Цель занятия: ознакомить студентов со свойствами возбудителей, методами лабораторной диагностики хламидиозов, биопрепаратами,
Электронная микроскопия.
Появление электронного микроскопа стало новым этапом в развитии микроскопии благодаря повышению разрешающей способности по меньшей мере в 100 раз из-за использования вместо света потока движущихся электронов.
Электронный микроскоп (рис. 11) является своеобразной копией светового микроскопа (по принципу устройства). Как и в световом микроскопе, в электронном микроскопе освещение обеспечивает источник света, формирующий изображение. Интенсивность и собирание лучей осуществляются с помошью кон-денсорной линзы. Конечное изображение производит проекционная линза в электронном микроскопе или окуляр в световом микроскопе. Основное различие между световым и электронным микроскопами заключается в том, что в качестве источника освещения для получения изображения в электронном микроскопе1, служит электронный пучок, а вместо стеклянных линз —магнитные или электростатические поля. В световом микроскопе изображение воспринимается глазом непосредственно, а в электронном оно видимо только на флуоресцирующем экране. Изображения в электронном микроскопе можно получить на фотопластинке, помещаемой под экраном.
Электронный микроскоп обеспечивает возможность эффективного визуального наблюдения и анализа структуры твердых тел неоднородного характера от 0,01 нм и менее до 10 нм.
Длина волн видимой области спектра лежит в пределах 0,4...0,7 мкм, следовательно, максимальное разрешение (половина длины волны), которое можно получить при помощи светового микроскопа, — около 0,2 мкм (200 нм). Волновые свойства также присущи электронам. При напряжениях 50... 100 тыс. В длина волны электрона составляет 0,0055... 0,0039 нм. По чисто техническим причинам получить теоретически максимальное разрешение, равное 0,002 нм, невозможно, и на практике оно не превышает 1...2 нм.
Основная часть электронного микроскопа включает в себя ряд магнитных линз, люминесцентный экран и фотографическую пластинку. Электрический ток проходит через вольфрамовую нить и вызывает эмиссию электронов. К нити приложено высокое отрицательное напряжение, что обеспечивает большую разницу потенциалов между нитью и заземленной пластиной анода. В этом поле электроны движутся к аноду, часть из них проходит через отверстие в центре анода (центральная апертура) и формирует электронный луч, который фокусируется первой магнитной линзой (конденсорной) и освещает объект. Большая часть электронов проходит через объект без отклонения, часть электронов после столкновения с тяжелыми атомами выбивается из общего электронного луча. В итоге образуется такая структура электронного луча, которая при дополнительной фокусировке дает изображение объекта.
Электроны, прошедшие через объект, фокусируются объективной магнитной линзой, которая дает увеличенное изображение; третья магнитная линза (проекционная), в свою очередь, также увеличивает изображение, которое и попадает на экран. Если люминесцентный экран убрать, то луч попадает на фотопластинку.
Электронный микроскоп, создающий изображение при прохождении электронов через тонкопленочный образец, называют трансмиссионным или просвечивающим. В сканирующем электронном микроскопе первичный электронный луч, попадая на поверхность фиксированного, высушенного и покрытого тонким слоем металла объекта, вызывает различные вторичные излучения, интенсивность которых зависит от характеристик рельефа, электропроводности и химического состава. Полезное увеличение сканирующей электронной микроскопии обычно не превышает 50 тыс. раз. С ее помощью получают трехмерное изображение изучаемого объекта.
