42. Зависимость количества соматических клеток от скорости вытекания смеси молока с реактивом «Мастоприм»

Время вытекания смеси, с

Количество сомати­ческих клеток, тыс/мл

Время вытекания смеси, с

Количество сомати­ческих клеток, тыс/мл

12,0-18,0 18,1-25,0 25,1-31,0

До 300 301-500 501-750

31,1-37,0 37,1-46,0 46,1-58,0

751-1000 1001-1250 1251-1500

За окончательный результат анализа принимают среднее ариф­метическое двух параллельных определений. При этом разность времени вытекания смеси молока и водного раствора препарата «Мастоприм» через капилляр двух параллельных образцов молока не должна превышать 1—6 с.

Анализатор молока вискозиметрический «Соматос» фирмы ООО «Био Тест» (Украина, г. Донецк) предназначен для определе­ния количества соматических клеток в молоке по условной вязкос­ти, измеряемой по времени вытекания контролируемой пробы че­рез капилляр. Принцип работы этого прибора такой же, как и вис­козиметра ВМЛК.

Диапазон определения количества соматических клеток в 1 см³ молока на приборе «Соматос» 90—1500 тыс.; относительная пог­решность измерения условной вязкости не более 5 %; продолжи­тельность одного анализа не более 4 мин.

Анализатор молока вискозиметрический «Соматос» Научно-про­изводственного объединения «Петролазер» (Россия, Санкт-Петер­бург) по работе и техническим характеристикам не отличается от описанного выше анализатора.

Источник: 71.

Помимо определения общего количества соматических клеток молока (секрета в сухостойный период) возможна их дифференци­ация. С этой целью предложен способ приготовления и окраски препаратов из молока и секрета молочных желез для микроскопи-рования клеток, обеспечивающий окрашивание и сохранение структуры клеточных элементов (К. Н. Кондрахина, Г. А. Симо-нян. Авторское свидетельство № 400314). К 15—18 мл свежевыдо-енного молока (секрета) добавляют одну каплю 40%-ного раствора формальдегида и тщательно перемешивают. Затем отбирают 5 мл молока, вносят в центрифужную пробирку, центрифугируют 10 мин при 3000 мин . С поверхности снимают слой жира, выливают над-осадочную жидкость, к осадку добавляют 0,5—1,0 мл сыворотки крови крупного рогатого скота и встряхивают до полного взмучи­вания осадка. После этого доливают сыворотку до объемаЗ—4 мл и снова центрифугируют в течение 7—8 мин при 3000 мин Над-осадочную жидкость сливают, оставшийся осадок тщательно пере­мешивают путем встряхивания до полного взмучивания. Пипеткой от гемометра Сали набирают полученную взвесь отмытых клеток, наносят каплю ее на чистое обезжиренное предметное стекло и де­лают мазок. Высушенный мазок фиксируют метанолом в течение 5 мин и окрашивают краской Романовского, которую готовят пе­ред употреблением на водопроводной воде с рН, близкой к ней­тральной (1 капля краски на 1 мл воды). Дифференцируют клетки под микроскопом с окуляром 7 или 10 и объективом 90.

Источник: 36.

Клиническое значение. Подсчет соматических клеток проводят главным образом для выявления маститного молока, а также оценки генетического потенциала продуктивности животных. Содержание соматических клеток у здоровых коров в период выделе­ния нормального молока (285—290 дней) составляет 50—800 тыс/мл. В молоке с примесью молозива или в молоке, полученном в послед­ние 7 дней лактации (стародойное), количество соматических клеток превышает 800 тыс/мл. Сборное молоко высшего сорта содержит не более 400 тыс/мл, молоко высшего сорта — не более 500, первого сор­та—до 600 и несортовое — не более 800 тыс/мл соматических клеток.

В сухостойный период количество соматических клеток в сек­рете здорового вымени увеличивается в десятки и сотни раз. При субклиническом мастите их содержание в молоке колеблется от 0,96 до 16,0 млн/мл; серозном — 1,00—64,0, катаральном — 1,05—23,0, гнойном — 1,50—300 млн/мл (К. Н. Кондрахина).

Большинство ученых считает, что подсчет соматических клеток (в основном лейкоцитов) в молоке — наиболее эффективный и ранний метод выявления скрытых форм мастита.

Определение количества соматических клеток — обязательно, поскольку этот показатель введен в качестве основного при ус­тановлении сортности заготавливаемого молока. В молоке выяв­лена четкая зависимость между увеличением этого показателя и снижением продуктивности. По некоторым данным, при нали­чии в молоке от 500 тыс. до 1 млн соматических клеток в 1 мл продуктивность коров снижается на 10 %, до 5 млн/мл — на 30 % (ФРГ).

Определение в молоке (молозиве) кетоновых тел, общего каль­ция, неорганического фосфора, магния, мочевины, витамина А. Пе­речисленные показатели определяют в обезжиренном молоке (мо­лозиве). [Метод обезжиривания молока (молозива) изложен в на­чале раздела.]

Определение кетоновых тел в обезжиренном молоке (молозиве) проводят ионометрическим методом (см. Исследование крови).

Повышенную концентрацию кетоновых тел в молоке (молози­ве) можно установить с помощью специальных тест-пластин, ре­актива Лестраде, Ланге и¹ других, в основе которых лежит реакция натрия нитропруссида с ацетоуксусной кислотой и ацетоном в щелочной среде с появлением сиреневой окраски. Тест-полоску или реактив смачивают молоком (молозивом) и через 30—40 с оценивают изменение цвета, его интенсивность. Чем интенсив­нее цвет, тем выше концентрация кетоновых тел в исследуемой пробе.

Чувствительность методов с натрия нитропруссидом около 10 мг/100 мл. Такая концентрация ацетоновых тел в молоке (моло­зиве) бывает при развитии кетоза.

Определение кетоновых тел в молоке (молозиве) проводят по той же методике, что и при обнаружении их в крови и моче.

Определение общего кальция в обезжиренном молоке (молозиве) можно проводить комплексонометрическим методом с индикато­ром флуорексоном (см. с. 76) или мурексидом (см. с. 79), неорга­нического фосфора с ванадат-молибденовым реактивом (см. с. 82), с аскорбиновой кислотой (см. с. 84), магния — по цветной реакции с титановым желтым (см. с. 86), мочевины — по цветной реакции с диацетилмонооксимом (см. с. 100).

Витамин А в цельном молоке (молозиве) определяют по методу Бессея в модификации А. А. Анисимовой и В. И. Левченко (см. с. 186).

Клиническое значение. Показатели молока и молозива здоровых коров приведены в приложении 9.

Нами (И. П. Кондрахин) установлено, что содержание кетоно­вых тел и мочевины в молоке и молозиве коров находится в пря­мой зависимости от содержания этих веществ в крови. При этом концентрация кетоновых тел и мочевины в крови и молоке иден­тична. Резкое повышение кетоновых тел в молозиве и молоке (вы­ше 10—12 мг%) отмечается при острой стадии кетоза, которая обычно бывает в первые 100 дней лактации. В последующем, при переходе острой формы кетоза в хроническую, уровень кетоновых тел приближается к верхней границе нормы (8 мг%). При заболе­вании коров кетозом содержание мочевины в молоке снижается, что связано, очевидно, с уменьшением мочевинообразовательной функции печени. Таким образом, показатели кетоновых тел и мо­чевины в молозиве и молоке могут служить диагностическими тес­тами при кетозе. Концентрация мочевины в молоке и молозиве повышается при поступлении в организм больших количеств нит­ратного азота.

Содержание витамина А в молозиве и молоке также находится в прямой зависимости от концентрации его в крови. Поэтому сте­пень обеспеченности организма витамином А можно оценивать по концентрации его в молозиве и молоке.

Что касается кальция, неорганического фосфора, магния, то содержание их в молозиве и молоке имеет меньшее клиническое значение, предпочтение отдается определению их в сыворотке крови.

4.2. КЛИНИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МОЧИ

Исследование мочи — неотъемлемая часть в комплексе методов при постановке диагноза, контроля за эффективностью лечения животных. В моче в ряде случаев происходят изменения раньше, чем в крови. Ее физические, химические, цитологические измене­ния отражают состояние не только мочевой системы, но и печени, сердца и других органов, а также кислотно-щелочного равновесия в организме.

Образцы мочи берут от животных в утренние часы при само­произвольном или вызванном рефлекторно специальными при­емами мочеиспускании. В редких случаях делают катетеризацию мочевого пузыря, а у собак и кошек возможен цистоцентоз. У пуш­ных зверей при клеточном их содержании мочу собирают в подве­шенные под клетку чистые эмалированные кюветы. Для уменьше­ния степени ее загрязнения кювету покрывают марлей или сеткой.

Собранную мочу фильтруют. В исключительных случаях мочу консервируют раствором хлороформа (0,6 мл на 100 мл воды) — 2—3 мл на 10 мл мочи; тимолом — 1 кристаллик тимола на 100 мл мочи; жидкостью Мюллера (10 г натрия сульфата, 25 г калия бихромата на 100 мл воды) — 1 мл на 20 мл мочи. Образцы мочи можно заморозить. Анализ неконсервированной мочи проводят в течение 1,5 ч от момента ее взятия. При исследовании уробилино-гена мочу защищают от прямого солнечного света.

В образцах мочи не должно быть истечений из половых органов.

Определение физических свойств мочи. Физичес­кие свойства мочи (цвет, прозрачность, запах, относительная плот­ность) имеют видовую особенность. У жвачных моча от свет­ло-желтого до светло-коричневого цвета, прозрачная. У лошадей моча от бледно-желтого до бурого цвета, слизистой консистенции из-за примеси большого количества муцина. При стоянии в ней появляется тонкая известковая пленка вследствие образования не­растворимого кальция карбоната (СаСОз) из кальция гидрокарбо­ната [Са(НСОз)2]. У свиней моча светло-желтая, прозрачная. У плотоядных — светло-желтая или желтая, прозрачная.

Цвет мочи меняется от присутствия различных красящих эле­ментов, поступающих в организм с кормом, лекарственными пре­паратами, настоями (отварами) лекарственных трав. Изменение цвета мочи характеризует определенные патологические состояния или болезни. Зелено-бурую окраску моча приобретает вследствие появления в ней билирубина при болезнях печени. Наличие в моче эритроцитов (гломерулонефрит, мочекаменная болезнь), гемогло­бина (гемоглобинурия), миоглобина (паралитическая миоглобину-рия) придает ей красный или темно-коричневый цвет. Темно-жел­тый цвет мочи отмечается при сердечной недостаточности (застой крови в почках), рвоте, диарее; бледный — при несахарном и са­харном диабете; темный — при отравлении гемолитическими яда­ми, гемоспоридиозах.

Прозрачность мочи. Свежесобранная моча здоровых животных прозрачная. Выраженное помутнение мочи вызывает наличие в ней форменных элементов крови, жира, эпителия, бактерий, вы­сокой концентрации уратов, фосфатов, оксалатов. При стоянии мочи на холоде ее помутнение обусловлено выпадением уратов, в тепле — фосфатов. Однако цвет и прозрачность мочи еще не сви­детельствуют об отсутствии заболеваний мочевой системы и других органов.

Запах мочи. Свежая моча имеет специфический запах, свойс­твенный животным определенного вида. После стояния она при­обретает слабый аммиачный запах, обусловленный щелочным бро­жением. Аммиачный запах свежей мочи свидетельствует о воспа­лении мочевого пузыря. Запах ацетона появляется при кетозе коров и суягных овцематок, при тяжелом течении сахарного диа­бета (кетоацидоз). Гнилостный запах мочи появляется при гнилос­тных или гангренозных процессах в мочевом пузыре и почечной лоханке.

Относительная плотность мочи. Относительная плотность мочи — это показатель, отражающий содержание растворимых в моче ве­ществ (мочевины, мочевой кислоты, креатинина, различных солей) и способность почек к концентрированию и разведению мочи.

Относительную плотность мочи измеряют с помощью ареомет­ра (урометра) с диапазоном шкалы от 0,001 до 1,050. В цилиндр вместимостью 50 мл наливают мочу комнатной температуры, избе­гая образования пены, затем в нее осторожно опускают урометр. После прекращений его колебаний отмечают относительную плот­ность по положению нижнего мениска на шкале урометра. Уро­метр не должен касаться стенок цилиндра. У мелких животных, когда мочи бывает мало, ее можно развести в 2—3 раза дистилли­рованной водой и последние после единицы цифры умножить на степень разведения. Нормативы относительной плотности мочи приведены в таблице 43.