Классификация вибрионов (по Хейбергу)

Группа	Манноза	Саха­ роза	Арабиноза
I	+	+	_
II	—	+	—
III	+	+	+
IV		+	+
V	+		—
VI	—	—
VII	+	—	+
VIII		—	+

Отличительной чертой классического биотипа холер­ного вибриона от холероподобных является то, что он не гемолизирует эритроциты барана. Биотип Эль Тор обла­дает способность гемолизировать эритроциты бара­на, однако в последние

годы встречаются негемо­литические штаммы. В целом биохимические те­сты помогают дифферен­цировать холерные виб­рионы от холероподобных (табл. 11 и 12).

Оба биотипа холерно­го вибриона патогенны только для человека. В естественных условиях животные не болеют хо­лерой. Экспериментально удается заразить морских свинок, кроликов-сосун-

ков, котят, обезьян введением культуры холерного ви­бриона в желудок с предварительной нейтрализацией желудочного сока раствором бикарбоната натрия. Од­нако клиническая картина болезни у них иная, чем у человека. Животные погибают в течение нескольких дней при явлениях энтерита.

Дифференциальные признаки холерных вибрионов

	Холеро- подобные вибрионы	Холерный вибрион
Признак		классиче­ ский	биотип Эль Тор
Ферментация углеводов: сахароза		+	+
манноза	—	+	+
арабиноза	+		—
крахмал	+	+	+
Нитрозо-индоловая реакция	—	+	+
Разжижение желатина	(+) +	+	+
Гемолиз эритроцитов барана		—	+
Реакция агглютинации О—I сыворот­	.	+	(-) +
кой Гемагглютинации куриных эритроцитов			+
Рост на среде с полимиксином		—	+
Лизис фагом: IV тип Мукерджи		+
Эль Тор 2			+

Патогенез и клиника. Заражение происходит при упо­треблении инфицированных холерным вибрионом воды и пищи, а также через загрязненные руки и предметы оби­хода. Кислая реакция желудочного сока губительна для возбудителя. Поэтому для дальнейшего развития инфек­ции играют роль состояние кислотности желудочного со­ка в момент инфицирования, характер пищи, с которой вибрион попадает в желудок. Наличие ахилии, гипо- и анацидные гастриты, отсутствие кислоты натощак спо­собствуют более легкому проникновению возбудителя в кишечник и развитию заболевания. Попав в тонкий ки­шечник, вибрионы интенсивно размножаются благодаря щелочной реакции среды и высокому содержанию основ­ного продукта расщепления белков — пептона. Быстроту их размножения в тонком кишечнике сравнивают с рос­том на щелочной пептонной воде. Инкубационный пери­од короткий: от нескольких часов до 5 сут. В течение его больные уже могут выделять возбудителя во внешнюю среду с испражнениями. Холерные вибрионы локализуют­ся в поверхностных слоях слизистой оболочки тонкого кишечника и его просвете, где накапливается огромное количество микроорганизмов и токсических субстанций, образующихся в процессе роста и разрушения вибрионов. Общее действие холерных токсинов состоит в поражении центральной и вегетативной нервной системы и ряда па­ренхиматозных органов. Вместе с тем они оказывают прямое токсическое действие на эпителиальные клетки кишечника, проявляющееся резкой гиперемией, отеком слизистой оболочки, а затем некротизацией эпителиаль­ных клеток. При этом нарушаются секреторная и всасы­вающая функции кишечника, ускоряется выделение воды и ионов калия из тканей в просвет кишки, что проявля­ется в виде профузного поноса. В клинической картине различают три стадии. Первая стадия (холерный энте­рит) характеризуется частым и обильным стулом, кото­рый приобретает вид жидкого рисового отвара. Во вто­рой стадии (гастроэнтерит) к поносу присоединяется рвота. Рвотные массы и испражнения содержат большое количество холерных вибрионов. Частые приступы рвоты и понос приводят к потере больным в течение П/г—2 сут до 40 л жидкости, вместе с которой выводится большое количество белка и солей. Это ведет к резким сдвигам в водном и солевом балансе организма. Общее состояние прогрессивно ухудшается. Развивается III стадия (алгид- ная): температура тела снижается, вследствие обезвожи­вания ткани теряют эластичность, кожа становится се­ро-синюшного оттенка, глаза западают, пульс и дыхание слабые, учащенные. При отсутствии лечения болезнь заканчивается смертью примерно в 60% случаев. Кроме типичной клинической картины холеры, встречаются раз­личные формы заболевания, начиная с бессимптомных и кончая в редких случаях тяжелой формой «сухой» холе­ры, когда больной может умереть через несколько часов при явлениях тяжелой интоксикации. Заболевания, вызы­ваемые вибрионом Эль Тор, протекают значительно легче.

Иммунитет. Перенесенное заболевание оставляет стой­кий иммунитет, который носит характер антитоксиче­ского и антимикробного.

Микробиологическая диагностика. Микробиологиче­ский диагноз при холере имеет огромное значение и дол­жен быть проведен в кратчайшие сроки. Цель исследова­ния — подтверждение диагноза болезни, выявление виб- риононосителей, обнаружение холерного вибриона во внешней среде для своевременной организации санитарно­противоэпидемических мероприятий. В зависимости от этого в лабораторию направляют для микробиологиче­ского исследования испражнения и рвотные массы боль­ного, кусочки органов трупа, воду, пищевые продукты, предметы обихода больного.

Взятие материала, его доставка в лабораторию и ра­бота с ним должны проводиться с соблюдением всех мер, обеспечивающих безопасность лиц, производящих эту работу.

При выделении холерного вибриона используют его способность быстро размножаться в щелочной среде, опе­режая рост других микробов, потребность в кислороде, подвижность.

Ход исследования. 1. Микроскопия доставленного ма­териала. Нередко холерные вибрионы обнаруживаются в мазках, окрашенных фуксином, расположенными в виде стаек рыб. Производят посев на 1 % пептонную воду и на плотные среды (щелочной агар, среда Дьедоне).

2. Через 6—8 ч на 1 % пептонной воде появляется рост в виде нежной пленки, из которой делают мазки; окраши­вают их фуксином, микроскопируют, изучают подвиж­ность, отсеивают на щелочной агар для выделения чистой культуры. В случае отсутствия пленки на первой пептон­ной воде производят высев на вторую пептонную воду. Выросшие на щелочном агаре подозрительные колонии

испытывают в ориентировочной реакции агглютинации с сывороткой О — I на стекле и отсевают на скошенный щелочной агар. Если подозрительные колонии не агглю­тинируются сывороткой О — I, следует аналогичным об­разом испытать 5—10 колоний, так как могут встречаться неагглютинирующиеся разновидности.

2. Полученную на скошенном агаре культуру подвер­гают дальнейшему изучению для установления вида виб­риона в соответствии с признаками, приведенными в табл. 12.

Исследование воды. К 20 мл стерильной 10% пептонной воды добавляют 200 мл исследуемой воды. Инкубируют 6—8 ч в термостате, затем 1—2 мл пробы пе­реносят в пробирку с 10 мл 1% пептонной воды. В даль­нейшем исследование проводят по описанной схеме. Вто­рой метод исследования воды заключается в фильтра­ции через стерильные бактериологические фильтры 1 л исследуемой воды. Затем фильтр помещают во флакон с 1 % пептонной водой или на чашку с твердой питатель­ной средой. Пробы пищевых продуктов растирают в ступ­ке, добавляя пептонную воду, и исследуют тем же мето­дом, что и воду.

С целью ретроспективной диагностики заболевания про­водят серологическое исследование: ставят

реакцию агглютинации сыворотки больного с холерным диагностикумом, реакцию пассивной гемагглютинации, реакцию определения вибриоцидных антител, определе­ние копроантител, токсиннейтрализующих антител.

Учитывая значение микробиологического исследова­ния и его срочность, рекомендуется наряду с классичес­ким применять ускоренные методы микробиологической диагностики холеры. К ним относятся: 1. Люминес­

центно-серологический метод, основанный на ха­рактерном свечении холерных вибрионов при исследова­нии в люминесцентном микроскопе мазков из нативного и другого материалов, обработанных специальными лю- минесцирующими сыворотками.

2. Метод микроагглютинации нативного мате­риала с холерной сывороткой О — I на стекле, которую наблюдают через 5—10 мин под малым увеличением ми­кроскопа в темном поле зрения.

3. Метод иммобилизации холерных вибрионов сывороткой О — I или типовыми холерными фагами в темном поле или фазово-контрастном микроскопе. Холер­ные вибрионы теряют подвижность, склеиваются, образуя кучки.

Эпидемиология. Холера относится к группе особо опас­ных карантинных инфекций и мероприятия по борьбе с ней проводят в соответствии с Международными сани­тарными правилами 1969 г.

Эндемическим очагом холеры является дельта рек Ганга и Брамапутры в ИнДии, где это заболевание известно с древних вре­мен. В начале XIX века холера из Индии и Юго-Восточной Азии рас­пространилась по всему миру. На протяжении 150 лет было зарегист­рировано 6 жесточайших и опустошительных пандемий. 1961 г. счи­тают годом начала 7-й пандемии холеры. Отличительной особен­ностью ее является то, что произошла смена возбудителя: если пер­вые 6 пандемий были вызваны холерным вибрионом Коха, то возбу­дителем 7-й пандемии явился биотип Эль Тор холерного вибриона.

Единственный источник инфекции — больной человек и вибриононосители, выделяющие огромное количество вибрионов в окружающую среду. Продолжительность но- сительства после болезни обычно не превышает 2—3 нед.

В условиях распространения холеры Эль Тор большое значение имеют здоровые вибриононосители. Инфекция передается в первую очередь через воду, пищевые продукты, которые обсеменяются как при непосред­ственном попадании в них испражнений и рвотных масс больного, так и через загрязненные руки и мух.

Плохие санитарные условия и особенно нехватка доб­рокачественной питьевой воды, а также наличие здоро­вых вибриононосителей являются основной причиной рас­пространения холеры.

Профилактика и лечение. Основные принципы борьбы с холерой те же, что и при других кишечных инфекциях. Они регламентируются специальными инструкциями, ко­торые предусматривают: 1) раннее выявление больных, их немедленную изоляцию и госпитализацию, срочную ин­формацию санитарно-эпидемиологической службы; 2) об­следование контактных лиц, изоляцию бактерионосите­лей; 3) текущую и заключительную дезинфекцию в очаге инфекции; 4) санитарно-бактериологический контроль ис­точников водоснабжения, предприятий общественного питания и т. д.

Для специфической профилактики исполь­зуют убитую холерную вакцину. Делают две прививки в дозе 0,5 и 1 мл с интервалом между ними в 7—28 дней. Для массовой иммунизации ограничиваются одной при­вивкой в дозе 1 мл. Иммунитет после прививок непродол­жителен — до 6 мес.

Лечение холеры основано на своевременном вве­дении жидкости, электролитов взамен теряемых с ис­пражнениями. Наряду с этим применяют антибиотики тетрациклинового ряда.