- •Рецензенты
- •Введение
- •Краткий очерк исторического развития микробиологии
- •Часть первая общая микробиология
- •Глава 1 систематика и классификация микроорганизмов
- •Глава II морфология микроорганизмов
- •Бактерии
- •Микоплазмы
- •Плазматическая мембрана (белые стрелки), базальное тельце жгутика в цитоплазме (черная стрелка).
- •Видны жгутики и ворсинки.
- •Спирохеты
- •Актиномицеты
- •Глава III методы микроскопического исследования микробов
- •Микроскопия в световом, оптическом микроскопе
- •Фазово-контрастная микроскопия
- •Электронная микроскопия
- •Глава IV физиология микроорганизмов
- •Химический состав микроорганизмов
- •Питание и метаболизм микроорганизмов
- •Ферменты
- •Дыхание, или биологическое окисление
- •Рост и размножение микроорганизмов
- •Средах.
- •Глава V культивирование микроорганизмов
- •Культивирование бактерий
- •Методы культивирования и получения чистых культур аэробов
- •Методы культивирования анаэробов
- •Культивирование микоплазм и l-форм
- •Культивирование актиномицетов и грибов
- •Культивирование спирохет и простейших
- •Культивирование риккетсий и вирусов
- •Глава VI распространение микробов в природе
- •Микрофлора воды
- •Микрофлора воздуха
- •Нормальная микрофлора человека
- •Глава VII роль микроорганизмов в круговороте веществ в природе
- •Круговорот углерода в природе
- •Круговорот азота в природе
- •Нитрификация (в почве)
- •Круговорот серы, фосфора и железа
- •Глава VIII влияние факторов внешней среды на микроорганизмы
- •Физические факторы
- •Химические факторы
- •Биологические факторы
- •Стерилизация
- •Стерилизация сухим жаром или горячим воздухом.
- •Глава IX
- •Важнейшие антибиотики, полученные из грибов и актиномицетов
- •Антибиотики животного происхождения
- •Глава X . Бактериофаг и бактериофагия
- •Взаимодействие фагов и бактерии
- •Лизогения
- •Распространение фагов в природе
- •Практическое использование бактериофага
- •Значение бактериофага как фактора изменчивости бактерий
- •Глава XI генетика микроорганизмов
- •Фенотипическая изменчивость, или модификации
- •Генотипическая изменчивость
- •Мутации
- •Генотипические рекомбинации. Конъюгация
- •Трансформация
- •Трансдукция
- •Эписомы
- •Глава XII инфекция
- •Взаимоотношения микробов и макроорганизма
- •Характеристика микроорганизмов — возбудителей инфекционных заболеваний
- •Роль макроорганизма в инфекционном процессе
- •Течение инфекционного процесса
- •Эпидемический процесс
- •Факторы и механизмы иммунитета
- •Защитная функция воспаления и фагоцитоз
- •Гуморальные факторы защиты
- •Антигены *
- •Антитела
- •IMecTo соединения с антигеном (активная группа)
- •Клеточный иммунитет
- •Антигена.
- •Антител.
- •Теории иммунитета
- •Использование иммунологических реакций
- •Реакция агглютинации
- •Реакция гемагглютинации
- •Реакция преципитации
- •Реакция лизиса
- •Реакция связывания комплемента
- •Метод флюоресцирующих антител
- •Реакция нейтрализации
- •Вакцины и сыворотки, принципы их применения
- •Глава XIV аллергия и анафилаксий
- •Аллергические реакции немедленного типа
- •Анафилаксия
- •Повышенная чувствительность замедленного типа
- •Инфекционная аллергия
- •Лекарственная аллергия
- •Сывороточная болезнь
- •Глава XV микробиологическая лаборатория и ее оборудование
- •Глава XVI методы лабораторной диагностики инфекционных заболевании
- •Часть вторая частная микробиология патогенные кокки
- •Стафилококки
- •Стрептококки
- •Наиболее распространенные серологические группы стрептококка в в природе и их патогенные свойства (по а. С. Лабинской)
- •Пневмококки
- •Менингококки
- •Гонококки
- •Семейство кишечных бактерии
- •Эшерихии
- •1 Печатается в сокращенном виде.
- •Шигеллы
- •Клебсиеллы
- •Холерный вибрион
- •Классификация вибрионов (по Хейбергу)
- •Синегнойная палочка
- •Возбудитель дифтерии
- •(Чашка Петри).
- •Возбудитель листериоза
- •Семейство микобактерий
- •Возбудитель туберкулеза
- •Грамму).
- •Синим).
- •Стадии деления токсоплазм; д — псевдоциста токсоплазм. Окраска по Романовскому.
- •Гемоглобинофильные бактерии
- •Возбудитель коклюша
- •Возбудитель инфлюэнцы
- •Возбудитель мягкого шанкра
- •Возбудитель туляремии
- •Возбудители бруцеллеза
- •Семейство bacillaceae
- •Возбудитель сибирской язвы
- •Патогенные анаэробы рода клостридий
- •Патогенные спирохеты
- •Трепонемы
- •Боррелии
- •Лептоспиры
- •Риккетсии
- •Возбудитель эпидемического сыпного тифа
- •Возбудитель клещевого риккетсиоза (клещевой сыпной тиф Северной Азии)
- •Возбудитель Ку-лихорадщг
- •Возбудитель орнитоза
- •Возбудитель трахомы
- •Возбудители вирусных заболеваний
- •Поксвирусы
- •Герпесвирусы
- •Вирус ветряной оспы
- •Аденовирусы
- •Миксовирусы
- •Вирус гриппа
- •Рабдовирусы
- •Пикорнавирусы
- •Арбовирусы
- •Актиномицеты
- •Патогенные грибы
- •Патогенные простейшие
- •2 Ядра и более
- •Г амонты
- •1 В периферической крови обнаруживаются только молодые шизонты (кольца) и гамонты.
- •Санитарная микробиология
- •Санитарно-бактериологическое исследование воды
- •Санитарно-бактериологическое исследование воздуха
- •Санитарно-бактериологическое исследование пищевых продуктов
- •Отравление стафилококковым энтеротоксином, отравление ботулиническим экзотоксином
- •Санитарно-бактериологическое исследование смывов с рук и предметов окружающей обстановки
- •Исследование перевязочного и хирургического материала на стерильность
Синегнойная палочка
Палочка сине-зеленого гноя (Pseudomonas aeruginosa) широко распространена во внешней среде. Она является постоянным обитателем кишечника человека и животных, обнаруживается на коже, слизистых оболочках, различных предметах обихода, в почве, воде. Это небольшая подвижная грамотрицательная палочка. Спор и капсул не образует. Факультативный аэроб. Растет на простых питательных средах при широком диапазоне температур: от 5 до 42°С и pH 4,5—9,0. Оптимальная температура роста 37°С, pH 7,2—7,5. В жидкой среде образует помутнение и пленку, на мясо-пептонном агаре — колонии средней величины и крупные (2—5 мм), круглые, полупрозрачные, голубовато-серые с перламутровым оттенком. Характерным признаком Ps. aeruginosa является пигментообразование и ароматообразование, благодаря которому питательные среды при росте микроба окрашиваются в сине-зеленый цвет и имеют характерный запах жасмина.
Пигмент синегнойной палочки — пиоцианин — растворим в воде, принимает участие в дыхании микроба и обладает высокой антибактериальной активностью, однако из-за высокой токсичности в лечебной практике не используется.
Синегнойная палочка ферментирует только глюкозу с образованием кислоты. Протеолитическая активность высокая: разжижает желатин и свернутую сыворотку, свертывает молоко, вызывает гемолиз эритроцитов. Многие штаммы продуцируют вещества, относящиеся к группе бактериоцинов — пиоцины. Описано 25 типов О-антигена Ps. aeruginosa и 8 групп Н-антигенов.
Синегнойная палочка — антагонист многих грамотри- цательных и грамположительных бактерий. Микроб довольно устойчив к различным внешним воздействиям: в пыли помещений выживает 2 нед, выдерживает ультрафиолетовое облучение. При 60°С гибнет в течение 15 мин. Устойчив к большинству антибиотиков. Продуцирует экзотоксин.
Из лабораторных животных наиболее чувствительны к синегнойной палочке кролики, белые мыши и морские свинки. Внутривенное введение культуры вызывает сеп- тикопиемию и смерть в течение 24—48 ч.
Синегнойная палочка относится к гноеродным условно патогенным микробам. В последние годы ее роль в патологии человека значительно возросла: она вызывает самые разнообразные гнойные заболевания, особенно у лиц с пониженной сопротивляемостью инфекции: нагноения ран, остеомиелиты, отиты, пневмонию, легочные абсцессы, а также пищевые отравления, эндокардиты, сепсис и др.
Основной метод лабораторной диагностики — микробиологический, при котором способность к пигментообра- зованию — важный диагностический признак.
Для лечения применяют полимиксин, неомицин, гента- мицин и другие антибиотики.
В группу коринебактерий входят бактерии, имеющие булавовидные утолщения на концах: возбудитель дифтерии (от греч. diphthera — кожа, пленка), дифтероиды (непатогенные коринебактерии), ложнодифтерийные бактерии (палочка Гоффмана).
Возбудитель дифтерии
Возбудитель дифтерии — Corynebacterium diphthe- riae — открыт в 1883—1884 гг. Клебсом и Леффлером.
Морфология и биологические свойства. Коринебакте- терии дифтерии — слегка изогнутые небольшие тонкие палочки размером 0,3—0,4X4—5 мкм, с небольшими булавовидными утолщениями на концах, в которых находятся скопления волютина. Спор и капсул не образуют. Характерными признаками этих бактерий являются полиморфизм (наличие, помимо типичных палочек, длинных, коротких, ветвящихся форм, грушевидных), метахромазия (неравномерное окрашивание тела в связи с более интенсивно окрашивающимися зернами волютина) и расположение палочек в мазке под углом друг к другу, в виде растопыренных пальцев, горсти булавок (рис. 36, 2). Грамположительны. Зерна волютина хорошо выявляются при окраске по Нейссеру: тело бактерий окрашивается в желтый, а зерна волютина — в темно-синий цвет. В носоглотке часто обнаруживаются ложнодифтерийные палочки Гоффмана, более короткие и толстые, чем дифтерийные, и располагающиеся в мазках параллельно друг другу в виде частокола: зерна волютина у них обнаруживаются редко и располагаются беспорядочно.
Возбудитель дифтерии — факультативный аэроб. Температурный оптимум 37°С, pH 7,6—7,8. На простых питательных средах растет плохо. Для выращивания используют элективные сывороточные среды (Ру и Леффлера) и дифференциально-диагностические среды с теллури- том калия (среда Клауберг II, индикаторная, сывороточ- но-теллуритовый агар Тинсдаля и др.). Дифтерийные микробы при росте на дифференциально-диагностических средах восстанавливают металлический теллур из тел- лурита калия, поэтому колонии их темного цвета. Колонии на средах Ру и Леффлера выпуклые, блестящие, их рост напоминает шагреневую кожу. На бульоне Мартена характерен рост в виде пленки.
По культуральным, биохимическими и другим свойствам различают три типа дифтерийных палозек. gravis, mitis и intermedius. На теллуритовых средах тип gravis образует колонии плоские, крупные, с радиальной исчер- ченностью и зубчатыми краями, серовато-черного цвета. Колонии типа mitis более мелкие, выпуклые, блестящие, гладкие, черного цвета. Тип intermedius занимает промежуточное положение. Биохимические свойства дифтерийных бактерий позволяют отличить их от непатогенных представителей рода Corynebacterium, а также дифференцировать на типы (табл. 13).
Таблица 13
Дифференциальные признаки бактерий рода Corynebacterium
Название |
Глюкоза |
Сахароза |
Крахмал |
Уреаза |
Цистиназа (проба Пизу) |
Токсигенность |
Коринебактерии диф |
+ |
__ |
+ |
|
|
+(gravis) |
терии |
|
|
(gravis) |
— |
++++ |
|
|
|
|
|
|
|
—(mitis) |
Дифтероиды |
+ |
+ |
—(mitis) |
± |
± |
— |
Палочка Гоффмана |
— |
— |
— |
+ |
— |
— |
Дифтерийные бактерии ферментируют глюкозу, мальтозу, галактозу до кислоты, не изменяют сахарозу, лактозу, маннит, не разлагают мочевину (проба на уреазу), продуцируют фермент цистиназу (проба Пизу). Бактерии типа gravis ферментируют крахмал и образуют экзотоксин, типа mitis не расщепляют крахмал и нетоксигенны.
Токсинообразование. Дифтерийные бактерии образуют сильный экзотоксин, который при введении в организм избирательно поражает сердечную мышцу, надпочечники и периферическую нервную систему. Силу токсина определяют на морских свинках и измеряют минимальной смертельной дозой (Dim), убивающей животное в течение 3—4 дней.
Дифтерийный токсин малоустойчив, легко разрушается при 60°С, от действия солнечного света и различных хи
мических веществ. Под действием 0,3—0,4% формалина и выдерживания при 40°С в течение месяца он превращается в неядовитое соединение — анатоксин. Анатоксин сохраняет иммуногенные свойства и его используют для иммунизации людей.
Устойчивость. Дифтерийные бактерии довольно устойчивы к низкой температуре. В высушенной дифтерийной пленке остаются жизнеспособными 3—4 мес, на различных предметах и одежде сохраняются много дней. Чувствительны к действию высоких температур: при кипячении погибают мгновенно, при 60°С— в течение 10 мин. Быстро гибнут при действии прямого солнечного света, дезинфицирующих растворов: 3—5% раствор карболовой кислоты убивает их в течение минуты.
Патогенность. Животные дифтерией не болеют. В экспериментальных условиях наиболее чувствительны к заражению морские свинки и кролики. При подкожном введении морским свинкам культуры или токсина развивается картина токсикоинфекции, на месте инъекции возникает воспаление, а затем некроз. На вскрытии обнаруживают гиперемию внутренних органов, увеличение и гиперемию надпочечников, скопление серозного и серозно-геморрагического экссудата в полостях плевры, брюшины, околосердечной оболочки.
Патогенез и клиника. Входными воротами дифтерийных микробов являются слизистые оболочки носоглотки, иногда глаз, половых органов (у девочек), кожа и раны. Инкубационный период равен 3—10 дням. Микроб локализуется на месте входных ворот, где возникает местное фибринозное воспаление и образуются дифтеритические пленки. Они серовато-желтого цвета, тесно спаяны с под- слизистым слоем. Иногда процесс со слизистой глотки распространяется на гортань и бронхи, что сопровождается отеком, сужением гортани и может привести к асфиксии. Токсин дифтерийной палочки, всасываясь в кровь, обусловливает тяжелую общую интоксикацию организма, избирательно поражая сердечную мышцу, надпочечники, нервные клетки. Смерть может наступить от удушья или паралича сердца. Наиболее тяжелые клинические формы дифтерии вызывает тип gravis, а более легкие — mitis.
Иммунитет. После перенесенной инфекции стойкий, хотя возможны повторные заболевания. Формирование его связано с накоплением в крови антитоксина. Антитоксин к дифтерийному токсину обнаруживают у детей до 6-месячного возраста в результате передачи его с кровью матери через плаценту. У взрослых он также накапливается в результате постоянной «бытовой» иммунизации. Лица, у которых в крови содержание антитоксина достигает ‘/зо АЕ на 1 мл, невосприимчивы к дифтерии. Наиболее восприимчивы к этой инфекции дети от 1 года до 6—7 лет. О состоянии иммунитета к дифтерии можно судить по реакции Шика. Для этого во внутреннюю поверхность предплечья внутрикожно вводят 'До Dim дифтерийного токсина. Токсин перед введением разводят таким образом, чтобы данная доза содержалась в объеме 0,2 мл. При отсутствии в крови антитоксина на месте введения токсина через 2—3 дня появляются краснота и припухлость диаметром до 2 см. Если же ребенок невосприимчив к дифтерии, реакция будет отрицательной вследствие нейтрализации введенного токсина содержащимся в крови антитоксином.
Микробиологическая диагностика. Лабораторное исследование производится с целью ранней диагностики заболевания и выявления бактерионосителей среди здоровых лиц. Материалом для исследования служат дифтери- тическая пленка, слизь из носа и глотки. Берут материал двумя стерильными ватными тампонами. Один тампон использую'Гдля посева, а другим делают мазки, окрашивают их по Граму и Нейссеру и микроскопируют. В мазках, сделанных тампоном, дифтерийные микробы нередко совсем не обнаруживаются или встречаются единичные палочки. Поэтому основным методом лабораторной диагностики является микробиологический. Посев производят на чашку с одной из дифференциально-диагностических сред. Через 24—48 ч инкубации в термостате при 37°С просматривают посевы. Из подозрительных колоний делают мазки, окрашивают метиленовым синим. Однако в мазках из колоний на дифференциально-диагностических средах дифтерийные палочки недостаточно типичны по морфологии. Для выделения чистой культуры часть отдельно лежащей подозрительной колонии засевают на скошенный сывороточный агар или свернутую сыворотку (среду Ру). Вторую половину засевают в виде «бляшки» на поверхность среды для определения токсигенности и, не прожигая петли, производят посев уколом в пробирку со столбиком агара с цистином (проба Пизу) для выявления фермента цистиназы.
