Определение группы крови с применением цоликлонов

1. Обработать ампулы с цоликлонами и ампулы с растворителем спиртом.

2. Вскрыть ампулы с цоликлонами ацти-А и анти-В и 2 ампулы растворителя.

3. Перенести растворитель отдельными пипетка­ми в ампулы с цоликлонами.

4. Встряхнуть несколько раз, закрыть ампулы (по­лученные реагенты можно хранить до 3 месяцев).

5. Нанести одну большую каплю цоликлона анти-А и анти-В на чашку.

6. Нанести по одной маленькой капле крови рядом с каплей цоликлона (в 10 раз меньше).

7. Смешать кровь с раствором цоликлона отдель­ными стеклянными палочками.

8. Наблюдать в течение 2,5 мин и оценить реак­цию по следующей схеме:

Цоликон	Реакция исследуемых эритроцитов
Анти-А	-	+	-	+
Анти-В	-	-	+	+
Результат	A (I)	A (II)	B (III)	AB (IV)

Ошибки при определении группы крови

При наличии агглютинации она может остаться незамеченной:

• вследствие высокой температуры окружающей среды (28^оС и выше) – реакция начинается поздно или слабо выражена;

• в случае неверного соотношения объемов сыво­ротки и крови; капля сыворотки должна быть в 8 раз больше капли крови;

• при наличии в эритроцитах слабого агглютиногена;

• при истечении срока годности сывороток или не­правильном их хранении.

Агглютинация ошибочно устанавливается при фактическом ее отсутствии:

• эритроциты склеиваются в «монетные стол6ики». Необходимо добавить в кровь физиологический ра­створ и смешать;

• при низкой температуре окружающей среды (ниже 12^ОС) - появляются зерна из эритроцитов, напоминащие агютинащию,

• при способности эритроцито-в давать агглютина­ции со всеми стандартными сыворотками;

• при долгом стоянии на воздухе смесь начинает подсыхать, появляется зернистость, похожая на агглю­тинацию.

• при нечеткой маркировке на флаконах и ампулах, в сомнительных случаях необходимо провести по­вторную реакцию с гемаглютинирующей сывороткой другой серии.

Определение резус-фактора по стан­дартной сыворотке-антирезус

• приготовить: пипетки, пробирки, физиологичес­кий раствор;

• внести пипеткой 2 капли сыворотки в конусную пробирку;

• добавить пипеткой 1 каплю крови;

• встряхнуть пробирку;

• добавить в пробирку 2 капли физиологического раствора;

• встряхнуть пробирку или вращать между ладо­нями в течение 5 мин;

• посмотреть на стенки пробирки и оценить резуль­тат. Если есть реакция, то у пациента резус-положи­тельный фактор.

8.2 Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови

Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови.

Показание: определение годности крови к переливанию.

Оснащение: флакон или контейнер с эрмассой.

Последовательность действия:

Оценить герметичность упаковки: упаковка должна быть абсолютно целостной; никакие следы нарушения целостности недопустимы, при их наличии кровь непригодна для переливания.

Оценить правильность паспортизации:

• наличие этикетки с номером;

• даты заготовки;

• обозначения группы крови и резус принадлежности;

• наименование консерванта;

• фамилии и инициалов донора;

• наименование учреждения-заготовителя;

• подпись врача;

• штампа о проверке на ВИЧ и вирусный гепатит.

Обратить внимание на срок годности эрмассы, сопоставить его с датой переливания.

Оценить визуально эрмассу во флаконе. Кровь должна быть разделена на три слоя (внизу – красные эритроциты, выше – узкая серая полоска лейкоцитов и тромбоцитов, над ней – желтая прозрачная плазма); плазма должна быть прозрачной; хлопья, пленки, сгустки в плазме свидетельствуют о ее инфицированности и непригодности к переливанию; розовое окрашивание плазмы говорит о гемолизе эритроцитов и непригодности крови к переливанию.

Примечание. Плазма может быть непрозрачной в случае так называемой хиллёзной крови, т. е. крови, содержащей большое количество нейтральных жиров. При нагревании хиллёзной крови до 37^оС, плазма становится прозрачной, если же кровь инфицирована – остается мутной.