Робота 2. 7. Визначення кількості гемоглобіну у крові (за Салі)

Гемоглобін (НЬ) — складний білок (хромопротеїд), який міститься в еритроцитах і становить до 90% сухої речовини. Він складається з білку глобіну ( 96% ) і фар­буючої речовини —гему ( 4% ).

Гемоглобін транспортує кисень до тканин організму. Про окислювальні властивості крові судять за кількістю гемоглобіну, яка залежить від виду, віку і фізіологічного стану тварини.

Визначення кількості гемоглобіну проводиться колориметричним методом за допомогою гемометра Салі. Його принцип полягає в тому, що гемоглобін крові в розчині соляної кислоти переходить у солянокислий гематин, колір якого потім порівнюється із стандартним розчином гематину відповідної концентрації.

Мета досліду. Засвоїти методику визначення гемоглобіну за методом Салі.

Для роботи необхідні: кров тварин, пробірки з штативом, 0,1н. розчин соляної кислоти, спирт, ефір, спиртовий розчин йоду, дистильована вода, набір для взяття крові, піпетка для крові, піпетка для води, вата_, гемометр Салі.

Хід роботи. У градуйовану пробірку гемометра до нижньої мітки наливають 0,1н. розчин соляної кислоти. У капілярну піпетку через гумову трубочку насмоктують 0,02 мм³ крові і видувають її у пробірку приладу. Капіляр виймають із пробірки, скляною паличкою ретельно перемішують її вміст і ставлять пробірку в штатив приладу на 5 хв. Через 5 хв. у пробірку по краплях (постійно мішаючи скляною паличкою) додають дистильовану воду до збігу кольору розчину зі стандартом. Поділки на шкалі пробірки, до якої піднялася рідина, показують кількість гемоглобіну в грам-процентах і в одиницях за Салі. Перерахунок з однієї шкали на іншу простий, наприклад: 15 г-% х 6 = 90 од., а 75 од.׃ 6 = 12,5 г-%. Вміст гемоглобіну в крові визначається головним чином у г-%.

Вміст гемоглобіну в крові сільськогосподарських тварин становить 10-15 г-%.

Результати досліду:

Hb₁ =

Hb₂ =

Hb₃ =

Hb₄ =

Hb₅ =

Hb₁ + Hb₂ + Hb₃ + Hb₄ + Hb₅

Hb_ср = 5

ВИСНОВОК: ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Робота 2. 8. Підрахунок кольорового показнику

Кольоровий показник свідчить про середню ступінь насичення гемоглобіном одного еритроцита. В середньому в нормі кольоровий показник дорівнює одиниці, але при деяких захворюваннях вміст гемоглобіну і кількість еритроцитів змінюється не в однаковій мірі, тобто в одній і тій самій кількості еритроцитів вміст гемоглобіну може бути різним.

Для визначення кольорового показнику застосовують формулу:

,

де НЬ_н — кількість гемоглобіну в нормі у тварини даного виду;

Ер_н — кількість еритроцитів в нормі у тварини даного виду;

НЬ_в —визначена кількість гемоглобіну у піддослідної тварини;

Ер_в — визначена кількість еритроцитів у піддослідної тварини

Для визначення кольорового показнику кількість гемоглобіну може бути виражена в грам-відсотках і в одиницях гемометра. Наприклад, у піддослідної корови встановлено 8 г-% гемоглобіну, еритроцитів у 1 мм³ крові — 4 млн. У нормі великої рогатої худоби в середньому гемоглобіну — 11 г-%, еритроцитів у 1 мм³ - 6 млн.

Кольоровий показник дорівнює (Hb_в•Ep_н)׃(Ep_в•Hb_н)== (8•6)׃(4•11)=1,09.

Результати досліду:

НЬ_н =

Ер_н =

Ер_в =

НЬ_в =

ВИСНОВОК: ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________