56. Методика определения резус-фактора.

Для исследования используют специальные сыворотки, принадлежащие к той же группе крови по системе АВО, что и у данного больного, и содержащие антирезус-антитела, кот. получают из крови резус-отрицательных людей, иммунизированных резус-фактором.

1 . В водяной бане:

В чашку Петри наносят по одной капле сыворотки антирезус в шесть точек (3 одной серии и 3 другой) и в одну точку — одну каплю стандартной сыворот­ки АВ (IV), не содержащую резус-антител (контроль на неспецифическую агг­лютинацию). В первые капли каждой серии сыворотки добавляют одну каплю взвеси исследуемых эритроцитов, во вторые капли каждой серии — одну каплю контрольных резус-положительных, в третью — одну каплю контрольных ре­зус-отрицательных эритроцитов. В контрольную каплю с сывороткой АВ (IV) добавляют одну каплю исследуемых эритроцитов. Капли перемешивают и чаш­ку Петри помещают в водяную баню при температуре 46-48°С на 10 мин. Ре­зультат читают после снятия чашки с водяной бани на белом фоне.

Образцы эритроцитов, давшие агглютинацию с сывороткой антирезус Rh положительные, не давшие агглютинации – Rh-отрицательные. В контрольной капле с сывороткой АВ (IV) агглютинации быть не должно.

2. Экспресс - метод:

На дно пробирки вносят 1 каплю антирезусной сыворотки и 1 каплю исследуемой крови, их смешивают, пробирку переворачивают так, чтобысодержимое растекалось по стенке. Спустя 3мин смотрят за наличием агглютинации. Для исключения ложной агрегации эритроцитов необходимо добавить 2-3 мл физиологического раствора. Наличие агглютинации – кровь резус-положительна.

3. Лабораторные методы:

Это желатиновая проба, непрямая проба Кумбса, определение резус-фактора в присутствии полиглюкина, альбумина и др.

57.Пробы на индивидуальную совместимость при переливании крови.

Проба на индивидуальную совместимость по АВО-системе. На пластин­ку или тарелку наносят 2-3 капли сыворотки больного и туда же добавляют ка­плю крови донора, чтобы соотношение их было 10:1. Пластинку слегка покачивают, наблюдая за ходом реакции 3 мин. Добавляют каплю физраствора и наблюдают еще 2 мин. Если появилась агглютинация, то кровь несовместима и переливать ее нельзя.

Проба на индивидуальную совместимость по Rh-фактору. На чашку Петри наносят 2-3 капли сыворотки больного и в 10 раз меньший объем донорской крови. После перемешивания капли чашку помещают в водяную баню при температуре 46-48°С на 10 мин. Если агглютинации нет, то кровь совместима и ее можно переливать.

В последнее время начала применяться для этой цели проба, разработанная в Белорусском институте переливания крови. Она проводится в пробирке без подогрева в течение 5 мин в следующей последовательности:

- внесите на дно пробирки пастеровой пипеткой 2 капли сыворотки реци­пиента, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33% раствора полиглюкина;

- перемешайте полученную в пробирке смесь и, наклоняя пробирку до горизонтального положения, поворачивайте ее таким образом, чтобы содержи­мое растекалось по стенкам пробирки в нижней ее трети

- по истечении 5 мин долейте в пробирку 2-3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешайте содержимое путем 2-3-кратного переворачивания пробирки (не взбалтывать!).

Наличие агглютинации эритроцитов на фоне просветленной или полно­стью обесцвеченной жидкости указывает на то, что кровь донора несовместима с кровью больного и не может быть ему перелита. Равномерное окрашивание содержимого пробирки без признаков агглютинации эритроцитов свидетельст­вует о совместимости крови донора с кровью больного.

Биологическая проба на совместимость проводится после всех сероло­гических исследований. После пункции вены больному через трансфузионную систему троекратно струйно с интервалом в 3 мин переливают по 15 мл донор­ской крови. Для предупреждения свертывания крови в игле во время трехми­нутного перерыва трансфузию продолжают, редкими каплями (20 капель в ми­нуту). Если при проведении пробы реакции на переливание со стороны больного не выявляется беспокойство, чувство жара во всем теле, стеснение в груди, затрудненное дыхание, боли в животе, пояснице и голове, цианотично-красная краска лица, сменяющаяся бледностью, снижение артериального давления, учащение дыхания и пульса, то донорская кровь биологически совместима и может быть перелита.

Для проведения биологической пробы у детей переливают кровь струйно трехкратно с интервалом по 3 мин в следующих дозах: детям до 2 лет — 2 мл, до 5 лет — 5 мл, до 10 лет— 10 мл, старше 10 лет— 15 мл.

Определенные трудности возникают при проведении биологической про­бы на совместимость во время хирургических вмешательств, когда больной на­ходится под наркозом. Изменение пульса и артериального давления может за­висеть не только от переливания крови, но и от оперативного вмешательства, кровопотери, введения лекарственных веществ, наркоза. Поэтому в сомнитель­ных случаях после переливания первых 100 мл крови в сухую пробирку с не­сколькими каплями гепарина берут 5 мл крови из вены больного и центрифуги­руют. Наличие розовой окраски плазмы (а также учащенный пульс и падение артериального давления) указывают на гемолиз и на то, что переливается несо­вместимая кровь.

При переливании крови от разных доноров пробу на совместимость по системе АВО и биологическую пробу необходимо проводить с кровью каждого донора.