Билет №5

1) 9. Оргя контр ква лаб иссл. Истки вне-и внутрилабх погреш.Кл-я ошибок. Стандартя услй взятя биомат. КК–сма разл меропр и процед, напр на получ точных, прав и диагн надежных резв аналв.– провед внутрилаб контр кач,он дб объект, системм и охват все области измер(N иP).50-70% раб вр – подгот матла к исслед:недост_квалиф_лаб_рабв,плох_кач_реакв,_стандта,неиспрть_аппарры,электрообесп,чист_,отсут_контрго_матла.Осн_этапы_лабанал:1)преанал(46%ошибок)2)анал(кль процры дозиря, проведе иссл, расчет резв)( 47%).3)постанал(7%)( правть оформл бланка,их интерпр..)1):физиол фры,окр среда,быт и професс фры,усл взят прбы, Метка взят пр, спб взят пр,Транспка и хран мат,Подгка достго матла.Предупред крит(6 рез подряд нах по 1стор от сред велич. 3 рез подряд за пред 1сигмы,1 за пред2 сигм,6 следх др за др значй возраст или пони­ж.\\\ резты достовер,но необх меры по их устрю. отраж возне такой ош, при кй лаб анз еще не утрат свое­го знач д\диагн) и контр крит(8 рез-тов за пред от сред квадрат вел, 5 рез за пред 1 сиг,3 рез за пред 3 сиг,1 рез за пред 3 сиг\\\рез недост), правила Вест-Гарда(1 рез за пред 2 си –случ ошка,1 рез за пред 3 с –случ ош,2-3 знач за пред 2 с –систематич ош,4 знач подряд за пр 1 с – системат ош, 10 знач за пред ср линии в одну стор – систем ош).Гаусово распред – все вел- в пред 2 с.Клася и виды ош при лабисх при точть изм.- отсут сист ош и мин случ ош.1.Внелаб 2. Лаб ош.Грубые ош – ош одиноч значя, резты выхт за пред облти.Случ ош –паралл пробы одного мат различмду собой–неточ пипете, утомлее.Систем ош – погрти, одинак по знаку, влияют на всю серию проб. завис от одинак причин, от кач калиб-ра, от кач реактв, от точти пипеток, от прав постря калибр граф.Усл взят и дост мат:Кр: натощ, до физ нагр и диагн процед. За сут до-исключ алког, после 2 ч ночи исключ куре, пищ и жид,8-12 ч голод, триацилглиц-10-12. Полож тела:с prot,alb,crea,chol, trig, alp, ast. из круп вены.Гемол:узкий d иглы, длит забор, интенс р на поршень шпр при вылив в проб-ку.. гемостаз: игл с широк просвет, лучше без шпр,расслаб жгут. д\плазм-цитрат Na. Лдг, аст,алт, ск-плазма-выдел из эрв. д\получ сыв антикоаг не доб-т. 1-1,5 ч после взят. Микрометды-микропроб-ки.Д\исс ферм-сыв. Для электрофор – сыв, горм–плаз,глю, моч–цел кр. электрол праве опред в пл чз ¾-1ч. Если надо и эр и пл-цитрат-отбир, отмыв. Содт в холод 0-4 С- месс-, ск-только в свеж.Моч:Быстр замораж-–20С. к сут V м 5 мл рра тимола и изопропанола (100 г/л), в м не опред желч кты. +HCl 50 мл 10 моль/л на сут кво м-сод-е стероидов и катехоламинов.Для подкисл исп бор кту(1,8г\ 100 мл м).Др консты – жидть Мюллера (10грNa2SO4, 25 г калия бихромата на 100 мл м),хлороформная вода. Д\бак анал – иссл в теч 30 мин

Выпот жид собир в чист сух колб, содю гепарин или цитрат(добся из расч 1 г на 1 л жидк), размеш- на иссл. пунктаты тканей(биох): измельч в соотв V жид, приготовляя из нее гомогенат(рр 0.25ммоль сахзы) или экстракт – вытяжку. 2 типа гомогенв: с разруш и неразруш клет органелами.1) жесткие мды гомогенизи (ступки с кварц песком),2)стекл гомогенизры с тефлон пестиками типа Поттера и Даунса.Мочу:собир всю утр порц в чист, сух посуду, хран не>1,5ч в хол месте.Кал –не>8-12 ч при 3-5 С.Собирв сухую посуд (стекл), избег примеси м, выделго пол орг, др вв, лв.Желуд секря–применять адекватй цели стимулр жел секри.Мокр–чист сух пос(широкогорл банка),дб мокр при кашле, рот прополоск кипяч вод, желат сразу исслед. Наиб достовер-соде трахеи и бронх дереваВыпоты (транссудаты и экссудаты) – скапл в серозных полостях (плевр, брюш, полти перикарда), пунктирт в чист сух пос, антикоаг (1 г на 1 л жид)- в лаб.Достка в спец контейн д\трансп\ки биол\мат.

2) 36 Лабораторные методы характеристики липидного обмена: определение холестерина, триглицеридов, принципы, аналитическая процедура, клиническая значимость. Оценка липопротеинового спектра сыворотки.

ЛП – своеобразные шарики, глобулы, внутри которых находится жировая капля, ядро (сформированное преимущественно неполярными соединениями, в основном триацилглицеринами и эфирами ХС), отграниченное от воды поверхностным слоем из Б, ФЛ, и свободного ХС.

Физические особенности ЛП (их размеры, молекулярная масса, плотность), как и проявление физико-химических, химических и биологических свойств во многом зависит от соотношения между белковым и липидным компонентом, от состава этого компонента.

1)_Наиболее крупными частицами, состоящими на 98% из Л (ТГ 84-87%) и 2% Б считаются хиломикроны (ХМ). Они образуются в клетках тонкого кишечника и являются транспортной формой для пищевых нейтральных жиров, т.е. экзогенных ТГ

2)Транспортной формой эндогенных ТГ являются ЛПОНП. Их образование – защитная реакция организма, направленная на предотвращение жировой инфильтрации, а в последующем и дистрофией печени

3)В плазме крови под влиянием липопротеиновой липазы ЛПОНП (пре-бета-ЛП) трансформируются в ЛП промежуточной плотности (ЛППП) («ремнанты» ЛПОНП), ктр далее с участием печеночной триацилглицеринлипазы (П-ТГЛ-азы) превращаются в

4)ЛПНП. - 80% Л и 20% Б, что обуславливает более высокую плотность частиц. На долю ХС приходится более половины всего липидного компонента ЛПНП. Считают, что ЛПНП и ЛПОНП содержат 2/3 (60%) всего ХС плазмы, тогда как 1/3 приходит на долю ЛПВП.

5)ЛПВП – самые плотные липидо-белковые комплексы, поскольку содержание в них Б составляет около 50% от массы частицы. Их липидный компонент наполовину состоит из ФЛ, наполовину – из ХС, преимущественно эфиросвязанного. ЛПВП также постоянно образуются в печени и частично в кишечнике, а также в плазме крови в результате «дегидратации» ЛПОНП.

Нарушение обмена холестерина.

Холестерин (холестерол) представляет собой вторичный од­ноатомный ароматический спирт, в молекуле которого имеется общее для всех стеринов полициклическое ядро циклопентан­пергидрофенантрена Более половины ХС в организме (65%) сосредоточено в нервной системе, соединительной ткани и мышцах. Характерно, что многие ткани резко отличаются по соотношению в них сво­бодного и эстерифицированнего ХС. Если в надпочечниках 80­-90% составляет эстерифицированный ХС, то практически весь холестерин нервной ткани - это свободный ХС миелиновых мембран.

В организме выделяются два основных фонда ХС: структурный, представленный свободным холестерином плазматических мембран, и метаболически активный, гетероген­ный по фракционному составу.

В плазме крови ХС находится, главным образом, в составе ли­попротеинов низкой и очень низкой плотности (ЛПНП и ЛПОНП), причем 60-70% его представлено в форме сложных эфиров, а 30-40% - в виде свободного, неэстерифицированного ХС. Свободный и эстерифицированный ХС составляют фракцию общего холестерина.

Клинико-диагностическое значение исследовaния холестерина.

При ряде заболеваний внутренних органов уровень ХС плазмы (сыворотки) крови претерпевает как увеличение, так и снижение.

Гиперхолестеринемия - фак­тор риска коронарного атеросклероза. Это подтверждено много­численными эпидемиологическими и клиническими исследова­ниями, установившими связь гиперхолестеринемии с коронар­ным атеросклерозом, частотой клинических проявлений ИБС и инфаркта миокарда.

Самый высокий уровень холестерина отмечается при генети­ческих нарушениях в обмене липопротеинов (ЛП): семейной гомо- и гетерозиготной первичной гиперхолестеринемии, семей­ной комбинированной гиперлипидемии, полигенной гиперхо­лестеринемии. Вторичная гиперхолестеринемия наблюдается при заболеваниях печени, сопровождающихся внутри- и внепеченоч­ным холестазом (обтурационной желтухе), поражениях почек (гломерулонефрите, нефротическом синдроме, хронической по­чечной недостаточности), злокачественных опухолях поджелу­дочной железы и простаты, подагре, гипертонической болезни, эндокринных расстройствах, гипотиреозе, сахарном диабете, хро­ническом алкоголизме, гликогенозе 1 типа, ожирении.

Снижение уровня ХС плазмы - rипохолестеринемия - наблю­дается при голодании, у больных с синдромом мальабсорбции, при поражении ЦНС, умственной отсталости, хронической не­достаточности ССС, кахексии (раковой), гипертиреозе, острых инфекционных заболеваниях, остром панкреатите, острых гнойно­-воспалительных процессах, лихорадочных состояниях, легочном туберкулезе, пневмонии, саркоидозе, бронхите, анемиях, гемоли­тической желтухе, остром гепатите, злокачественных опухолях пе­чени, раке кишечника, ревматизме и некоторых других заболе­ваниях, а также при эффективной гиполипидемической терапии.

Метод определения уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (α-холестерина) основан на способности ЛПНП и ЛПОНП в противоположность ЛПВП образовывать нерастворимые комплек­сы с гепарином в присутствие ионов марганца. В надосадочной жидкости определяют содержание холестерина ЛПВП (α -ХС).

Нормальные величины холестерина ЛПВП (α-ХС) равны 0,9- 1,9 ммоль/л.

Коэффициент атерогенности (КА) рассчитывают по следующей формуле:

КА = ХС - α -ХС / α -ХС

У здоровых людей в норме он составляет 2-3.

Клинико-диагностическое значение α -ХС

Снижение уровня ХС-ЛПВП более четко предсказывает форми­рование ИБС, чем увеличение содержания в плазме (сыворотке) крови общего ХС. Уменьшение концентрации α -ХС всего лишь на 0,13 ммоль/л (с 0,91 ммоль/л до 0,78 ммоль/л) в 3 раза повышает риск заболеваемости ИБС. Значительное уменьшение концентрации α -ХС (до уровня меньше 0,52 ммоль/л) и повышение холестерино­воro коэффициента атерогенности отмечается у лиц с алиментар­ным ожирением, что свидетельствует о риске развития у них ИБС.

Гиподинамия и курение приводят к снижению уровня α -ХС . То же наблюдается при избыточном потреблении сахара. Кон­центрация α -ХС и ЛПВП значительно уменьшается при атеро­склерозе, инфаркте миокарда, сахарном диабете, остром гепати­те, циррозе печени, застойной (обтурационной) желтухе, заболе­ваниях почек, острых бактериальных и вирусных инфекциях. Увеличение концентрации α -ХС отмечено при занятиях физиче­ским трудом (на свежем воздухе), под влиянием эстрогенов, некоторых пестицидов, приема алкоголя.

Триацилглицерины (ТГ) (нейтр жиры) – эфиры трехатомного спирта глицерина и высших жирных кислот. Для их кол опр-ия исп-ют химические и ферментативные (энзимные) методы исследования. Весьма распространены химические методы с колориметрическим и флюориметрическим завершением.

КДЗ: Гипертриацилглицеринемия. Увеличение конц-ии нейтр жиров в крови (до уровня свыше 2,30 ммоль/л) отражает возрастание ур ЛПОНП и ХМ. Для установления содержания ЛПОНП нах-т расч м-дом конц-ю ХС-ЛПОНП: пок-ль конц-ии ТГ (не превыш 3,4 ммоль/л) дел на 2,2, т.к. молярное сод-ие ТГ в лип-ой фазе частиц ЛПОНП превыш в 2,2 раза таковое холестерола. Гипертриацилглицеринемия набл-ся у больных ожирением, хр ИБС, вир гепетитом, алкогольным и билиарным циррозом печени, внепеченочной обтурацией желчных путей, панкреатитами, нефр с., хр поч недостаточностью, гипертонической болезнью, острым инфарктом миокарда, тромбозом сосудов сердца, СД, хр алкоголизмом, подагрой, гликогенозами 1,2,3 типов, бол Дауна, остр перемежающейся порфирией.

Гипотриацилглицеринемия: их ур сниж-ся при гипо- и абеталипопротеинемии, лимфангиэктазии кишечника, терминальной стадии поражения паренхимы печени, ХОБЛ, гипертиреозе, инфаркте мозга, лактозурии, недостаточности питания, синдроме мальабсорбции.